华 南 师 范 大 学 实 验 报 告
学生姓名 何茂辉 学号 20062501302 专 业 生物科学 年级、班级 06科三 课程名称 细胞生物学实验 实验项目 实验类型 □验证 □设计 □综合 实验时间 09 年 5 月 19 日 实验指导老师实验评分
细胞膜的渗透性及巨噬细胞的吞噬作用
实验目的：
1. 通过红细胞的溶血过程的观察,了解细胞膜的渗透性及各种物质进入细胞膜的速度。
2. 通过小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程，了解巨噬细胞对大分子或颗粒物质的内吞作用。
实验原理：
1.红细胞在低渗液中，细胞很快吸水而胀裂，称为溶血。在等渗液中，由于 有些溶质会进入红细胞内、引起细胞渗透压升高，细胞也会吸水胀裂，由于 高等动物具有大小两类吞噬细胞(即巨噬细胞和嗜中性粒细胞)，专司吞噬作用，为非持异免疫功能的重要组成部分。
3. 小鼠腹腔注射淀粉肉汤液，可诱导巨噬细胞大量产生,增强巨噬细胞吞噬活2.性。
实验步骤：
细胞膜的渗透性(兔红细胞)
1. 取1mL兔的抗凝全血于50mL小烧杯中，再加入10mL0.17 mol/L氯化钠，稀释兔血制成兔的红细胞悬液，观察它的特点为一种不透明的红色浑浊液体。
2. 取1支试管加入10ml蒸馏水，再加入1ml红细胞悬液，摇动2次混匀，可见溶液由不透明的红色迅速变成红色澄清液
3. 取6支试管贴上标签，依次加入下列等渗溶液10ml：①0.32M 甲醇、②0.32M 乙醇、③0.32M 丙醇、④0.32M 乙二醇、⑤0.32M 甘油、⑥0.32M 葡萄糖
4. 向每支试管加入1ml红细胞悬液，摇动2次混匀，观察是否有溶血现象发生，记下溶血时间并给予分析 各种物质透入细胞的速度不同，溶血的时间不同。
小鼠巨噬细胞的吞噬作用观察
1. 实验前一天向小白鼠腹腔注射6％淀粉肉汤液(含台盼蓝)1ml
2. 鸡红细胞悬液制备：取抗凝全血1mL，移入10mL离心管,加入4mL生理盐水
混匀, 1500rpm离心5 min。洗涤2次,最后按压积红细胞体积加生理盐水配成1%鸡红细胞悬液
3. 小鼠腹腔注射1％的鸡红细胞悬液1ml，轻揉腹部使鸡红细胞分散 4. 20～30min后,颈椎脱臼法处死小鼠
5. 将小鼠置于解剖盘中，剪开腹腔，把内脏推向一侧，加适量生理盐水与腹
腔液混匀,用吸管吸取腹腔液于试管或小烧杯中备用 6. 吸取腹腔液1～2滴，制作临时装片 7. 镜检
结果与分析： 1、
2、
思考题
1、溶液的渗透压主要与哪些因素有关?对简单盐溶液如何粗略计算出其渗透压? 溶液的渗透压主要与溶液中溶质颗粒总数有关。
渗透压=ciRT或n/VRT(ci是解离常数、R是气体常数、T是绝对温度)，可以通过这两个公式粗略计算出简单盐溶液的渗透压。
2、实验前一天向小白鼠腹腔注射含台盼蓝淀粉肉汤液的目的是什么?
