实验三 霉菌与放线菌形态观察
姓名:李昳昕 年级专业:08药学节次:周一90节组数:第五组
一、实验目的
1、掌握观察霉菌形态的基本方法,并观察其形态特征
2、掌握观察放线菌形态的基本方法,并观察放线菌的形态特征
二、实验原理
1、霉菌的原理:
霉菌菌丝较粗大,细胞易收缩变形,而且孢子很容易飞散,所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。此染色液制成的霉菌标本片其特点是(a)细胞不变形;(b)具有杀菌防腐作用,且不易干燥,能保持较长时间;(c)溶液本身呈蓝色,有一定染色效果。霉菌的菌丝、分生孢子梗和分生孢子的形态常作为分类的重要依据。
2、放线菌的原理:
放线菌在固体培养基上呈辐射状生长而得名。放线菌是由不同长短的纤细的菌丝所形成的单细胞菌丝体。菌丝体分为两部分,即潜入培养基中的营养菌丝(或称基内菌丝)和生长在培养基表面的气生菌丝。有些气生菌丝分化成各种孢子丝,呈螺旋形、波浪形或分枝状等。孢子常呈圆形、椭圆形或杆形。气生菌丝及孢子的形状和颜色常作为分类的重要依据。
三、实验器材
1、菌种:培养48-72h的曲霉(Aspergillus sp.),青霉 (Penicillium sp.),根霉(Rhizopus sp.), 培养72-120h的5406放线菌(细黄链霉菌).
2、染色液和试剂:乳酸石炭酸棉蓝染色液,生理盐水,石炭酸复红染液,吕氏碱性美蓝染液.
3、器材:土豆培养基平板或查氏培养基平板,高氏1号培养基平板, 接种环,载玻片,盖玻片,镊子,酒精灯等。
四、实验方法
(一) 霉菌观察:
1、直接观察: 将培养3—4天的霉菌培养皿打开,放在显微镜低倍镜下寻找菌落的边缘,直接观察菌丝,分生孢子梗和分生孢子。
2、染色观察: 于洁净载玻片上,滴一滴乳酸石炭酸棉蓝染色液,用镊子从霉菌菌落的边缘外取少量带有孢子的菌丝置染色液中,再细心地将菌丝挑散开,然后小心地盖上盖玻片,注意不要产生气泡。置显微镜下先用低倍镜观察,必要时再换高倍镜。
(二) 放线菌观察:
1、放线菌自然生长状态的观察
将培养3—4天的放线菌培养皿打开,放在显微镜低倍镜下寻找菌落的边缘,直接观察菌丝,孢子丝和孢子。
2、染色观察
(1)用接种铲或镊子连同培养基挑取放线菌菌苔置载玻片中央。
(2)用另一载玻片将其压碎,弃去培养基,制成涂片,干燥、固定。
(3)用吕氏碱性美蓝染液或石炭酸复红染液染0.5—1分钟,水洗。
(4)干燥后,用油镜观察营养菌丝,孢子丝及孢子的形态。
五、实验结果
1、绘图说明你所观察到的霉菌形态特征。
(根霉)
2、绘图说明你所观察到的放线菌形态特征。
六、思考题
1、霉菌对人类生活和生产能产生哪些积极作用和消极作用?
霉菌在自然界分布极为广泛。它们存在于土壤、空气、水体和生物体内外等处,与人类关系极为密切。
积极作用:1.应用于柠檬酸、葡萄糖酸等多种有机酸,淀粉酶、蛋白酶和纤维素酶等多种酶制剂,青霉素和头孢霉素等抗生素,核黄素等维生素,麦角碱等生物碱,真菌多糖和植物生长刺激素(赤霉素)等产品的生产;
2.利用某些霉菌对甾族化合物的生物转化生产甾体激素类药物;
3.食品酿造:酿酒、制酱及酱油等;
4.基础理论研究:如对粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)的研究为生化遗传学建立提供了大量资料。
消极作用:霉菌能引起粮食、水果、蔬菜等农副产品及各种工业原料、产品、电器和光学设备的发霉或变质,也能引起植物和动物疾病,如马铃薯晚疫病、小麦锈病、稻瘟病和皮肤癣症等。
2、在自然界和实际应用中放线菌有什么作用?
放线菌广泛分布于含水量较低、有机物较丰富、微碱性土壤中。
放线菌与人类的关系极为密切:
1.放线菌主要能促使土壤中的动物和植物遗骸腐烂。
2.放线菌中也有致病菌,如牛放线菌,在口颊、齿龈等部位发生损伤时能侵入组织内 ,引起放线菌病。最主要的致病放线菌是结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌,可导致人类的结核病和麻风病。
3.放线菌最重要的作用是可以产生、提炼抗菌素,目前世界上已经发现的2000多中抗菌素中,大约有56%是由放线菌(主要是放线菌属)产生的,如链霉素、土霉素、四环素、庆大霉素等都是由放线菌产生的
4.此外有些植物用的农用抗菌素和维生素等也是由放线菌中提炼的。
5.放线菌在甾体的转化、石油的脱蜡、污水的处理等方面也有广泛的用途,在自然界的氮素循环中也起着一定的作用。