响应面分析

时间:2024.4.20

响应面分析
  在多因素数量处理试验的分析中,可以分析试验指标(因变量)与多个试验因素(自变量)间的回归关系,这种回归可能是曲线或曲面的关系,因而称为响应面分析。例如农作物产量与N、P、K的施肥量有关,可以通过回归分析建立产量与施肥要素间的回归关系,从而求得最佳施肥配方。
  在回归分析中,观察值y可以表述为:
  其中 是自变量 的函数, 是误差项。
  在响应面分析中,首先要得到回归方程 ,然后通过对自变量 的合理取值,求得使 最优的值,这就是响应面分析的目的。
  [例13.15] 有一个大麦氮磷肥配比试验,施氮肥量为每亩尿素0,3,6,9,12,15,18kg 7个水平,施磷肥量为每亩过磷酸钙0,7,14,21,28,35,42kg 7个水平,共49个处理组合,试验结果列于表13.66,试作产量对于氮、磷施肥量的响应面分析。
  表13.66 大麦氮磷肥配比试验结果
  


  对于表13.66的数据可以采用二元二次多项式拟合,那么产量可表示为:
  其中NiPj、 ij分别表示N、P施用量和误差,按此模型的方差分析见表13.67。结果表明b2和b3这两个偏回归系数不显著,应该将模型缩减,逐步去掉不显著的回归系数,得到
  的模型为: 。使用该模型分析的结果为表13.68,从
  中可以看出b1,b4,b5是显著的,b2达到显著,该模型的回归变异占总变异的98%,因此可以较好地说明施用N、P对产量的影响。对此资料作多项式回归分析的方法可参见第11章和附录的SAS程序LT13-15.sas。
  表13.67 二元二次多项式回归分析的方差分析(全模型)
  


  表13.68 二元二次多项式回归的方差分析(缩减模型)
  


  表13.69 二元二次多项式回归的回归系数及其显著性测验(缩减模型)
  


  由表13.69,可以列出产量对N、P施用量的回归方程为:
  由回归方程,可以作出产量对N、P施用量的响应曲面图,如图13.7。
  分别对回归方程求对NP的偏导数,并令偏导数等于0,可以求得极值:
  ,N=13.87(kg)
  ,P=21.61(kg)
  因而由回归方程估计得尿素施用量为13.87kg,过磷酸钙施用量为21.61kg时产量最高。
  响应面分析中通过回归方程进行预测时一般不能超过自变量的取值范围,例如氮肥的取值范围为0至18kg/亩,而磷肥的取值范围为0至42kg/亩。推论合理的处理组合时,也应该这样。


第二篇:响应面分析法


科学研究

食品研究与开发

2009年7月第30卷第7期

2』=,

响应面分析法优化槐米总黄酮的提取工艺

闫克玉,高远翔

(郑州轻工业学院食品与生物工程学院,河南郑州450002)

摘要:通过对槐米总黄酮提取,考察体积分数、提取时间、提取温度、料液比四因素对槐米总黄酮提取率的影响。用RAS软件程序对试验数据进行二次响应面分析,对3项工艺参数进行优化,得出槐米总黄酮提取的二次回归方程;通过分析得出槐米总黄酮提取的最佳条件为:60%乙醇(体积分数),提取2.2h,料液比(g:mL)l:17.9,温度80.0℃。在此条件下测得的总黄酮提取率为18.46%。关键词:槐米;总黄酮;提取;响应面分析法

0PI’IMIZATIONOF’I’HEEXTRACTIONTECHNOLOGYOFTOTALFLAVONEFROMSO,WORAJAPONICA厶

USINGRESPONSESURFACEANAIJSIS

YANKe—yu,GAOYuan-xiang

(SchoolofFoodandBiologicalEngineering,ZhengzhouUniversityofLightIndustry,Zhengzhou

450002,Henan,China)

Abstract:Theeffectsofvolume,time,temperature,theratioof

were

solid-fluid值:mL),ontheyieldoftotalflavone

studiedandtheparametersforoptimumyield

were

obtainedbyusingRASsoftwave.Theresultsshowed

thattheoptimumparameterswas:60percentethanolvolume,2.2situation.theextractionyieldoftotalflavoneis18.46%.Key

h,1:17.9(g:mE),temperature80.0℃.In

this

words:SophorajaponicaL.;totalflavone;extraction;responsesurfaceanalysis

槐米为豆科植物槐树(Sophorajaponica£.)的干燥花蕾及花,槐米。又名槐花米,夏季花蕾形成时或花开放初采收,及时干燥,除去枝、梗及杂质。前者习称”槐米”,后者习称“槐花”。槐米用作药用已有2000多年历史,《神农本草经》还将其列为上品。槐米中含有芦丁、槲皮素、皂苷、多糖等成分,其中。芦丁是主要药用成分,具有凉血止血、清肝泻火功能。因此对其研究有非常现实的意义。目前,我国芦丁生产主要以槐米(槐米中的芦丁随产地及收取时间的不同其含量在10%.

