实验八 影响尿生成的因素

一、实验目的：

学习用膀胱套管引流的方法；观察不同生理因素对动物尿量的影响。加深对尿生成调节的理解。

二、实验原理：

尿是血液流过肾单位时经过肾小球滤过作用，肾小管重吸收和分泌而形成，凡对这些过程有影响的因素都可能影响尿的生成。肾小球的滤过作用取决于肾小球的有效滤过压，其大小取决于肾小球毛细血管血压。影响肾小球重吸收作用主要是管内渗透压和肾小管上皮细胞的重吸收能力，后者又被多种激素调节。

三、实验步骤

1.标本的制备

(1)实验兔在实验前应给予足够的菜和饮水。

(2)称重动物，耳缘静脉注射20%的氨基甲酸乙酯溶液（5 ml·kg-1体重）进行麻醉，待动物麻醉后仰卧固定于手术台上。

(3)在颈部手术 ①暴露气管，施气管插管；②分离左侧颈总动脉，按常规将充满肝素生理盐水的动脉插管插入其内，通过血压换能器连至记录装置，描记血压。③分离右侧的迷走神经，穿线备用，用温生理盐水纱布覆盖创面。

(4)尿液的收集可选用膀胱导管法或输尿管插管法。

.①膀胱导尿法 自耻骨联合上缘向上沿正中线作4 cm长皮肤切口，再沿腹白线剪开腹

壁及腹膜（勿伤腹腔脏器），找到膀胱，将膀胱向尾侧翻至体外（勿使肠管外露，以免血压下降）。再于膀胱底部找出两侧输尿管，认清两侧输尿管在膀胱开口的部位。小心地从两侧输尿管下方穿一丝线，将膀胱上翻，结扎膀胱颈部。然后，在膀胱顶部血管较少处作一荷包缝合，再在其中央剪一小口，插入膀胱导管，收紧缝线、结扎固定。膀胱导管的喇叭口应对着输尿管开口处并紧贴膀胱壁。膀胱导管的另一端通过橡皮导管和直管连接至记滴器，并在它们中间充满生理盐水。

②输尿管插管法 沿膀胱找到并分离两侧输尿管，在靠近膀胱处穿线将它结扎；再在此结扎前约2厘米的近肾端穿一根线，在管壁剪一斜向肾侧的小切口，插入充满生理盐水的细塑料导尿管并用线扎住固定，此时可看到有尿滴滴出。再插入另一侧输尿导管。将两插管并在一起连至记滴器。手术完毕后，用温生理盐水纱布覆盖腹部切口。

2.仪器连接

①计算机生物信号采集处理系统： 将压力换能器接在2通道，尿滴记录线接在记滴器上，通过计滴器与系统的4通道连结，描记尿的滴数。刺激电极与系统的刺激输出相连。

②二道生理记录仪、刺激器、记滴器： 先将记滴电极连至生理、药理多用仪的记滴输入，再用外接线将生理、药理多用仪的记滴信号和时间标记信号输入二道生理记录仪的外接信号输入插座，由记录仪的两个标记描笔分别记录尿滴和时间间隔(10 s)；

压力换能器的输出连至二道生理记录仪的上线记录血压；刺激电极连于刺激器输出。

手术和实验装置联接完成后，放开动脉夹，开动记滴器，记录血压及尿量，进行下列观察。

3.实验项目

(1)记录正常情况下每分钟尿分泌的滴数。

(2)耳缘静脉注射38℃的0.9%NaCl溶液15～20 ml，观察血压和尿量的变化。

(3)取尿液2滴至装有1 ml班氏试剂的试管中，在酒精灯上加热作尿糖定性实验。然后耳缘静脉注射38℃的20%葡萄糖溶液5 ml，观察尿量的变化。待尿量明显增多时，再取尿液2滴作尿糖定性试验。

