《医学免疫学》实验教学大纲
实验名称:医学免疫学
学时: 6学时
学 分:
适应专业:护理学专业
执 笔 人:边藏丽
审 定 人:王恺兵
一、实验目的与任务
实验教学是医学免疫学教学的重要组成部分,通过实验教学加深对基础理论知识的理解,
了解常用的免疫学检查方法,掌握免疫学基本实验技术(试管凝集、玻片凝集、对流免
疫电泳、免疫细胞形态观察、淋巴细胞分离、ELISA等),培养学生严谨求实的科学态度
以及观察、分析、综合能力、创造思维能力和初步的科研能力。
二、教学基本要求
医学免疫学实验对象多为具有传染性的材料,要求学生在实验教学中严格遵守实验室
规则,牢固树立无菌观念,认真操作与观察实验结果,实事求是的记录实验结果,并
对实验结果进行认真分析和讨论。
三、实验项目与类型
四、实验教学内容及学时分配
实验一 凝集反应(试管凝集、玻片凝集) 3学时
1. 目的要求
掌握体外抗原抗体反应的特点和影响因素;掌握凝集反应原理、方法和用途。
2.方法原理
颗粒性抗原与相应抗体在一定条件下特异性结合而出现肉眼可见的凝集现象。
3.主要实验仪器及材料
试管、玻片、水浴箱、吸管、伤寒杆菌“H”“O”诊断菌液、大肠埃希菌、大肠埃希菌诊断血清等。
4.掌握要点
掌握凝集反应原理、方法和用途;血清效价;凝集现象的观察。
5.实验内容:
(1)玻片凝集(抗原定性试验)
(2)试管凝集(抗体定量试验)
实验二 对流免疫电泳、血型鉴定 2学时
1. 目的要求
掌握沉淀的反应原理、方法和用途;了解对流免疫电泳的操作步骤,结果观察;掌握血型鉴定的反应原理、方法及结果判断。
2.方法原理
对流免疫电泳是将经典沉淀反应与电泳技术结合而设计的一项实验。沉淀反应是指可溶性抗原与相应抗体在一定条件下发生结合并出现肉眼可见的沉淀物的一种血清学反应。
带电的胶体颗粒可在电场中移动,其移动方向与胶体颗粒所带电荷有关。抗原在PH8.6的缓冲带负电荷,将抗原加于琼脂板阴极端的小孔中,由阴极向阳极移动;抗体为球蛋因电渗作用而流向阴极。当抗原抗体在两孔间相遇时,在两者比例适当处形成白色沉淀线。此种在双向琼指扩散基础上加电泳的方法,称为对流免疫电泳。
血型鉴定属直接凝集反应。将已知标准抗A和抗B血型抗体分别与待测红细胞混合。如果抗原与抗体相对应,则引起红细胞凝集,反之则不凝集,据其凝集现象可判断血型。
3.主要实验仪器及材料
标准的抗A和抗B单克隆抗体(抗A为蓝色,抗B为黄色)、酒精棉球、采血针、载玻片、待测血清、甲胎蛋白诊断血清,肝癌病人阳性血清,PH8.6 0.05mol/L巴比妥缓冲液,琼脂对流免疫板、打孔器、加样器、电泳仪等。
4.掌握要点
(1)对流免疫电泳的操作步骤,结果观察;
(2)血型鉴定的方法及结果判断。
5.实验内容:
(1)讲述沉淀的反应原理、方法和用途;对流免疫电泳的操作步骤,结果观察;血型鉴定的反应原理、方法及结果判断;
(2)对流免疫电泳的操作及结果观察;
(3)血型鉴定的操作及结果观察;
实验三 小鼠吞噬细胞及转化细胞形态观察 2学时
1.目的要求
观察吞噬细胞的吞噬现象;了解机体的非特异性免疫功能。观察转化细胞、淋巴母细胞的形态了解机体的特异性免疫功能。
2.方法原理
巨噬细胞可吞噬异种或异体细胞等体积较大的异物,中性粒细胞可吞噬多种细菌。观察这两类细胞的吞噬现象,可计算出吞噬异物的细胞数和吞噬细胞中吞入的异物数,用以 评价机体的免疫状态。
淋巴细胞,在受抗原的刺激后,可转化为淋巴母细胞,淋巴细胞转化率的高低可反映机体细胞免疫水平。
3.主要实验仪器及材料
昆明小白鼠、表皮葡萄球菌、瑞氏染液、显微镜、玻片等。
4.掌握要点
小白鼠腹腔解剖;观察吞噬细胞的吞噬现象;观察转化细胞、淋巴母细胞的形态。
5.实验内容:
(1)小白鼠腹腔解剖;
(2)标本片制作
(3)瑞氏染液、
(4)油镜下观察转化细胞、淋巴母细胞的形态。
实验四 酶联免疫吸附试验—ELISA(HBsAg检测) 2学时
1.目的要求
了解ELISA的类型,双抗体夹心法的操作方法,掌握结果观察及实际应用。
2.方法原理
