【实验目的】
1、 了解家兔泌尿实验方法，掌握动物麻醉、膀胱插管实验技术。
2、 观察静脉注射生理盐水、静脉注射高渗葡萄糖和速尿对尿量的影响，并探讨利尿机制。
3、 观察静脉注射去甲肾上腺素、垂体后叶素对尿生成的影响，并探讨抗利尿机制。
【实验原理】
尿生成的过程包括肾小球的滤过及肾小管的转运，凡影响上述过程的因素，均可影响尿的生成并引起尿量的改变。本实验通过以家兔为对象的急性实验、采用膀胱插管术收集并记录尿流量，从而观察在不同因素或药物的作用下尿量的变化。
【实验材料】
１．动物 家兔
２．试剂和药品 生理盐水、２０％氨基甲酸乙酯溶液、２０％葡萄糖注射液、１００单位／毫升肝素生理盐水（或５％枸橼酸钠）、１／１０，０００去甲肾上腺素、垂体后叶素、速尿、２０％甘露醇、班氏（Benedict）尿糖定性试剂。
3．器材 兔手术台和手术器械、膀胱漏斗、注射器及针头、培养皿。
【实验方法】
１. 称重
２. 麻醉：２０％乌拉坦５ml／kg
３. 固定
４. 腹部手术：从耻骨联合向上沿中线作长约4cm 的切口，用圆头手术剪沿腹白线切开腹腔，将膀胱轻轻地拉到腹壁外，用止血钳提起膀胱前壁（靠近顶端部分），选择血管较少处，切一纵行小口，插入膀胱插管，用粗棉线将切口处的膀胱壁结扎固定于插管。插管前应先辨认清楚膀胱和输尿管的解剖部位，用线结扎膀胱颈部以阻断它同尿道的通路。
5、实验：待尿流量稳定后，即可进行下列操作并观察。
⑴自耳缘静脉快速注射38OC生理盐水１０ml／kg，观察尿量的变化。
⑵自耳缘静脉注射垂体后叶素2单位，观察尿量的变化。
⑶自耳缘静脉注射速尿0.５ml/kg，观察血压和尿量的变化。
⑷自耳缘静脉注射1/10，000去甲肾上素0.２ml／kg，观察血压和尿量的变化。
⑸先收集尿液2滴进行尿糖定性实验* 作为对照，然后自耳缘静脉注射20%
葡萄糖溶液２.5ml/kg，观察尿量的变化，再收集尿液2滴作尿糖定性实验。
【注意事项】
1．实验中需多次静脉注射，应注意保护兔的耳缘静脉。注射时，先从耳梢端开始，逐渐向耳根端移近；或选用小儿头皮针刺入耳缘静脉，用胶布固定，以便于多次注射使用。
2．各项实验顺序的安排是：在尿量增多的基础上进行减少尿生成的实验，在尿量少的基础上进行促进尿生成的实验。
３. 实验中不能结扎输尿管。
【讨论思考】
分析尿生成调节实验中，分别静脉注射生理盐水、抗利尿激素、速尿、去甲肾上腺素和葡萄糖后尿量变化的作用机制。
【讨论思考题答案】
① 静脉快速注射生理盐水后，尿量增加。
机制：静脉快速注入大量生理盐水，血浆蛋白被稀释，血浆胶体渗透压下降，肾小球有效滤过压增加，加之肾小球血浆流量也增加，滤过率增加，尿液生成增加。
② 静脉注射抗利尿激素，尿量减少。
机制：抗利尿激素的主要作用是提高远曲小管和集合管上皮细胞对水的通透性，从而增加对水的重吸收，使尿液浓缩，尿量减少。此外，抗利尿激素也能增加髓袢升支粗段对氯化钠的主动重吸收和内髓部集合管对尿素的通透性，从而增加髓质组织间液的溶质浓度，提高髓质组织间液的渗透浓度，有利于尿液浓缩。
③ 静脉注射速尿，尿量增加。
机制：速尿可与髓袢升支粗段的Na+-2CL—K+同向转运体结合，；由于氯化钠的重吸收被抑制，降低了肾髓质的高渗梯度，从而使肾脏浓缩尿液的能力下降，导致水重吸收减少，尿量增加，产生利尿效果。
④ 静脉注射去甲肾上腺素，尿量减少。
机制：去甲肾上腺素能使肾血管收缩，肾血流量减少，从而使肾小球毛细血管血压降低，有效滤过压降低，肾小球滤过率减小，尿的生成减少，尿量减少。
⑤ 静脉注射葡萄糖，尿量增加。
