第九章 酶促反应动力学

一、是非判断题

1．酶促反应的初速度与底物浓度无关。（ ）    

2．当底物处于饱和水平时，酶促反应的速度与酶浓度成正比。（ ）      

3．某些酶的Km由于代谢产物存在而发生改变，而这些代谢产物在结构上与底物无关。（ ）

4．在非竞争性抑制剂存在下，加入足量的底物，酶促的反应能够达到正常Vmax。（ ）

5．碘乙酸因可与活性中心-SH以共价键结合而抑制巯基酶，而使糖酵解途径受阻。（ ）

6．从鼠脑分离的己糖激酶可以作用于葡萄糖（K_m=6×10^-6mol/L）或果糖（K_m=2×10^-3mol/L），则己糖激酶对果糖的亲和力更高。（ ）

7．K_m是酶的特征常数，只与酶的性质有关，与酶浓度无关。（ ）

8．K_m是酶的特征常数，在任何条件下，K_m是常数。（ ）

9．K_m是酶的特征常数，只与酶的性质有关，与酶的底物无关。（ ）

10．一种酶有几种底物就有几种K_m值。（ ）

11．当[S]>>K_m时， V趋向于V_max，此时只有通过增加[E]来增加V。（ ）

12．酶的最适pH值是一个常数，每一种酶只有一个确定的最适pH值。（ ）

13．酶的最适温度与酶的作用时间有关，作用时间长，则最适温度高，作用时间短，则最适温度低。（ ）

14．金属离子作为酶的激活剂，有的可以相互取代，有的可以相互拮抗。（ ）

15．增加不可逆抑制剂的浓度，可以实现酶活性的完全抑制。（ ）

16．竞争性可逆抑制剂一定与酶的底物结合在酶的同一部位。（ ）

答案

1．错。   2．对。  3．对。   4．错。   5．对。  6．错。   7．对。    8．错。

9．错。  10．对。 11．对。  12．错。  13．错。 14．对。  15．对。  16．错。

二、填空题

1．影响酶促反应速度的因素有       、        、        、       、       和           。

2．丙二酸和戊二酸都是琥珀酸脱氢酶的                    抑制剂。

3．通常讨论酶促反应的反应速度时，指的是反应的        速度，即         时测得的反应速度。

4．pH值影响酶活力的原因可能有以下几方面：影响                            ，影响                            ，影响                                  。

5．温度对酶活力影响有以下两方面：一方面                     ，另一方面                 。

6．酶促动力学的双倒数作图（Lineweaver-Burk作图法），得到的直线在横轴的截距为          ，纵轴上的截距为                       。