酶联免疫吸附试验是一种用酶标化抗原或抗体,以提高抗原抗体反应的灵敏度的免疫学检测方法。本技术肯有敏感性高,特异性强,易观察结果,便于大规模检测的特点。
ELISA的类型有间接法、双抗体夹心法、抗原竞争法等。双抗体夹心法是将抗原结合于已预先包被的已知抗体上,再以酶标抗体与抗原结合,通过观察酶对底物的摧化反应所产和的颜色变化,来判断抗原的存在及含量。
3.主要实验仪器及材料
HBsAg酶标试剂盒,内含:已包被抗-HBs微量反应板、阳性控制血清、阴性控制血清、酶标抗-HBs、酶底物A、酶底物B、中止液、洗涤液。待检血清、微量加样器、吸头等。
4.掌握要点
准确加样;准确掌握每步操作时间;认真观察分析结果
5.实验内容:
ELISA检测HBsAg(或抗—HBsAg)
实验五 豚鼠过敏试验 2学时
1.目的要求
了解实验性过敏性休克的方法及结果观察;在此基础上掌握Ⅰ型超敏反应的机制、临床表现及特点。
2.方法原理
豚鼠过敏反应属Ⅰ型超敏反应,与人类的青霉素和异种血清所引起的过敏性休克相似。先给豚鼠注射异种蛋白,经过一定时间,动物产生IgE后处于致敏状态。当第二次相同较大量抗原注射时,抗原与IgE结合,导致肥大细胞和碱性粒细胞脱颗粒,释放活性介质,作用于效应器官,产生严重的过敏性休克。
3.主要实验仪器及材料
豚鼠:体重150g左右的幼小豚鼠、马血清(或人血清)、注射器、剪刀、酒精棉球等。
4.掌握要点
掌握抗原注射剂量;第二次相同抗原注射时间;豚鼠发敏、过敏性休克现象观察。
5.实验内容:
(1)豚鼠致敏注射
(2)豚鼠发敏、过敏性休克现象观察。
五、考核办法
考勤、实验操作50%;实验报告50%。考核成绩以20%计入课程总成绩。
六、实验教学指导书和参考书
1. 熊平源,边藏丽《医学免疫学与微生物学实验教程》,第二版,广西师范大学出版社,1997年8月.
2. 丁义玲,王恺兵《高等医药院校基础医学实验教程》,第一版,湖北科学技术出版社,20##年9月.
第二篇:医学免疫学教学大纲
医学免疫学教学大纲
适用于五年制本科各专业
一、课程简介
医学免疫学是我院第一批通过的二个省级精品课程之一。她是临床医学专业的专业基础课和桥梁学科,是国家规定的主要课程,是我院教学计划中的必修课,是众多医学专业的考试课。其研究对象是机体免疫系统的生理功能和免疫与多种疾病的关系及各种免疫现象,并应用其进行疾病诊断和防治。本课程的教学目标是为学生学习后续专业基础课、专业课及从事有关疾病的诊断和防治工作奠定知识和智能基础。教学措施上采用讲授、双语教学、实验、演示、自学、讨论、辅导等多种形式,并使用多媒体、投影、录像CAI等先进教学手段,并充分发挥教、学双方的作用,努力实现大纲规定的课程目标。教学评价上采用授课评价和学生成绩测试相结合的方法。
本课程在第三学期开设,总学时57学时,其中,理论课36学时,实验课21学时,理论课与实验课的比例为1.7:1。
二、课程目标:
(一)基本理论知识
掌握免疫的概念及其功能、免疫系统中免疫器官、免疫细胞、免疫分子的组成、类型、特征、结构、功能及其在各种免疫现象中的作用和意义、细胞因子的概念及特性、白细胞分化抗原的概念及意义、MHC的概念及与免疫应答的相互作用、APC的特点及抗原的处理及提呈、免疫应答、免疫调节和超敏反应等免疫现象、基本过程和机理。
掌握抗原、抗体及补体的特点,体液免疫及细胞免疫的基本原理及其在医学中的应用,掌握一些临床免疫学的基本知识。
熟悉各种免疫预防制剂在防治上的应用。
(二)基本技能
通过免疫学实验使学生掌握常用的免疫学检查方法;熟悉凝集、沉淀、补体结合试验、酶联免疫吸附实验及淋巴细胞分离、免疫细胞功能测定等免疫学技术。 1
(三)基本素质
1.态度 在教学过程中注意对学生进行心理素质的培养,使之具有端正的学习和工作态度、严谨的、实事求是的科学作风和良好的职业道德。