机制：近球小管对葡萄糖的重吸收有一定限度，称为肾糖阈（１６０～１８０mg／ml）。实验中葡萄糖的注射量已经超过肾小管的吸收极限，小管液中就会有葡萄糖，进而小管液的溶质浓度增加，渗透压增加，妨碍了肾小管特别是近球小管对水的重吸收，小管液中的Na+浓度被稀释而降低，故Na+的重吸收也减少，氯化钠及水的排出均增加，尿量增加。
⑥ 静脉注射乙酰胆碱，尿量减少。
机制：乙酰胆碱能使动脉血压降低，从而使肾小球毛细血管血压降低，有效滤过压降低，肾小球滤过率减小，尿的生成减少，尿量减少。
第二篇：尿生成_机能学实验报告
某些因素对家兔尿液生成的影响
一、实验目的
1. 掌握膀胱插管技术，神经分离技术，学习尿量的记录和测量方法。
2. 观察神经体液因素（生理盐水、葡萄糖、去甲肾上腺素、呋塞米、垂体后叶素）
和电刺激对尿生成的影响，并分析其作用机制。
四、实验结果：
【实验讨论】：尿生成过程包括肾小球的滤过作用及肾小管与集合管的重吸收和分泌作用。肾小球滤过作用的动力是有效滤过压，而有效滤过压的高低主要取决于以下三个因素：肾小球毛细血管血压、血浆胶体渗透压和囊内压。
1、注射生理盐水后，血液被稀释，血浆胶体渗透压下降，肾小球有效滤过压增加，有效滤过率增加，所以尿量增加。
1.生理盐水中的Na、Cl离子被肾小管和集合管完全重吸收了，同时有一些水分也被重吸收，所以尿液生成量增大，但增大幅度不是太大。① 静脉快速注射生理盐水后，尿量增加。
机制：静脉快速注入大量生理盐水，血浆蛋白被稀释，血浆胶体渗透压下降，肾小球有效滤过压增加，加之肾小球血浆流量也增加，滤过率增加，尿液生成增加。
2.注射的葡萄糖溶液直接进入血液循环，增大了肾血管的血流量，而肾小管和集合管在机体不缺水时又只重吸收葡萄糖，所以葡萄糖溶液的水分全部渗过肾小管，形成尿液。⑤ 静脉注射葡萄糖，尿量增加。
机制：近球小管对葡萄糖的重吸收有一定限度，称为肾糖阈（１６０～１８０mg／ml）。实验中葡萄糖的注射量已经超过肾小管的吸收极限，小管液中就会有葡萄糖，进而小管液的溶质浓度增加，渗透压增加，妨碍了肾小管特别是近球小管对水的重吸收，小管液中的Na+浓度被稀释而降低，故Na+的重吸收也减少，氯化钠及水的排出均增加，尿量增加。
2、静脉注射葡萄糖，使血浆中葡萄糖浓度升高，超过了肾糖阈，以致肾小管液中葡萄糖浓度升高，渗透压升高，对抗肾小管对水的重吸收，从而使尿量增加。
④ 静脉注射去甲肾上腺素，尿量减少。
机制：去甲肾上腺素能使肾血管收缩，肾血流量减少，从而使肾小球毛细血管血压降低，有效滤过压降低，肾小球滤过率减小，尿的生成减少，尿量减少。
3、去甲肾上腺素对α受体具有强大激动作用，使肾小球入球动脉收缩，是肾小球毛细血管中血流量降低，滤过率减少，尿量减少，尿速变慢。但实验结果与理论不符，可能是操作失误或存在误差，没有统计学意义。
3.去甲肾上腺素可使入球小动脉和出球小动脉收缩，但前者收缩比后者更明显，使肾小球毛细血管血浆流量减少，肾小球毛细血管血压下降，肾小球的有效滤过压下降，尿生成减少。
③ 静脉注射速尿，尿量增加。
机制：速尿可与髓袢升支粗段的Na+-2CL—K+同向转运体结合，；由于氯化钠的重吸收被抑制，降低了肾髓质的高渗梯度，从而使肾脏浓缩尿液的能力下降，导致水重吸收减少，尿量增加，产生利尿效果。
3、。注射呋塞米，一方面使肾血流量增加，肾小球滤过作用增强从而使尿量增加。另一方面通过调节载体转运功能，抑制髓袢升支粗段Na+-K+-2Cl-同向转运，使NaCl重吸收量减少，肾小管渗透压下降，尿液浓缩功能减弱，导致肾小管对水的重吸收功能下降，尿量增加。
5.速尿可与髓袢升支粗段的Na+-K+-2Cl-共同转运系统可逆性结合，抑制其转运能力，使NaCl 重吸收减少，降低了肾脏的稀释功能，同时使髓质间隙渗透压降低，也降低了肾脏的浓缩功能，从而产生迅速而强大的利尿作用，排出大量等渗尿。