7．磺胺类药物可以抑制                        酶，从而抑制细菌生长繁殖。

答案

1．[E]；[S]；pH；T（温度）；I（抑制剂）；A（激活剂）

2．竞争性

3．初；底物消耗量<5%

4．底物分子的解离状态；酶分子的解离状态；中间复合物的解离状态

5．温度升高，可使反应速度加快；温度太高，会使酶蛋白变性而失活

6．-1/K_m；1/V_max

7．二氢叶酸合成酶

三、选择题

1．竞争性抑制剂作用特点是：

A．与酶的底物竞争激活剂        B．与酶的底物竞争酶的活性中心

   C．与酶的底物竞争酶的辅基      D．与酶的底物竞争酶的必需基团；

E．与酶的底物竞争酶的变构剂

2．竞争性可逆抑制剂抑制程度与下列那种因素无关：

A．作用时间            B．抑制剂浓度           C．底物浓度

D．酶与抑制剂的亲和力的大小       E．酶与底物的亲和力的大小

3．哪一种情况可用增加[S]的方法减轻抑制程度：

A．不可逆抑制作用     B．竞争性可逆抑制作用     C．非竞争性可逆抑制作用

D．反竞争性可逆抑制作用     E．无法确定

4．酶的竞争性可逆抑制剂可以使：

A．V_max减小，K_m减小       B．V_max增加，K_m增加  

C．V_max不变，K_m增加       D．V_max不变，K_m减小  

E．V_max减小，K_m增加

5．下列常见抑制剂中，除哪个外都是不可逆抑制剂：

A  有机磷化合物            B  有机汞化合物            C  有机砷化合物

D  氰化物                  E  磺胺类药物

6．对于下列哪种抑制作用，抑制程度为50%时，[I]=Ki ：

A．不可逆抑制作用           B．竞争性可逆抑制作用

C．非竞争性可逆抑制作用     D．反竞争性可逆抑制作用     E．无法确定

7. 利用恒态法推导米氏方程时，引入了除哪个外的三个假设？

         A.在反应的初速度阶段，E+P→ES可以忽略

         B.假设［S］>>［E］，则［S］-［ES］≈［S］

         C.假设E+S→ES反应处于平衡状态

         D.反应处于动态平衡时，即ES的生成速度与分解速度相等

8. 用动力学的方法可以区分可逆、不可逆抑制作用，在一反应系统中，加入过量S和一定量的I，然后改变［E］，测v，得v～［E］曲线，则哪一条曲线代表加入了一定量的可逆抑制剂？

         A.1

         B.2

         C.3

         D.不可确定

9. 在一反应体系中，［S］过量，加入一定量的I，测v～［E］曲线，改变［I］，得一系列平行曲线，则加入的I是：

         A.竞争性可逆抑制剂

         B.非竞争性可逆抑制剂

         C.反竞争性可逆抑制剂

         D.不可逆抑制剂

10. 竞争性可逆抑制剂抑制程度与下列哪种因素无关？

         A.作用时间

         B.抑制剂浓度

         C.底物浓度

         D.酶与抑制剂的亲和力的大小

         E.酶与底物的亲和力的大小

11. 酶的竞争性可逆抑制剂可以使：

         A.Vmax减小，Km减小

         B.Vmax增加，Km增加

         C.Vmax不变，Km增加

         D.Vmax不变，Km减小

         E.Vmax减小，Km增加

12. 丙二酸对琥珀酸脱氢酶的影响属于：

         A.反馈抑制

         B.底物抑制

         C.竞争性可逆抑制

         D.非竞争性可逆抑制

         E.反竞争性可逆抑制

13. 测定酶活性时，通常以底物浓度变化小于多少时测得的速度为反应的初速度？

         A.0.1%

         B.0.5%

         C.1%

         D.2%

         E.5%

答案

1.B。 2.A。  3.B。  4.C。 5.E。  6.C。7.C。 8.C。 9.D。 10.A。 11.C。 12.C。 13.A。

第二篇：酪氨酸的提取及其酶促反应动力学研究

5.4 Km和Vmax的测定 分析讨论

Km和Vmax成线形关系, Km增大,Vmax也随之增大

结果分析与讨论:

由上述三组图表可知，Km值是一个特征值，

它与酶的浓度无关，在一定的温度和酸度条件下

为常数。

由图二、三可知，铜试剂和KCl溶液都是多

巴的竞争性抑制剂，两者竞争酶的同一个活性中

心。

提高底物浓度可以克服这种竞争性抑制，使

得抑制剂的作用减弱。

在实验中要注意的是, 多巴需要冷藏保存；酶催化作用的环境一般是在体温下，接近中性的介质中进行；实验所用的土豆和研钵等提取酶的用具，以及磷酸缓冲溶液都必须事先充分冷却，同时提取酶的操作时间亦应尽可能地短。否则会使酶失活，从而影响后面实验测定的经过酶促反应后的溶液吸光度。最后，测量吸光度的时候, 反应的时间要一致,减少系统误差。

最佳温度的测定

分别在不同温度测定酶的活性,结果上图所示:以酶的活性为纵坐标,温度为横坐标作图,如上图所示,可看出不同温度对酶活性的影响情况。

由图可看出,酪氨酸酶的最适温度为 ℃。随着温度的升高,酪氨酸酶的活

性不断提高,达到最大值后,酶的活性又逐渐降低。当温度达到 ℃,酶的活性直线下降。因此,调节温度特别是低温条件能有效地抑制酶的活性。

由图可知，当溶液中酶的含量增加时，曲线斜率也增加，这表明酶浓度高，其反应活性也高。