姓名： 吴海林（0106）     杨秀芳(0107)    小组号：第一大组第二小组

小组人员：吴海林、杨秀芳、陈坤、陈炳光、龚意珍      日期：20##年9月20日

室内温度：25℃          湿度：58         大气压强：标准大气压

一、实验名称：血液凝固

二、实验目的：了解血液凝固的基本过程及其影响因素

三、实验对象：家兔

四、实验步骤和方法(略)

五、实验结果：

1、[HESL1] 观察纤维蛋白在凝血过程中的作用：

实验结果发现静置杯内的血液发生凝固，；搅拌杯内血液经搅拌过后，而毛刷上见到凝固的血块，用水冲洗后发现毛刷上有白色的丝状物。

2、观察影响血液凝固的因素：

表（1）1        影响血液凝固的因素

从表（1）1可以看出：在粗糙面对比实验中，加有棉花的试管血液在较短的时间内就已凝固，而用石蜡油润滑过的试管中的血液在实验时间到20分钟时还未凝固；在温度对比的实验中，水浴37℃试管中的血液凝固较快，而在0℃中水浴的血液在实验时间到20分钟时还未凝固；血液中加入肝素和草酸钾的实验均是实验时间到了20分钟了还未见凝固。

3、观察内源性和外源性凝血的过程：

表（2）2        内源性和外源性凝血途径的观察

从表（2）2可以看出：三支试管中第三支凝固时间最短然后到第一支，最后才是第二支。

七、实验讨论：

血液凝固是指血液由流动状态变成不能流动的凝胶状态的过程。血浆与组织中有直接参与血液凝固的凝血因子，血液凝固是由凝血因子按一定顺序相继激活而生成的凝血酶，最终使纤维蛋白原变为纤维蛋白的过程。因此，凝血过程可分为三个过程。

首先，是凝血酶原酶复合物的形成。该复合物可通过内源性凝血途径和外源性凝血途径生成。内源性凝血途径是指参与凝血的因子全部来自血液，通常因血液与带负电荷的异物表面接触而启动；外源性凝血途径是指由来自血液之外的组织因子暴露于血液而启动的凝血过程。机体中由内源性和外源性凝血途径所生成的FXa，在钙离子存在的情况下可与FXa在磷脂膜表面形成FXa-FVa-Ca²⁺-磷脂复合物，进而激活凝血原酶；然后，凝血酶原被激活变成了凝血酶；最后纤维蛋白原在凝血酶的作用下转变成为了纤维蛋白单体。凝血酶也能激活FXⅢ，生成FXⅢa，FXⅢa在钙离子的作用下使纤维蛋白单体相互聚合，形成不溶于水的交联纤维蛋白多聚体凝块，使得血液凝固在一起。

在实验1中，毛刷不停搅拌，最后是毛刷上有血凝块而杯中没有，冲洗后发现是白色丝状物，推断是纤维蛋白。在搅拌时，血液中的纤维蛋白原被搅入毛刷内，使得杯中血液的纤维蛋白合成量少甚至没有，以致无法凝固，而被搅入毛刷的纤维蛋白原在毛刷处转为纤维蛋白，并在毛刷处交联成网形成血凝块。[HESL3] 静置的血液，由于血液中的物质未减少，最后凝固了。

在实验2观察影响血凝的因素中，发现接触面越粗糙血液就越容易凝固。粗糙面可使血小板易发生粘黏，血小板与血小板之间相互黏着使血小板聚集成团，加快血液的凝固；温度的影响中，温度可影响到各类酶的活性[HESL4] ，因此，在一定程度内，温度越高凝血酶的活性越强，使得血液凝固越快；而肝素是一种酸性粘多糖，具有强抗凝作用，但在缺乏抗凝酶的作用下，肝素的抗凝作用很弱。因此，肝素主要通过增强抗凝酶抗凝血蛋白酶如抗凝血酶Ⅲ的活性而发挥间接的抗凝作用。血液中加入了肝素则会使抗凝酶慢慢的增强，使血液难以凝固；。Ca²⁺参与血凝过程中许多步骤，血液中加入草酸钾则会使血浆中的钙离子减少，从而起抗凝作用。由此可以得出，血液的凝固与接面的粗糙程度、温度以及抗凝剂等有关。