注射含台盼蓝淀粉肉汤液的目的是诱导巨噬细胞大量产生,增强巨噬细胞吞噬活性
第二篇：细胞膜的渗透性实验
实验三 细胞膜的渗透性实验
一、实验目的
1. 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。
2. 掌握估测、比较各类物质进入细胞速度的方法。
二、实验原理
将红细胞放入数种等渗溶液中，由于红细胞对各种溶质的透性不同，有的溶质可以渗入，有的溶质不能渗入，渗入的溶质能够提高红细胞的渗透压，所以促使水分进入细胞，引起溶血。由于溶质渗入速度不相同，因此溶血时间也不相同。因此，溶血现象可以可用于粗略判定物质穿膜的速度快慢和时间。
影响物质穿膜能力大小的因素主要有三个：一是物质脂溶性的大小，因为膜骨架是有脂双层分子构成的，所以脂溶性物质易于穿过细胞膜；二是分子体积大小，较小的分子易穿过细胞膜；三是物质带电状况，因为细胞表面一般带电，不带电的物质易进入细胞。
判定细胞溶血不溶血的方法：溶血的溶液红的程度更高，且溶液发亮，透明度也更高。二是可以在显微镜下观察细胞的形态。细胞破裂后细胞形态并没有发生很大的变化，而是膜结构上有一个小口，膜还是有结构的，只不过体积变小了。
需要说明的等渗溶液中细胞也会是破裂的，因为生活状态下膜两侧不断交换物质，代谢产物的积累使细胞渗透压的平衡破坏，同时有些代谢物质对细胞是有毒性的，所以长时间放置会使细胞破裂，所以做等渗实验时间不宜超过1h。
三、实验材料
试剂：鸡血，0.85%氯化钠溶液，0.0085%氯化钠溶液，0.8mol/L甲醇，0.8mol/L丙三醇，6%葡萄糖溶液，2%Triton X-100
用具：显微镜、粗天平、载破片、盖玻片、滴管2支、离心管2支、离心机、9试管、磁力搅拌器。
四、实验步骤
1、 取鸡血2-3ml，加0.85%氯化钠溶液4ml，在1000r/min条件下离心5min（RBC压积量应不少于0.3ml，否则应补加鸡血）
2、 将上述离心的红细胞按沉淀量配成50%浓度，总体积量应不少于0.6ml
3、 每组取6支试管分别加入如下溶液各3ml
（1）0.85%氯化钠溶液
（2）0.0085%氯化钠溶液
（3）0.8mol/L甲醇
（4）0.8mol/L丙三醇
（5）6%葡萄糖溶液
（6）2%Triton X-100
4、向上述6试管中分别加入50%红细胞悬液1滴，用吸管吸打均匀。观察各管是否有溶血现象发生（观察时间一小时）。记录溶血时间并于显微镜下观察各溶液中细胞。
五、实验结果
1.实验结果记录表
表一 不同低渗溶液下的溶血现象
2．实验结果图
图一 肉眼观察六种溶液中鸡红细胞溶血状况
结论：①—⑥为试管编号，从左至右为溶血程度由小至大。
1 号试管为：3ml0.85%氯化钠溶液+1滴稀释鸡血 不溶血
2 号试管为：3ml0.0085%氯化钠溶液+1滴稀释鸡血 溶血
3 号试管为：3ml0.8mol/L甲醇+1滴稀释鸡血 溶血
4 号试管为：3ml0.8mol/L丙三醇+1滴稀释鸡血 半溶
5 号试管为：3ml6%葡萄糖溶液+1滴稀释鸡血 半溶
6 号试管为：3ml2%Triton X-100+1滴稀释鸡血 溶血
六、实验分析及结论
1. 离心机使用时,要将配平后的离心管对称放置在离心机内,禁止未配平就放入离心机和非对称放置离心管。
2. 试管中有红细胞和测试溶液时,不应强力摇晃,以免造成人为的红细胞破裂。
3.对于溶血较快的试管，用显微镜观察时要注意滴加血液后立即镜检，否则将会因为细胞溶血太快而看不到细胞。
4.即使细胞在等渗溶液中短时间内未发生溶血现象，但是细胞长时间处于等渗溶液中也会发生溶血现象。
5.发生溶血的细胞从形态上看，膜结构上有一个个口，膜还是有结构的，但是细胞比正常细胞小。
6.由于甲醇等溶液中细胞溶血发生过快，未能在显微镜下观察到。