米低糖酸奶工艺研究16]。专家预测槐米饮品及其系列保健产品,很快会风靡世界同。

本文就提取中影响槐米总黄酮提取率的几个重要因素作了系统研究,并运用响应面分析(response

surface

analysis,RSA)法【8】对槐米总黄酮的提取条件

进行了优化。用Box—Benhnken的中心组合实验设计。对试验数据进行RSA法分析。对拟合数学模型进行了较为详细的描述,得到了槐米总黄酮提取的最佳条件。1材料与方法1.1材料

槐米样品:购于河南省医药药材有限公司.60℃干燥,粉碎过40目筛备用;芦丁:生化试剂,上海药品检验所;亚硝酸钠与硝酸铝等均为分析纯。1.2仪器

BS

28%之间)为原料进行提取㈣。槐米是一种营养保健

佳品,可药用也可食用。李杜风利用槐米研究了一种保健香茶闭。槐米其抗氧化成分对食用油脂具有较强的抗氧化作用。可作为一种具有保健功能的新型食用油脂和含脂食品添加剂使用,具有广泛的应用前景[41。此外,槐米还可以在食品中配置饮料。根据槐米的营养价值,以槐米为原料,配合其他辅料研究了一种槐米速溶饮料的工艺[51。还有谭长征利用槐米研究发酵型槐

基金项目:河南省烟草专卖局科技攻关资助项目【豫烟科(2006)7号】作者简介:曰克玉(1950一),男(汉),教授,学士,硕士研究生导师,主要从事烟草原料学、烟草化学、卷烟工艺学的教学和科研工作。

200S电子天平:北京赛多利斯天平有限公司,

感量0.001g;SP-2100型可见分光光度计:上海光谱仪器有限公司;FSJ一114型植物样本粉碎机:农牧渔业部扶沟科学仪器厂;SHB—III循环水式多用真空泵:河南

万方数据

善0030镙7%

卷第期

食品研究与开发民明Ⅵ『乃-=|丌Ⅸ

科学研究

-==22

省巩义市英峪仪器厂:701一A型干燥箱:大连实验设备厂;恒温水浴锅:北京医疗设备总厂;KDM可调控温电热套:山东省光明仪器有限公司:等。1.3方法

1.3.1芦丁标准曲线制作

精确称取经120℃干燥至恒重的芦丁对照品10mg,置于10mL容量瓶中,加乙醇适量,使充分溶解,用乙醇稀释至刻度。摇匀。所得溶液含芦丁对照品1

rag/mE。

精确移取芦丁对照品溶液0.0、0.1、0.2、0-3、O.4、0.5、0.6mL,分别置于10mL容量瓶中,各加水至6mL,加5%亚硝酸钠溶液1.0mL,摇匀,放置6min,加10%硝酸铝溶液1.0mL,摇匀,放置6min,加4%氢氧化钠溶液5.0mL,再加水定容至刻度,摇匀,放置15

min。

按分光光度法(中国药典2000年版一部附录VB),在

510

llm波长处测定吸光度,以浓度(C)与吸光度(A)进

行直线回归,绘制标准曲线,得到标准曲线方程为:A=

10.406C一0.0066(R_2=0.9994)。

1.3.2样品溶液的制备

精确称取干燥槐米粉末30.00g,包人滤纸包,置于索氏提取器中,加300mL石油醚于圆底烧瓶中,回流提取2h进行脱脂,至溶剂无色.取出滤纸包挥干溶剂。再将300mL,80%乙醇放人圆底烧瓶,对样品进行索氏提取至溶液几乎无色。过滤、浓缩后用蒸馏水作溶剂定容于1