在实验3中，第一、第二支试管加入的均是血液中的物质，属于内源性凝血途径。第三支试管加入的试剂既有血液中的物质又有组织液中的组织因子[HESL5] ，属于内源性和外源性共同作用的结果。实验中，第三支试管中的血液凝固较快，可见血凝由内外两种途径作用效果更快；第一和第二支试管在于血小板量的不同，血小板越多血小板聚集成团就越快，血液凝固就越快[HESL6] 。

在以上的三个实验观察中可以知道，血凝是血液内的凝血因子发生的一系列酶促反应的过程，最终以纤维蛋白而告终，影响其因素有抗凝因子、温度及异物的粗糙面等。

八、实验结论：

通过实验可知，血液凝固有三个过程，最终以纤维蛋白而告终；血小板在血液凝固过程中也发挥着促进作用；影响血液凝固的因素除凝血因子外还有温度、粗糙面等。[HESL7] 

ABO血型鉴定

（一）一般项目：

      姓名：吴海林（0106）、杨秀芳（0107）              组号：2  

      组员：吴海林、杨秀芳、陈坤、龚意珍、陈炳光          日期：20##年9月20日

      室内温度：25℃    湿度：58％   大气压：101.325kPa

（二）实验名称：ABO血型鉴定

（三）实验目的：学习ABO血型鉴定的原理

（四）实验对象：人体（健康大学生志愿者）

（五）实验步骤和方法（略）

（六）实验结果：

①血液与标准A型血清（含抗B抗体）混合，10min后，肉眼观察有凝集反应，说明红细胞膜上抗原为B凝集原。

      ②血液与标准B型血清（含抗A抗体）混合，10min后，肉眼观察有凝集反应，说明红细胞膜上抗原为A凝集原。

（七）讨论：

 血型通常是指红细胞膜上特异性抗原的类型。红细胞凝集是指将血型不相同的两个人的血液滴加在玻片上并使之混合，则红细胞可凝集成簇的现象。凝集原指红细胞膜上的抗原决定簇。凝集素指能与红细胞膜上的凝集原其反应的特异性抗原。

ABO血型系统是根据红细胞上是否存在A抗原和B抗原讲来划分的。血液ABO血型主要分为4种血型：A型（红细胞膜上只含A抗原者）；B型（红细胞膜上只含B抗原者）；AB型(含有A与B两种抗原者)；O型（A和B两种抗原均无者）。随着研究的深入，人们又发现了几种亚型:A型分出A₁和A₂两种亚型；AB分出A₁B和A₂B两种亚型。ABO血型系统各种抗原的特异性决定于红细胞膜上的糖蛋白活糖脂上所含的糖链。由人体的9号染色体上的A、B和O三个等位基因来控制。控制ABO血型的基因型与表现型的关系如表1-1

表1-1   ABO血型的基因型与表现型

[HESL8] ABO血型的鉴定是安全输血的保证。在临床工作中，特别是急救中，为大出血的病人输血是挽救其生命的只要方法，为了保证输血的安全，对不同血型的患者需要输对应的血浆。否则在患者的血管内会出现红细胞聚集和溶血反应甚至威胁生命。因此血型鉴定是安全输血的前提。输血前必须进行交叉配血试验，分别进行主侧（把供血者的红细胞与受血者的血清进行配合试验）和次侧（再将受血者的红细胞与供血者的）。

Rh血型系统是最复杂的一个系统，已发现的抗原就有40多种，与临床关系密切的是D、E、C、c、e五种。因为D抗原的抗原性最强，所以临床意义最为重要。医学上通常将红细胞上含有D抗原者称为Rh阳性；而红细胞上缺乏D抗原者称为Rh阴性。控制Rh血型抗原的等位基因位于1号染色体上。

