引进全自动免疫组化染色机可行性报告
全自动免疫组化染色机可代替手工操作,使染色结果更稳定,更标准,消除了多步骤人为因素的影响,可显著缩短出结果时间,可使我院的病理诊断真正做到规范化、标准化、精准化。可以对患者的早诊断、早治疗。使用免疫组化染色机可以开展更多的病理实验项目。病理科在使用全自动免疫组化染色机可在协助诊断、鉴别诊断、指导放化疗尤其在恶性肿瘤的个体化治疗——选择放化疗方案和选择靶向药物方面意义重大。根据卫生部三级综合医院评审指南,三级甲等医院必须装备全自动免疫组化染色机,如具有该设备,设备要求项可达到“A”。如我院装备全自动免疫组化染色机,将大大提升我院的免疫组化实验水平和病理诊断水平。
全自动免疫组化染色机的基本要求:
易于掌握及操作的英文或中文实验程序界面,为免疫组化标准提供了科学,可靠的平台。
主要性能
● 开放式系统,适合不同厂家抗体。从烤片、脱蜡、抗原修复、封闭、标记一抗、标记二抗、显色直到苏木素复染全程自动化。
● 适合多种标本:石蜡、冰冻、穿刺、细胞涂片、骨髓片。玻片盘对于上载的玻片无特殊的选择要求。
● 精密微量加样,滴液量可调,最少可达100ul,节约昂贵的试剂。 ● 不同切片可设定不同的抗体滴液量。
●大瓶溶液包括脱蜡液、修复液1(pH6.0)、修复液2(pH9.0)、酒精及清洗缓冲液。当大瓶试剂报警存量不足时,主动提示需给大瓶容器添加新试剂。每次添加新试剂前剩余的部分旧试剂也一并投入新的运行中,为了避免检测过程中出现因大瓶溶液存量不足而影响染色运行的状况,每日运行仪器前设备自动检查各溶液的仓位,确认液量足够本批次染色运行。
● 专业切片分区定位,保证最小的试剂用量发挥最大的效果,一次同时染色三十张切片。
●用户可根据实际工作流程选择整批上载或小批次连续上载,最大限度减少等待时间,提高实验室效率。
● 整机密封性好,保持内环境湿润。
● 密码保护,不同权限的人掌握不同内容。
● 滴头表面特氟隆处理,清洗彻底,避免交叉污染。
● 柔和吹除切片上的残液,保证切片染色均匀。
● 程序可根据要求随时更改、定制特性。
● 可预编百余种标准化免疫组化和原位杂交程序,可保证最优化的染色流程和染色结果。
● 一台电脑可同时操控多台染色机主机。
● 可配置外置电源,保证一次实验完整运行。
● 全中文操作界面,随时监控运行情况,运行时间、运行步骤、运行进程等一目了然。
●机器具有上网功能,可轻松整合入医院信息系统,实现病例和患者之间信息的双向传输和索引追踪。
技术参数:
● 切片容量:30张切片
● 试剂容量:40种以上试剂
● 加样量: 100ul,150ul,200ul,250ul
第二篇:免疫组化报告1
免疫组化报告
1:实验目的
检测食管鳞状细胞癌的组织情况。
2:实验方法
用免疫组化Envision法
3:使用的实验设备和药品
(1) 孵育箱,冰箱,微波炉,切片机,染缸,载玻片,盖玻片,显
微镜
(2) 过氧化物酶,固定液(10%中性缓冲福尔马林),4%的多聚
甲醛磷酸缓冲液,双氧水,75%,85%,95%,100%的乙醇,重铬酸钾浓硫酸,蒸馏水,多聚左旋赖氨酸,PBS,中性树胶,DAB色液,苏木素,0.1%HCL,二甲苯,石蜡 4:实验步骤
(1) 取材:在病变区,交接区,远离病变区取材
(2) 固定:在固定之前用PBS轻洗所取组织样品,然后将组织样
品至于小烧杯中用4%多聚甲醛磷酸缓冲液(用量应是样品的5倍)浸润,固定10—20分钟后取出,自然干燥
(3)脱水: 用梯度乙醇溶液(75%,85%,95%,100%的乙醇)作为脱水剂 ,此步骤应在4摄氏度下进行。将梯度乙醇至于小烧杯中,然后放入组织样本放于冰箱内,时间依据组织样本大小而定,时间应充分。
(4)透明,此过程需在4摄氏度下进行。时间依据组织样本大小而定。
(5)浸蜡,温度不能高于60摄氏度,将组织样本取出后,放入低熔点软蜡中,时间依据组织样本大小而定。
(6)包埋,放入前确定组织各个面,所需的断面朝下。
(7)修块,不能把蜡边与组织边缘靠的太近或太远。
(8)切片, 把修好的蜡块装在旋转切片机上,即可进行切片。厚度通常为5—7μm。切好的蜡带放入40℃左右的温水中将蜡片展平。
(9)捞片,烤片
将载玻片浸泡在重铬酸钾浓硫酸清洁液中24小时,然后流水充分冲洗,再用蒸馏水冲洗3遍以上,而后置95%乙醇中12小时。取出擦干或烤干,贮放于玻片盒内备用。盖玻片很薄,以上处理程序必须缩短时间,清洁液浸泡只需2小时,流水冲洗注意勿损伤玻片。取出擦干或烤干,贮放于玻片盒内备用。 防脱片处理
将多聚左旋赖氨酸涂在载玻片上,厚薄依据组织大小而定。
(10)脱蜡
(11)水化,用梯度乙醇(依次为100%,95%,85%,75%的乙醇)水化
(12)染色,
a石蜡切片脱蜡和水化后,用PBS(PH=7.4)
冲洗三次,每次三分钟(3X3 ')。
b根据每一种抗体的要求,对组织进行相应 的修复。
c每张切片滴加一滴或50?l 3%H2O2 室温下孵育10分钟,以阻断内源性过氧化物酶。
d PBS冲洗(3X3 ' )
e甩取PBS液,每张切片滴加一滴或50?l第一抗体即鼠抗人的单克隆抗体CKAE1/AE3,室温下孵育60分钟或4?C过夜。 F PBS冲洗(3X5 ' )
g甩取PBS液,每张切片滴加一滴或50?l聚合物增强剂(试剂
A) ,室温下孵育20分钟。
h PBS冲洗(3X3 ' )
i甩取PBS液,每张切片滴加一滴或50?l酶标抗鼠聚合物, (过氧化物酶)室温下孵育30分钟。
j PBS冲洗(3X3 ' )
k甩取PBS液,每张切片滴加2滴100?l的DAB色液,显微镜下观察3-10分钟阳性显色为棕色。
l 自来水冲洗,苏木素复染,0.1%HCL分化PBS冲洗返蓝。 mDAB显色,则切片通过梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固;
(13)显微镜下观察
5,实验结果