《实验诊断学》实验报告

实验一 红细胞计数、白细胞计数 

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学  号：                        

姓  名：                     

实验日期：                    

                2015

一. 实验原理

1.红细胞计数

用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入计数池中，于显微镜下计数一定体积内的红细胞数，经过换算求得每升血液中的红细胞数量。

2.白细胞计数

血液经白细胞稀释液稀释，成熟红细胞全被溶解，在显微镜下计数一定体积内白细胞数，换算出每升血液中白细胞数量。

二. 实验内容与步骤

1.实验器材

改良Neubauer计数板、显微镜、盖玻片、试管、微量吸管、移液管、洗耳球、生理盐水、RBC稀释液、WBC稀释液（冰乙酸3ml、蒸馏97ml、10g/L亚甲蓝溶液3滴 混合过滤后备用）

2.实验步骤

（1）红细胞计数

1、取红细胞稀释液2.0ml毫升，放入一小试管内。

2、用微量吸管吸至l0ul处。 

3、擦去管尖外部余血将血液迅速轻轻吹入盛有红细胞稀释液的试管内， 上清液嗽洗吸管2-3次，立即摇匀。 

4、将计数池与盖玻片用软布料擦净，将盖玻片覆盖于计数池上。

 5、用吸管吸取混匀的红细胞悬液，充入计数池中。 

6、待3~5分钟，让红细胞完全下沉后，将计数板平放在显微镜台上，用低倍镜观察，如红细胞分布均匀即可换高倍镜进行计数。 

红细胞计数的区域： 中心大方格中的5个中方格(正中一个和四角各一个)。 

计数原则： 数上不数下，数左不数右的计数原则即凡压在中方格边线(双线)上的红细胞，只计上侧与左侧线上的细胞，而压在下侧与右侧线上者不计入。

计算方式：

RBC/L＝5个中方格内RBC数×5×10×200×10⁶

     ＝5个中方格内RBC数/100×10¹²

参考值：

男  性：(4.0～5.5)×10¹²/L

女  性：(3.5～5.0)×10¹²/L

新生儿：(6.0～7.0)×10¹²/L

（2）白细胞计数

1、 取小试管一支，加白细胞稀释液0.38ml。 

2、 用微量吸管准确吸收末梢血20ul,擦去管外余血，将吸管插入试管中稀释液底部，轻轻将血液放出，并吸取上清液清洗吸管两次，混匀。 

3、 待红细胞完全破坏，液体变为棕褐色后，再次混匀后充池，静置2~3min，待白细胞下沉。 

4、 用低倍镜计数四角4个大方格内的白细胞数，对压线细胞按“数上不数下、数左不数右”的原则进行计数。

计算方式：

WBC/L＝(4个大方格内WBC数/4) ×10×20×10⁶

＝(4个大方格内WBC数/20)×10⁹

参考区间：

成年男性：（3.97~9.15）×10⁹/L       

成年女性：（3.69~9.16 ）×10⁹/L   

儿童：（8~10）×10⁹/L   

婴儿：（11~12）×10⁹/L    

新生儿：20×10⁹/L   

三. 实验结果

红细胞计数实验结果如下图：

          

左上角方格                               右上角方格

          

         右下角方格                               左下角方格

正中方格

表一红细胞分类计数表

RBC/L＝5个中方格内RBC数×5×10×200×10⁶

     ＝5个中方格内RBC数/100×10¹²

＝（42+130+224+84+80）/100×10¹²

＝5.60×10¹²

本实验使用的血液标本来自于一52岁男性，成年男性红细胞量参考范围(4.0～5.5)×10¹²/L。因此实验测得数据略大于正常范围。

白细胞计数实验结果如下图：

       

右上角方格                           左下角方格

        

        右下角方格                            左下角方格

表一红细胞分类计数表

WBC/L＝(4个大方格内WBC数/4) ×10×20×10⁶

＝(4个大方格内WBC数/20)×10⁹

＝[(51+80+81+103) /20] ×10⁹

=15.75×10⁹

 

本实验使用的血液标本来自于一52岁男性，成年白性红细胞量参考范围（3.97~9.15）×10⁹/L  。因此实验测得数据远大于正常范围。

四. 讨论

1.      红细胞计数：

本实验使用的血液标本来自于一52岁男性，测得红细胞量为   5.60×10¹² 。成年男性红细胞量参考范围(4.0～5.5)×10¹²/L。因此实验测得数据略大于正常范围。