(4)耳缘静脉注射去甲肾上腺素（1：10000）0.5 ml，观察血压和尿量的变化。

(5)结扎并切断右侧迷走神经，连续刺激迷走神经的外周端20～30 s，使血压降至6.67 kPa（50 mmHg）左右，观察血压和尿量的变化。

(6)耳缘静脉注射垂体后叶素1～2 U(0.2 ml），观察血压和尿量的变化。

(7) 补充生理盐水,观察血压和尿量的变化。

四、实验结果：

（1）正常情况下每分钟尿分泌的滴数为

（2）耳缘静脉注射38℃的0.9%NaCI溶液15-20ml，血压变化不大，

尿量增加。

(3) 耳缘静脉注射38℃的20%的葡萄糖溶液5ml，血压变化不大，

尿量增加，出现尿现象。

（4）耳缘静脉注射去甲肾上腺素(1;10000)0.5ml，血压明显升高，

尿量减少。

耳缘静脉注射速尿(5ml/kg),血压变化不大，尿量急剧增加。

（5）结扎并切断右侧的迷走神经，连续刺激迷走神经的外周端

20-30ms，血压下降，尿量明显较少。

(6)耳缘静脉注射垂体叶后素0.2ml，血压升高，尿量减少。

（7）补充生理盐水：血压有所回升，尿量逐渐增加。

四、实验分析：

（1）肾小球的有效滤过压=肾小球毛细血管血压—（血浆胶体渗透

压+肾小囊内压）。生理盐水使血浆胶体渗透压下降，肾小球有效滤过

压上升，滤过作用增强，尿量增多。

（2）去甲肾上腺素使全身小动脉收缩，外周阻力加大，血压上升；

去甲肾上腺素使肾小动脉收缩，肾血流量减少，肾小球滤过率降低，

尿量减少。

（3）速尿是利尿药，作用是消弱肾髓质的高渗梯度，集合管对水

的重吸收减少，因此尿量增加。

（4）神经垂体素中含有抗利尿激素，使全身小动脉收缩，外周

阻力加大，血压上升；抗利尿激素增加集合管和远曲小管对水的通透性，促进对水的重吸收，尿量减少。

（5）血糖升高，大量葡萄糖从肾小球滤过，肾小管管腔内血压升高，妨碍水的重吸收，尿量减少。

（6）迷走神经兴奋，心脏活动抑制，心输量降低，血压下降，肾小球毛细血管血压下降，肾小球的有效滤过压下降，肾小球滤过率降低，尿量减少。

（7）迅速补充生理盐水：血容量恢复正常，，肾小球毛细血管血压升高，肾小球有效滤过压升高，滤出量增加，尿量增加。

五、注意事项

1.选择家兔体重在2.5-3.0kg左右，实验前给兔多喂菜叶，或用橡皮导尿管向兔胃内灌入40～50 ml清水，以增加基础尿量。

2.手术动作要轻揉，腹部切口不宜过大，以免造成损伤性闭尿。剪开腹壁避免伤及内脏。

3.因实验中要多次进行耳缘静脉注射，因此要注意保护好兔的耳缘静脉。应从耳缘静脉的远端开始注射，逐渐向耳根部推进。

4.输尿管插管时，注意避免插入管壁和周围的结缔组织中；插管要妥善固定，不能扭曲，否则会阻碍尿的排出。

5.实验顺序的安排是：在尿量增加的基础上进行减少尿生成的实验项目，在尿量少的基础上进行促进尿生成的实验项目。一项实验需

在上一项实验作用消失，血压、尿量基本恢复正常水平时再开始。

6.刺激迷走神经强度不宜过强，时间不宜过长，以免血压过低，心跳停止。

六、问题分析

1.开始实验尚未给药时，尿量就很少或无尿

(1) 兔体缺水

(2) 兔本身机能状况低下，

(3) 输尿管插管未插入输尿管内，或输尿管堵塞，或输尿管扭曲。

(4)腹部切口过大，引起抗利尿激素分泌，血压下降，尿量减少。

(5) 气温太低，动物未保温，血管收缩，尿量减少。

第二篇：尿生成的影响因素实验报告

尿液生成的影响因素

一、实验目的

     学习膀胱插管技术，学习尿量的记录和测量方法。观察神经体液因素（生理盐水、葡萄糖、去甲肾上腺素、呋塞米、垂体后叶素）对尿生成的影响，并分析其作用机制。

二、关键词

尿生成；尿量；影响因素

三、实验材料

    家兔；氨基甲酸乙酯、生理盐水20ml、20%葡萄糖5ml、0.01%去甲肾上腺素0.3ml、呋塞米1.5ml、垂体后叶素0.33ml；手术剪、镊子、止血钳、玻璃分针、兔手术台、膀胱插管、注射器及针头、微机生物信号采集处理系统、棉线若干、婴儿秤。

四、实验步骤

1．静脉麻醉 从兔耳缘静脉注射氨基甲酸乙酯。待兔麻醉后将其仰卧，先后固定四肢及兔头。

2．颈部手术 剪去颈前部兔毛，正中切开皮肤5～6厘米，用止血钳纵向分离软组织及颈部肌肉，暴露气管及与气管平行的右血管神经鞘，细心分离出右侧鞘膜内的迷走神经，在神经下穿线备用。