000

mL容量瓶中,待用。

总黄酮含量的测定:精密移取前面备用的水溶液

mL,按照标准曲线的测定方法测定吸光度后。在芦

丁标准曲线中查出浓度.计算即可得到样品的总黄酮含量。

1.3.3槐米总黄酮最佳提取条件的确定

通过单因素试验结果分析。选择水浴温度、乙醇浓度、提取时间、液固比四个因素,应用Design—ExpertSoftware7.0软件,设计3因素3水平(共17个试验点5个中心点)的响应面试验,利用响应面试验结果,确定槐米中总黄酮的最佳提取条件。2结果与讨论2.1单因素试验

2.1.1乙醇体积分数对槐米总黄酮提取率的影响

准确称取2.000g槐米粉末4份,置于回流冷凝装置中.分别用不同体积分数的乙醇(30%、45%、60%、75%)回流提取。料液比为1:30,水浴温度60℃,回流提取2h,趁热过滤,冷却后用相同浓度乙醇定容至

100

mL,移取O.1mL按照1.3.1方法测定其吸光度A,

万方数据

98

5盛

璐c

2lOl

乙醇体积分数,%

Concentrationsofethanol/%

图1乙醇体积分数对槐米总黄酮提取率的影响

Extractionconcentrations

on

theextractionrateofflavonoids

2.1.2料液比对槐米总黄酮提取率的影响

准确称取2.000g槐米粉末5份,置于回流冷凝装置中,分别加入料液比为1:10、l:20、1:30、1:40、1:50的60%乙醇,用回流冷凝装置在温度为60℃水浴中浸提3h,趁热过滤,冷却后用相同浓度乙醇定容至

100

mL。移取0.1mL按照1.3.1方法测定其吸光度A

值,得总黄酮提取率与料液比的关系(见图2)。

君lL罄掣

料液I七/(g:mL)

Therationofsolid-liquid/(g:mL)

图2料液比对槐米总黄酮提取率的影响

Fig二Z

Theratesofid-liquid

011

theextractionrateofflavonoids

2.1.3提取时间对槐米总黄酮提取率的影响

准确称取2.000g干燥并粉碎的槐米4份.置于回流冷凝装置中.分别加入料液比为1:30的60%乙醇

60

mL,在温度为60℃的水浴中分别浸提1、2、3、4

h,

趁热过滤,冷却后用相同浓度乙醇定容至100mL,移取

0.1

mL按照1.3.1方法测定其吸光度A.得总黄酮提取

率与提取时间的关系(见图3)。

瓣盛掣

提取时间,II

Extrationtime/h

图3提取时间对槐米总黄酮提取率的影响

Fig.3

Extract/ontimeOntheextractionrateoftlavonoids

Fig.1

得总黄酮提取率与乙醇体积分数的关系(见图1)。

科学研究

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2009年7月第30卷第7期

2.1.4提取温度对槐米总黄酮提取率的影响

准确称取2.000g干燥并粉碎的槐米4份.置于回流冷凝装置中,加入料液比为1:30的60%乙醇60mL。分别在60、70、80、90℃的水浴中浸提3h,趁热过滤,冷却后用相同浓度乙醇定容至100mL。移取0.1mL按照1.3.1方法测定其吸光度A值,得提取温度与总黄酮提取率的关系(见图4)。

盛璀

响应面分析法

温度/℃

Temperature/。C

图4提取温度对槐米总黄酮提取率的影响

FigA

Extractiontemperatureontheextractionrateofflavonoids

2.2采用响应面分析法对槐米总黄酮提取工艺的优化2.2.1响应面分析因素水平的选取

根据Box—Benhnken的中心组合试验设计原理.综合2.1单因素影响试验结果。选取乙醇浓度、提取时间、料液比对槐米总黄酮提取影响显著的3个因素,在单因素试验的基础上采用三因素三水平的响应面分析方法。试验因素与水平设计见表1。

表l响应面试验因素与水平

Tablel

Factorsmadthelevelsofexperiment

ofResponseSurface

Analysis

试验因素

因素水平/Factorlevels

Factors

一1

A提取时I司/hExtractiontime/h

23B乙醇浓度,%Concentrationofethanol/%45

6075C料液附(g,mL)The

ratioof

solid-fluid/(g/mL)