4、 注射垂体后叶素，增加了远曲小管和集合管上皮细胞对水的通透性，促进了肾小管和集合管对水的重吸收，使尿量减少。
6.垂体后叶素包括催产素和ADH，ADH 可与远曲小管和集合管上皮细胞管周膜上的V2 受体结合，通过兴奋性G 蛋白激活腺苷酸环化酶，使胞内cAMP 生成增多，最终增加管腔膜上的水通道，从而提高远曲小管和集合管上皮对水的通透性，增加水的重吸收而使尿量减少。
【讨论思考题答案】
② 静脉注射抗利尿激素，尿量减少。
机制：抗利尿激素的主要作用是提高远曲小管和集合管上皮细胞对水的通透性，从而增加对水的重吸收，使尿液浓缩，尿量减少。此外，抗利尿激素也能增加髓袢升支粗段对氯化钠的主动重吸收和内髓部集合管对尿素的通透性，从而增加髓质组织间液的溶质浓度，提高髓质组织间液的渗透浓度，有利于尿液浓缩。
⑥ 静脉注射乙酰胆碱，尿量减少。
机制：乙酰胆碱能使动脉血压降低，从而使肾小球毛细血管血压降低，有效滤过压降低，肾小球滤过率减小，尿的生成减少，尿量减少。
5、
【结论】注射生理盐水后尿滴数增多；注射葡萄糖使尿量增加。去甲肾上腺素是抗利尿激素，使尿量减少，但实验结果与理论不符，可能实验误差引起。刺激迷走神经理论上使尿量减少，但实验结果无统计学意义。呋塞米抑制了髓襻升支粗段对钠离子、氯离子个重吸收而产生强大的利尿效应。垂体后叶素含抗利尿激素，使尿量减少。
1、本组实验结果：
2、班级实验结果:
组别 对照（给药前） 第一分钟 第二分钟 第三分钟 第四分钟 第五分钟
生理盐水20ml 0.67
0.41 32.76 2.331.03 2.171.17 2.171.94 21.26
P值 0.09 0.009** 0.024* 0.12 0.05*
20%葡萄糖5ml 0.90.49 5.80.37 8.26.19 7.23.20 5.63.27 5.82.25
P值 0.02* 0.005** 0.02* 0.004**
去甲肾上腺素0.3ml 2.51.05 20.89 21.41 2.51.39 3.332.16 2.832.48
P值 0.04* 0.02* 0.005** 0.02* 0.004**
刺激迷走神经 1.750.84 2.250.75 21.10 43.83 9.513.32 10.2513.97
P值 0.18 0.40 0.30 0.37 0.34
呋塞米5mg/kg 6.8314.29 22.6724.47 22.6714.33 23.510.42 24.839.58 23.337.15
P值 0.21 0.08 0.05* 0.03** 0.04*
垂体后叶素 18.758.48 8.0411.45 3.027.69 1.219.27 0.016.96 0.217.42
P值 0.22 0.02* 0.02* 0.006** 0.009**
备注：P**<0.01，有明显差异；P*<0.05，有差异；P>0.05，无统计学意义。
五、小组讨论
六、实验结论
由我组实验数据看出，静脉注射生理盐水可使尿量增多。静脉注射葡萄糖、去甲肾上腺素和间断电刺激右迷走神经后，尿量无明显变化。静脉注射呋塞米可使尿量逐渐增加。静脉注射垂体后叶素可使尿量显著减少。
由班级实验数据可以看出，静脉注射生理盐水、葡萄糖可使尿量增多。间断电刺激右迷走神经可使尿量显著增加。静脉注射呋塞米可使尿量显著减少。静脉注射去甲肾上腺素和垂体后叶素的数据无统计学意义。
【讨论思考】
分析尿生成调节实验中，分别静脉注射生理盐水、抗利尿激素、速尿、去甲肾上腺素和葡萄糖后尿量变化的作用机制。