Rh血型的临床意义：①人体的血清内不存在抗Rh的天然抗体，只有Rh阴性者在接受Rh阳性的血液后，才会产生抗体。这就造成Rh阴性受血者在第一次接受Rh阳性的血液后并没有造成明显的输血反应，但在以后的输血中则出现了溶血。②Rh系统的抗体是IgG，这种抗体的分子较小，能通过胎盘。当阴性Rh孕妇怀有Rh阳性胎儿时，胎儿的少量红细胞或者D抗原进入母体，使母体产生抗体IgG，而这种抗体会通过胎盘，导致胎儿发生溶血造成胎儿的溶血性贫血甚至死亡。在第二次妊娠时，母体的IgG抗体会通过胎盘，进入胎儿体内，导致溶血。所以在Rh阴性母亲生育第一胎后，及时输注特异性抗D免疫求蛋白，中和进入母体的D抗原，防止胎儿的溶血性贫血。

（八）[HESL9] 结论：

此次实验所用的血液为AB型血。

评语：

1. “血液凝固”实验讨论内容不完全。

2. “ABO血型鉴定”实验讨论偏离中心思想，没有针对实验结果展开讨论。

3. 最后评分：B-。

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 [HESL1]注意：数字后序号为“.”，如“1.”、“2.”等。

 [HESL2]这不算是表格。

 [HESL3]

1. 没有解释毛刷上血凝块如何产生的。

2. 搅拌后杯内血液不会发生血液凝固的主要原因是纤维蛋白原已经耗尽，不能再形成纤维蛋白。

 [HESL4]如何影响？

 [HESL5]需写出具体试剂，再分析试剂中所含的凝血因子。

第三支试管的凝血途径主要是外源性凝血途径。内、外源性凝血途径的区别的讨论呢？

 [HESL6]血小板如何促进血液凝固的？

 [HESL7]这结论不够完整。

 [HESL8]这段内容是ABO血型的遗传规律，与实验讨论关系不大，没有必要讨论；而ABO四种基本血型的所凝集素却讨论到。

 [HESL9]这部分知识与本实验讨论无关。

第二篇：实验7血液凝固和影响血液凝固的因素

血液凝固和影响血液凝固的因素

程慧慧

（浙江中医药大学2009临床医学滨江3班，20092170226）

摘要：目的  通过了解某些条件下的血液凝固时间，加深理解影响血液凝固的因素。方法     采用颈动脉放血取血，用不同因素处理各管血液，记录凝血时间。结果  各组凝血时间依次为：1号（NS）：600s，2号（冰块）：血液凝固时间超过3600s，3号（肺组织浸液）：60s，4号（少许棉花）：376s，5号（石蜡油）：2520s.6号（肝素）：血液凝固时间超过3600s，7号（草酸钾）：血液凝固时间超过3600s，8号（室温21℃）：1590s。结论  少量生理盐水、肺组织浸液、少量棉花能促进凝血过程，减短凝血时间，肝素、草酸钾、液体石蜡涂壁、冰水能够减弱凝血过程，延长凝血时间。

关键词： 凝血时间；影响因素；纤维蛋白原；家兔

Blood coagulation and influence factors of blood clots

Abstract: objective by understanding some conditions blood clotting, deepen our understanding of influence factors of blood clots. Methods using carotid artery bloodletting in different factors, take some blood, handle all the tube blood coagulation time record. Results each clotting time is as follows: 1 (NS) : 600s, no. 2 (ice) : blood coagulation time more than 3600s, 3 (lung tissue soaking liquid) : 60s, no. 4 (a little cotton) : 376s, 5 (paraffin oil) : 2520s. 6 (heparin) : blood coagulation time more than 3600s, 7 (oxalic acid potassium) : blood coagulation time more than 3600s, 8 ℃) : (room temperature 21 1590s. Conclusion a few physiological saline, lung tissue soaking liquid, small cotton can promote blood coagulation process, shorten clotting time, heparin, oxalic acid potassium, liquid paraffin tu, ice water weakened blood coagulation process, prolong the coagulation time.