20

30

40

2.2.2响应面分析试验设计方案

以提取时间A、乙醇浓度B、料液比C为自变量,以槐米总黄酮提取率为响应值(’Y),进行响应面分析试验。试验方案及试验结果见表2。

表2响应面分析方案夏试脸结果

Table2

Observedandestimatedvmuesfordifferentlevelsof

experimentaldesign

万方数据

23===一

续表2响应面分析方案及试脸结果

Continue

table

Observedandestimatedvaluesfordi骶rentlevelsofexperimentaldesign

2.2.3多元二次响应面回归模型的建立与分析

对表2试验结果通过RAS软件程序进行二次回归响应面分析.建立多元二次响应面回归模型:

Y=17.52—0.11A+0.77B-0.27C+0.095AB+0.025AC—

O.17BC一0.089A2+1.4082+0.41C2.各因素的方差分析见表3。

表3二次响应面回归模型方差分析Table3Analyzeofmeansquare

从表3可以看出,模型是显著的(P<0.0001),回归模型的决定系数为B(乙醇浓度)、C(料液比)、A(提取时间)、BC(乙醇浓度与料液比的交互作用)、AC(提取时间与料液比的交互作用),它们的Prob>F值分别为

0.0017,0.1218,0.4819.0.4505,0.912

3对总黄酮提取

箬0030镙7南

第卷第期

食品研究与开发民阴岍乃叫丌蹑

科学研究

-==24

率影响显著,说明该模型的拟合度好。

从表3中还可以看出,影响槐米总黄酮提取率的各因素按影响大小排序依次为B(乙醇浓度)、C(料液比)、A(提取时间),其中乙醇浓度达到极著显著水平。

从表3的分析中得出.本试验中AB的交互作用和Bc的交互作用影响显著.试验结果见图5、图7.AC的交互作用见图6。随着B(乙醇浓度)的增加总黄酮提取率先增加后降低再增加,从响应面的图示可以看出,B在0到1.0的范围内,由A的交互作用.总黄酮的提取率较高。

图5提取时间与乙醇浓度交互作用对槐米总黄酮提取率影响响应面

Fig.5

ResponseSurfaceofinterrelatedinfluenceoftime

柚d∞Ⅱ嘲1咖n。n协山V。nmdsmk

图6提取时间与料液比交互作用对槐米总黄酮提取率影响响应面图

Fig.6胁ponseSurfaceofinterrelated

influenceoftimeandthe

ratioofsolid-fluidto

flavonoidsmte

围7乙醇浓度与料液比交互作用对槐米总黄酮提取率影响响应面

F'ig.7

ResponseSurfaceofinterrelatedinfluence

ofconcentration

andtheratioofsolid-fluid

towatertoflavonoids

rate

万方数据

2.2.4模型的验证性试验

通过槐米总黄酮得率的二次多项数学模型解逆矩阵。得出在提取乙醇浓度为63.15%,提取时间为2.21h,水料比为17.9:1和水浴温度83.2℃的工艺条件下。槐米总黄酮最大提取得率预测值为

18.456%。

为检验RSA法的可靠性.采用上述最优提取条件进行槐米总黄酮提取试验。同时考虑到实际操作的便利,将槐米总黄酮提取最佳条件修正为室温下提取时间2.8h,乙醇浓度为60%,料液比1:18,水浴温度为80℃。实际测得的提取率为18.16%。与理论预测值相差不大,因此,采用RSA法优化得到的提取条件准确可靠,具有实用价值。

3结论

响应面法克服了正交设计只能处理离散的水平值,而无法找出整个区域上因素的最佳组合和响应值的最优值的缺陷。响应面分析方法是研究几种因素间

交互作用的回归分析方法。用该方法研究槐米总黄酮提取工艺参数,求得的回归方程精度高;可以准确找到整个区域上因素的最佳组合和响应值的最优值,是比较理想的方法。该方法通过响应面图直观分析了各因素对槐米总黄酮提取率的影响.以及各因素之间对提取过程的交互影响。应用响应面设计法优化出最佳提取条件:乙醇浓度为60%,提取时间为2.2h.料液比1:17.9,水浴温度80.0oC,得到槐米中的总黄酮提取率为18.46%。参考文献:

…1

龚盛昭,何远伦.从槐米中提取芦丁的研究[J】.中国资源综合利用,2003(1):22—24

【2】张来新.槐花米中芦丁的提取【J】.山西化工,2002,22(1):16-17

【3】李杜风,薰淑敏,李兴福,等.槐米保健香茶的研制叨.药膳食疗

研究.1999(2):8

【4】黄海兰,李俊,徐波.槐米抗食用油脂氧化活性及其成分研究【J】.