3.腹部手术 从耻骨联合向上沿中线作长约4厘米的切口，沿腹白线打开腹腔，将膀胱轻拉至腹壁外，先辨认清楚膀胱和输尿管的解剖部位，用止血钳提起膀胱前壁(靠近顶端部分)，选择血管较少处，切一纵行小口，插入插管后膀胱即随着尿液的流出而缩小。如膀胱壁较松驰而膀胱容积仍较大时，可用粗线将膀胱扎掉一部分，使膀胱内的贮尿量减至最少。用线结扎膀胱颈部以阻断膀胱同尿道的通路。

使插管的引流管出口处低于膀胱水平，用培养皿盛接由引流管流出的尿液，手术完毕后，用温热的生理盐水纱布覆盖腹部创口，并关闭腹腔。

5.改变影响因素

   （1）.快速注射生理盐水20ml，记录尿量变化 。

（2）.快速静脉注射20％葡萄糖5ml，记录尿量变化。

（3）. 静脉注射去甲肾上腺素0.3ml，记录尿量变化。

（4）. 静脉注射呋塞米5mg/kg，记录尿量变化。

（5）. 缓慢静脉注射垂体后叶素2单位即0.33ml，记录尿量变化。

五、实验结果

六、讨论分析

1.快速注射生理盐水 

静脉快速注射大量生理盐水后，在2~3分钟后尿量稍有增加。原因可能是是静脉快速注射大量生理盐水后,血浆蛋白被稀释，使血浆胶体渗透压降低，肾小球有效滤过压增加。另一方面肾血浆流量增加，血浆胶体渗透压升高速度减慢，达到滤过平衡时间推迟，于是肾小球滤过率增加，尿量增加，且反应时间相对较长。同时也使循环血量增多，作用于左心房和胸腔大静脉壁上的容量感受器，通过迷走神经反射性地抑制血管升压素的合成和分泌，远端肾小管和集合管对水的重吸收减少，尿量增多。此外循环血量的增多使心房扩张，刺激心房钠尿肽的合成，增加排水排尿的作用。

2.快速注射葡萄糖

家兔静脉注射20％葡萄糖5ml，尿量有所增多。原因是注射葡萄糖可使血浆渗透压升高，促进组织也流入毛细血管，循环血量增加引起血压升高。3kg的家兔，血容量约为180ml，血糖浓度为100mg/dL，而一次性注射20%葡萄糖5ml，血糖升至约600mg/dL，使家兔的血糖浓度明显超过肾糖阈，导致小管液中葡萄糖含量增多，小管液渗透压增高，妨碍了水和NaCl的重吸收，造成尿量增多并出现糖尿。 另外血压升高可使肾小球滤过率增高且反射性抑制ADH的合成和分泌，也可使尿量增多。

3.去甲肾上腺素

静脉注射去甲肾上腺素后，尿量稍微有些下降。原因是去甲肾上腺素可兴奋血管平滑肌上的α-肾上腺素受体，能使肾血管收缩，外周阻力增加，同时对心脏起到正性变时、变力、变传导作用。并且肾血流量减少，从而使肾小球毛细血管血压降低，有效滤过压降低，肾小球滤过率减小，尿的生成量减少，尿量减少。

4.呋塞米 

注射呋塞米后，尿量明显大量增多，4分钟时出现峰值。原因是髓袢升支粗段对Na^＋和Cl^－的主动重吸收是外髓部渗透梯度形成的动力，所以，该段NaCl的重吸收直接影响尿的浓缩和稀释。呋塞米等利尿剂能阻抑髓袢升支粗段上皮细胞管腔膜的载体转运功能，使其对Na^＋、Cl^－的重吸收受到抑制，影响肾髓质渗透梯度的形成，从而干扰尿的浓缩机制，导致利尿。

5. 垂体后叶素 

注射垂体后叶素后，尿量明显减少。垂体后叶素的主要作用因素为抗利尿激素，抗利尿激素的主要作用是提高远曲小管和集合管上皮细胞对水的通透性，从而增加对水的重吸收，使尿量浓缩，从而使尿量减少。其机制为垂体后叶素包括催产素和ADH，ADH可作用于血管平滑肌的相应受体，使血管收缩，但由于降压反射的作用血压最终仍表现为下降。ADH可与远曲小管和集合管上皮细胞管周膜上的V2受体结合，通过兴奋性G蛋白激活腺苷酸环化酶，使胞内cAMP生成增多最终增加管腔膜上的水通道，从而提高远曲小管和集合管上皮对水的通透性，增加水的重吸收而使尿量减少。

七、结论

   注射生理盐水、葡萄糖、呋塞米使家兔尿量增多；注射去甲肾上腺素、垂体后叶素，使家兔尿量减少。