Keywords: coagulation time; Influencing factors; Fibrinogen; rabbit

凝血试验结果的准确性是指导临床正确治疗的保障。由于凝血试验不同于一般酶类的检测，所以其影响因素也具有特殊性，当其起动因子被某种因素激活后，就会发生一系列的连锁反应，导致检测结果的极大误差。故此，对检验人员和临床医生来说掌握和了解影响凝血试验的相关因素显得尤为重要。影响凝血试验的因素主要有两个方面:1.非技术因素;2.技术因素。本实验主要研究7种非技术因素下的对凝血是时间的影响。

1材料

1.1对象：家兔，浙江中医药大学动物实验中学提供。

1.2仪器试剂：尖头手术剪，玻璃分针，镊子，张力换能器，微调固定器，RM6240生物信号处理系统，粗绳细线，手术台，止血钳，动脉夹，动脉插管，微调固定器 ，石蜡油，冰块，8u/ml肝素，肺组织浸液，台氏液，棉花，2%草酸钾，牙签，7支试管， 100ml烧杯。

2方法

2.1用200g/L的氨基乙酸甲酯按5ml/kg体重剂量给家兔耳缘静脉注射麻醉，将家兔仰卧位固定于固定架上。

2.2行家兔左颈总动脉插管术，准备放血。

2.3取7支试管，编号， 分别按下表1.中的要求准备试管、准备手表记血液凝固的时间。血液刚进入各试管时同时计时间，每管2ml，每隔15s，将试管倾斜30度，观察血液是否流动，血液突然不流动时，终止计时，从开始计时至终止计时的时间为血液凝固时间。3. 准备100ml的烧杯1个,  放血10ml , 同时计时, 并用竹签朝一方向搅动血液, 待竹签上出现凝血块时, 停止计时, 记录凝血时间, 并观察去纤维蛋白的血液是否凝固?

3结果

4.讨论

8号试管因为血液与带负电荷的异物表面（试管）壁接触启动内源性凝血过程[1]。（其他试管也一样）

1号试管血液凝固时间小于8号试管。因为血液稀释后凝血功能与血液稀释程度相关，生理盐水占5%加快了血液凝固进程，30%、40%稀释的凝血功能未受到影响，50%稀释的血液凝固能力开始减弱，60%稀释的血液凝固功能受到严重的影响。其原因可能是：（1）血液稀释破坏凝血酶与抗凝血酶的动态平衡。相较于凝血酶而言，抗凝血酶的活性更容易受到血液稀释的影响，因此产生了高凝状态。而30%、40%的稀释度组的各项指标与对照组没有显著差异，可以推测出凝血酶原、纤维蛋白以及血小板的浓度稀释与动能增强之间达到一种动态平衡。当稀释达到了50%时，由于某一种或是多种凝血有效成分的功能增强已不足以代偿其浓度稀释的影响，就会导致凝血功能的整体性下降，进而失去代偿。[2]

2号试管血液凝固时间大于8号试，由于关于凝血的生物酶的在低温下活性低，使凝血过程减慢。

3号试管血液凝固时间小于8号试，由于肺组织浸液含组织因子，组织因子F3启动外源性凝血过程，加速凝血。

4号试血液凝固时间大于8号试，由于血液接触粗糙表面促进因子激活，促进内源性凝血，凝血加速。血液和物体表面接触面越粗糙，凝血越快。

5号试血液凝固时间远大于8号试，由于血液接触到光滑面，阻碍因子激活，阻碍内源性凝血，凝血减慢。血液和物体表面接触面越光滑，凝血越慢

6号试血液凝固时间大于8号试，由于肝素是抗凝剂，增强抗凝血酶3与抗凝血酶的亲和力，加速凝血酶的失活，并有抑制血小板的粘附聚集作用[3]。

7号试管血液凝固时间远大于8号试管，因为草酸钾是抗凝剂，能与血液中Ca⁺的结合，抑制凝血。[4]

5结论

少量生理盐水、肺组织浸液、少量棉花能促进凝血过程，减短凝血时间，肝素、草酸钾、液体石蜡涂壁、冰水能够减弱凝血过程，延长凝血时间。

6参考文献

[1]朱大年.生理学.第七版.北京.人民卫生出版社2008.8.63

[2] 1]王卓强，徐震，刘秀珍，范里莉.体外不同程度的生理盐水稀释血液对凝血功能的影响.第一版.解放军医学杂志.2008.33（10）-1268-1271

[3]张志雄.生理学.上海.上海科学出版社。2006.43

[4]徐建平，崔迎春. Ca~(2+)对血液凝固的作用探究