实验一 糖类的性质实验

(一) 糖类的颜色反应

一、目的

1、了解糖类某些颜色反应的原理。

2、学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。

二、颜色反应

(一)Molisch反应

1、原理 糖在浓无机酸（硫酸，盐酸）作用下，脱水生成糠醛及糠醛衍生物，后者能与萘酚生成紫红色物质。因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性，故此反应不是糖类的特异反应。

2、器材

试管及试管架 滴管

3、试剂

莫氏试剂 1%葡萄糖溶液 1%果糖溶液 1%淀粉溶液 0.1%糠醛溶液 浓硫酸

4、操作

取5支试管，分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1%淀粉溶液、0.1%糠醛溶液内各1ML。再向5支试管中各加入2滴莫氏试剂，充分混合。斜执试管，沿管壁慢慢加入浓硫酸1ML，慢慢立起试管，切勿摇动。浓硫酸在试液下形成两层。在二液分界处有紫红色环出现。观察，记录各管颜色。

实验二 糖的还原作用

一、目的

学习几种常用的鉴定糖类还原性的方法及其原理。

二、原理

许多糖类由于分子中含有自由的醛基及酮基，故在碱性溶液中能将铜、铁等金属离子还原，同时糖类本身被氧化成糖酸及其他衍生物。糖类这种性质常被利用于检测糖的还原性及还原糖的定量测定。

本实验进行糖类的还原作用的试剂为斐林试剂和本尼迪克特试剂。他们是含铜离子的碱性溶液，能使还原糖氧化而本身被还原成红色或黄色的氧化亚铜沉淀 。生成氧化亚铜沉淀的颜色之所以不同是由于在不同条件下产生的沉淀颗粒大小不同引起的，颗粒越小呈黄色，越大则呈红色。

三、器材

试管及试管架 竹试管架 水浴锅 电炉

四 试剂

斐林试剂 本尼迪克特试剂 1%葡萄糖溶液 1%果糖溶液

1%蔗糖溶液 1%麦芽糖溶液 1%淀粉溶液

五 操作

取5支试管，分别加入2ML斐林试剂，再向各试管分别加入1%葡萄糖、1%果糖、1%蔗糖溶液、1%麦芽糖溶液、1%淀粉溶液各1ML。置水浴中加热数分钟，取出，冷却。观察各管溶液的变化。另取6支试管，用本尼迪克特试剂重复上述实验。

实验三 氨基酸的分离鉴定----纸层析法

一、目的

通过氨基酸的分离，学习纸层析法的基本原理及操作方法。

二、原理

纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法。

层析溶剂由有机溶剂和水组成。

物质被分离后在纸层析图谱上的位置用Rf表示。在一定的条件下某种物质的RF是常数 。

三、器材

层析缸 毛细管 喷雾器 培养皿 层析滤纸

四、试剂

1、扩展试剂

2、氨基酸溶液

3、显色试剂

五、操作

1、将盛有平衡溶剂的小烧杯置于密闭的层析缸中。

2、取层析滤纸一张。在纸的一端距边缘2到3厘米处用铅笔划一条直线，在此直线上间隔2厘米作一记号。

3、点样

4、扩展

5、显色

6、计算各种氨基酸的Rf。

实验四 蛋白质的呈色反应

一、目的

1、了解构成蛋白质的基本结构单位及主要连接方式。

2、了解蛋白质的某些氨基酸的呈色反应原理。

3、学习几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法。

二、呈色反应

（一）双缩脲反应

1、原理 尿素加热至180摄氏度，生成双缩脲并放出一分子氨。双缩脲在碱性环境中能与铜离子结合生成紫色化合物，此反应称为双缩脲反应。蛋白质分子中有肽键，也能发生此反应。

（二）茚三酮反应

（三）黄色反应

三 操作

取少量尿素结晶，放在干燥试管中。用微火加热使尿素熔化。熔化的尿素开始硬化时，停止加热，尿素放出氨，形成双缩脲。冷后，加10%氢氧化钠溶液约1ML，震荡混匀，再加1%硫酸铜溶液1滴，再震荡。观察出现的粉红颜色。

第二篇：糖类的性质实验(一)糖类的颜色反应

糖类的性质实验（一）糖类的颜色反应

　　一、目的

　　1．了解糖类某些颜色反应的原理。

　　2．学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。

　　二、颜色反应

　　（一）α-萘酚反应（Molisch反应）。

　　1．原理 糖在浓无机酸（硫酸、盐酸）作用下，脱水生成糠醛及糠醛衍生物，后者能与α-萘酚生成紫红色物质。因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳性，故此反应不是糖类的特异反应。