就实验结果来说，只是略大于正常范围，应当可以接受。但是在实验过程中也出现了一些不规范的操作或失误。比如：在使用移液管时双眼未平视液面最底部与刻度线相切；在使用微量吸管的时候，吸取血液的量有偏差，而且在吸取上清液清洗微量吸管时，有少量上清液被吸入胶头，造成结果偏差；观察右下角方格中的红细胞时，发现其中有聚集在一起的红细胞团，推测可能是血液在微量吸管中时间过长，发生凝固，亦或是加入红细胞稀释剂后未搅拌均匀。

 

2.白细胞计数：

本实验使用的血液标本来自于一52岁男性，测得白细胞量为15.75×10⁹。成年白性红细胞量参考范围（3.97~9.15）×10⁹/L  。因此实验测得数据远大于正常范围。

此实验结果大大超出了预计范围，一般来说，此实验中，白细胞数量偏高可能原因有两方面：一方面是实验操作失误，另一方面是被采血者处于病理状态。

实验中可能出现的失误有：

（1）用微量吸管吸取血液后未将吸管外周的血液擦拭干净。

（2）将稀释后的血液滴至计数板上是，血液未充满玻片与计数板之间的空隙，所以实验时又多加了一滴，可能造成结果偏差。

（3）移液管吸取0.38mL稀释液至试管中时，可能有少量残余在移液管中，导致血液稀释倍数不够。

如果患者是因为病理原因出现白细胞数量过高可能的原因有：

（1）细菌感染,炎症

（2）寄生虫病、过敏性疾病及某些皮肤病

（3）慢性粒细胞白血病及慢性溶血性贫血

第二篇：1.红细胞和白细胞计数

实验课题：红细胞计数和白细胞计数

第一次实验           2012年2月21日

09级临床二大班        姓名：        学号：

【目的】了解红细胞计数、白细胞计数的方法和原理；

         熟悉并掌握它们的临床应用。

【原理】 分别用红、白细胞稀释液将血液稀释一定倍数，置于血细胞计数板内，于显微镜下计数一定容积内的红细胞或白细胞数目，然后在计算出每升血液内的红、白细胞数。

【器材】 显微镜、血细胞计数板、血红蛋白吸管、小试管

【试剂】 抗凝静脉血、红细胞稀释液、白细胞稀释液

【操作】

1.红细胞计数

1）准确吸取红细胞稀释液2毫升于小试管内；

2) 将抗凝静脉血摇匀，用血红蛋白吸管准确吸血10立方毫米；

3) 擦净吸管尖端周围血液。将吸管内血液轻轻注入稀释液管底。用上层稀释液将吸管洗涤三次，立即将血液和稀释液混；

4) 吸取红细胞悬液一滴，滴入血细胞计数池内，静置3-5分钟；

5) 用低倍镜计数血细胞计数池中央大方格内5个方格内的红细胞数；

6) 结果：红细胞计数＝计数所得值*10000（/mm3）

2.白细胞计数

1）准确吸取白细胞稀释液0.38毫升于小试管内；

2）将抗凝静脉血摇匀，用血红蛋白吸管准确吸血20立方毫米；

3）擦净吸管尖端周围血液。将吸管内血液轻轻注入稀释液管底。用上层稀释液将吸管洗涤三次，立即将血液和稀释液混匀；

4）吸取白细胞悬液一滴，滴入血细胞计数池内，静置3-5分钟；

5）用低倍镜计数血细胞计数池四角大方格内白细胞数；

6）结果：白细胞计数＝计数所得值*50（/mm3）

【结果】

红细胞计数=403*10000（/mm3）=4.03*10¹²/L

白细胞计数=118*50（/mm3）=5.9*10⁹/L

【课后习题】

什么是类白血病反应,请与慢性粒细胞性白血病相鉴别

   类白血病反应是指机体对某些刺激因素所产生的类似白血病表现的血象反应。周围血中白细胞数大多明显增高，并可有数量不等的幼稚细胞出现。当病因去除类白血病反应逐渐消失。

中性粒细胞型类白血病反应与慢性粒细胞性白血病鉴别