食品科学。2007,28(8):86-89

【5】王丽英,马玉青,于志彬,等.槐米的营养价值及其速溶饮料的研

究叨.食品科学,2008,24(6):70—73

33(1):37-39

(1):36-37

学报.2001,22(3):91—94

响应面分析法

响应面分析法

响应面分析法

收稿日期:2008—07一17

【6】谭长征.发酵型槐米低糖酸奶工艺研究【J】湖南林业科技,2006,

【7】孙蕾,隋道庆.槐米及其澄清汁饮料的研制[J].经济林研究,1998

【s】慕运动.响应面方法及其在食品工业中的应用Ⅲ.郑州工程学院

响应面分析法

响应面分析法优化槐米总黄酮的提取工艺

作者:

作者单位:

刊名:

英文刊名:

年,卷(期):

引用次数:闫克玉, 高远翔, YAN Ke-yu, GAO Yuan-xiang郑州轻工业学院,食品与生物工程学院,河南,郑州,450002食品研究与开发FOOD RESEARCH AND DEVELOPMENT2009,30(7)0次

参考文献(8条)

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5.王丽英.马玉青.于志彬.刘卫华.田益玲 槐米的营养价值及其速溶饮料的研究[期刊论文]-中国农学通报 2008(6)

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9.期刊论文 许云峰.周建芹.陈晶磊.王剑文.XU Yun-feng.ZHOU Jian-qin.CHEN Jing-lei.WANG Jian-wen 内生青霉菌纤维素酶辅助提取槐米总黄酮 -生物加工过程2009,7(2)

研究内生青霉菌(Penicillium sp.B-4)胞外纤维素酶在槐米总黄酮提取中的辅助应用.内生青霉菌在起始pH 4.5的综合马铃薯培养基中,150

r/min,40 ℃下摇瓶,培养7 d,具有较高的纤维素酶比活力(3.57 U/mL).槐米干粉投入青霉菌发酵液中进行酶解处理,比较酶料比、酶解温度、酶解时间和酶解液pH对槐米总黄酮提取率的影响,发现槐米干粉以酶料比40∶1(mL/g)加入粗酶液中,在pH 4.5、温度40 ℃下酶解处理1 h后,黄酮提取率可达12.2%,比常规提取率增加了38.7%.内生菌纤维素酶辅助提取法为槐米黄酮提取的可行新方法.

10.学位论文 郝博 解毒救脑注射剂的制剂工艺研究 2004

中风又称卒中,是以突然昏仆、半身不遂、口舌歪斜、言语蹇涩或不语、偏身麻木为主要临床表现的一种独立的疾病.相当于西医的急性脑血管病,主要包括缺血性中风和出血性中风两大类型.在临床上一般按中风病发展进程的不同分为急性期、恢复期和后遗症期中风病严重影响人类健康,在许多国家的中风病死率居人口死亡率之首.而对中风病急性期的治疗又在整个治疗过程中起着至关重要的作用.该课题主要对用于中风病急性期的中药新药解毒救脑注射剂的制剂工艺进行了研究与开发.1栀子提取纯化工艺的研究:应用正交试验设计,单因素试验设计等方法,以栀子苷为指标成分,考察并确立了栀子药材水煎煮提取,醇沉除杂,吸附剂纯化的工艺条件.2葛根提取纯化工艺的研究:应用正交试验设计,单因素试验设计等方法,以葛根素为指标成分,考察并确立了葛根药材乙醇回流提取,水饱和正丁醇萃取的工艺条件.3槐米提取纯化工艺的研究:应用正交试验设计,以芦丁和总黄酮为指标成分,考察并确立了槐米药材乙醇回流提取的工艺条件及纯化的工艺条件.4郁金挥发油提取工艺的研究:以挥发油的提取量为指标考察并确立了郁金挥发油的提取工艺.5石菖蒲挥发油提取工艺的研究:以挥发油的提取量为指标考察并确立了石菖蒲挥发油的提取工艺.6解毒救脑注射剂的制剂工艺研究:以栀子苷、葛根素的含量及溶液的澄明度为指标考察了注射剂的pH值,非水溶媒的用量及活性炭的用量,确立了注射剂的制剂成型工艺.

本文链接:http://d..cn/Periodical_spyjykf200907007.aspx

下载时间:20xx年5月21日

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