　　2．器材

　　（1）试管及试管架（2）滴管

　　3．试剂

　　（1）莫氏（ Molisch）试剂： 5％ α-萘酚的酒精溶液1500mL称取α-萘酚5g，溶于95％酒精中，总体

　　积达100mL，贮于棕色瓶内。用前配制。

　　（2）1％葡萄糖溶液 100mL

　　（3）1％果糖溶液 100mL

　　（4）1％蔗糖溶液 100mL

　　（5）1％淀粉溶液 100mL

　　（6）0.1％糠醛溶液 100mL

　　（7）浓硫酸 500mL

　　4．操作

　　取5支试管，分别加入1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、

　　1％蔗糖溶液、1％淀粉溶液、 0.1％糠醛溶液各 1mL。再向5支试管中各加入2滴莫氏试剂，充分混合。斜执试管，沿管壁慢慢加入浓硫酸约1mL，慢慢立起试管，切勿摇动。浓硫酸在试液下形成两层。在二液分界处有紫红色环出现。观察、记录各管颜色。

　　（二）间苯二酚反应（Seliwanoff反应）

　　1．原理

　　在酸作用下，酮糖脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚作用生成红色物质。此反应是酮糖的特异反应。醛糖在同样条件下呈色反应缓慢，只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反应。在实验条件下蔗糖有可能水解而呈阳性反应。

　　2．器材

　　（1）试管及试管架

　　（2）滴管

　　（3）水浴锅

　　3．试剂

　　（1）塞氏（Seliwanoff）试剂 0.05％间苯二酚-盐酸溶液

　　 1000 mL

　　称取间苯二酚0.05 g溶于30 mL浓盐酸中，再用蒸馏水稀释至100 mL

　　（2）1％葡萄糖溶液 100mL

　　（3）1％果糖溶液 100mL

　　（4）1％蔗糖溶液 100mL

　　4．操作

　　取3支试管，分别加入1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、1％蔗糖溶液各0.5 mL。再向各管分别加入塞氏试剂 5 mL，混匀。将3支试管同时放入沸水浴中，注意观察、记录各管颜色的变化及变化时间。

思考题

　　1．可用何种颜色反应鉴别酮糖的存在？

　　2．α-萘酚反应的原理是什么？

　　实验总结

　　（一）α-萘酚反应

　　（二）间苯二酚反应

糖类的性质实验（二）糖类的还原作用

　　一、目的

　　学习几种常用的鉴定糖类还原性的方法及其原理。

　　二、原理

　　许多糖类由于其分子中含有自由的或潜在的醛基或酮基，故在碱性溶液中能将铜、铋、汞、铁、银等金属离子还原，同时糖类本身被氧化成糖酸及其他产物。糖类这种性质常被利用于检测糖的还原性及还原糖的定量测定。

　　本实验进行糖类的还原作用所用的试剂为斐林试剂和本尼迪克特试剂。它们都是含Cu²⁺的碱性溶液，能使还原糖氧化而本身被还原成红色或黄色的Cu₂O沉淀。生成Cu₂O沉淀的颜色之所以不同是由于在不同条件下产生的沉淀颗粒大小不同引起的，颗粒越小呈黄色，越大则呈红色。如有保护性胶体存在时，常生成黄色沉淀。

　　三、器材

　　1．试管及试管架

　　2．竹试管夹

　　3．水浴锅

　　4．电炉

　　四、试剂

　　1．斐林（Fehling）试剂 1000mL

　　甲液（硫酸酮溶液）：称取34.5 g硫酸铜（CuSO₄·5H₂O）溶于500 mL蒸馏水中。

　　乙液（碱性酒石酸盐溶液）：称取125 g氢氧化钠和137 g洒石酸钾钠溶于500 mL蒸馏水中。

　　为了避免变质，甲、乙二液分开保存。用前，将甲、乙二液等量混合即可。

　　2．本尼迪克特（Benedict）试剂1000 mL

　　称取柠檬酸钠173 g及碳酸钠（Na₂CO₃·H₂O）100 g加入600 mL蒸馏水中，加热使其溶解，冷却，稀释至850 mL。

　　另称取17.3 g硫酸铜溶解于 100 mL热蒸馏水中，冷却，稀释至150mL。

　　最后，将硫酸铜溶液徐徐地加入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中，边加边搅拌，混匀，如有沉淀，过滤后贮于试剂瓶中可长期使用。

　　五、操作

　　先取1支试管加入斐林试剂约 1mL，再加入4 mL蒸馏水，加热煮沸，如有沉淀生成，说明此试剂已不能使用。经检验，试剂合格后，再进行下述实验。

　　取5支试管，分别加入2 mL斐林试剂，再向各试管分别加入1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、1％蔗糖溶液、1％麦芽糖溶液、1％淀粉溶液各1mL。置沸水浴中加热数分钟，取出，冷却。观察各管溶液的变化。

　　另取6支试管，用本尼迪克特试剂重复上述实验。

　　比较两种试法的结果。

思考题

　　1．斐林氏、本尼迪克特氏试法检验糖的原理是什么？

　　2．试比较斐林氏和本尼迪克特氏试法。

　　实验总结

　　斐林氏与本尼迪克特试法

　　试解释以上表格现象：