2.能力 免疫学是现代生物科学的前沿学科。在理论讲授和实验课中,通过启发式、提问式教学, 引导学生了解现代免疫学研究的基本思路、实验设计、资料处理原则。结合临床病例、临床标本、理沦知识、实验结果,进行逻辑分析、推理、合与判断,使学生既能融汇贯通地掌握所学知识, 又具备灵活而严谨的科学思维能力;组织学生课外文献资料读书会,结合课程内容,重点查阅有关参考文献,书写读书报告或文献综述,培养学生自学教材和查阅参考文献的热情、自学能力、科学思维能力和撰写医学论文的能力;使学生熟悉常用的免疫学英浯词汇,并初步具备阅读本课程英文教科书的能力。
3.加强自身保护,保持身体健康。
三、学时分配
学 时
章 节 理论 实验
第一章 免疫学发展简史及展望 2
第二章 免疫组织和器官 1.5 3
第三章 抗 原 3 3
第四章 Ig 3 3
第五章 补 体 3
第六章 细胞因子 1.5
第七章 白细胞分化抗原和黏附分子 1.5
第八章 主要组织相容性复合体 2
第九章 固有免疫的组成细胞 1
第十章 T淋巴细胞 1.5 3
第十一章 B淋巴细胞 1 3
第十二章 造血干细胞及免疫细胞的生成 0.5
第十三章 固有免疫细胞的免疫应答 0.5 3
第十四章 APC与Ag的提呈 2
2
第十五章 T淋巴细胞对抗原的识别及免疫应答 3
第十六章 B淋巴细胞对抗原的识别及免疫应答 3
第十七章 免疫调节 1.5
第十八章 免疫耐受 1.5
第十九章 超敏反应 3 3
合 计 36 21
第二十章.自身免疫性疾病;第二十一章.免疫缺陷;第二十二章.肿瘤免疫;
第二十三章.移植免疫;第二十四章.免疫诊断;第二十五章.免疫学防治;以上六
个章节为自学部分
四、理论教学目标与内容
第一章 免疫学发展简史及展望
【目标】
一 掌握免疫的概念,免疫的作用
二 熟悉免疫学在未来医学中的作用与地位。
三 了解免疫学发展简史及其在医学中的地位。
【内容】
一 重点阐述 免疫的概念,免疫的作用及免疫学在未来医学中的作用与地位.
二 一般介绍 免疫学发展简史及其在医学中的地位。
第二章.免疫组织和器官
【目标】
一 掌握免疫器官的结构与功能。
二 熟悉淋巴细胞再循环。
【内容】
一 重点阐述中枢免疫器官(骨髓、胸腺、腔上囊)的结构与功能。
二 详细讲述外周免疫器官(淋巴结、脾脏及其他淋巴组织)的结构,功能以及淋巴细
胞再循环。
第三章 抗 原
【目标】
3
一 掌握抗原、半抗原的概念、抗原的异物性与特异性、抗原的种类。
二 熟悉影响抗原应答的因素、超抗原、佐剂。
三 了解丝裂原。
【内容】
一 重点阐述抗原、半抗原的概念、抗原的异物性与特异性、抗原的种类。
二 详细讲述影响抗原应答的因素、超抗原、佐剂。
三 一般介绍丝裂原。
第四章 免疫球蛋白
【目标】
一 掌握免疫球蛋白的概念、结构、功能区及功能区的功能、类型、酶解片段、免疫球蛋白的生物学功能。
二 熟悉免疫球蛋白的分类与分型、免疫球蛋白的多样性、血清型。
三 了解多克隆和单克隆抗体及基因工程抗体。
【内容】
一 重点阐述免疫球蛋白的概念、结构、功能区及功能区的功能、类型、酶解片段、免疫球蛋白的生物学功能。
二 详细讲述免疫球蛋白的分类与分型、免疫球蛋白的多样性、血清型。
三 一般介绍多克隆和单克隆抗体及基因工程抗体。
第五章 补体系统
【目标】
一 掌握补体的概念、激活途径和生物学作用。
二 熟悉补体的组成和理化性质。
三 了解补体活化的调控。
【内容】
一 重点阐述补体的概念、激活途径和生物学作用。
二 详细讲述补体的组成和理化性质。
三 一般介绍补体活化的调控。
第六章 细胞因子
【目标】
一 掌握细胞因子的概念和生物学活性。
4
二 熟悉细胞因子的分类。
三 了解细胞因子的受体、与细胞因子及其相关的生物制品。
【内容】
一 重点阐述细胞因子的概念和生物学活性。
二 详细讲述细胞因子的分类。
三 一般介绍细胞因子的受体、与细胞因子及其相关的生物制品。
第七章 白细胞分化抗原和黏附分子
【目标】
一 掌握白细胞分化抗原的概念、CD的概念
二 熟悉黏附分子的概念
三 了解免疫细胞表面功能分子、黏附分子的功能、CD和黏附分子及其单克隆抗体
的临床应用
【内容】
一 重点阐述白细胞分化抗原的概念、CD的概念
二 详细讲述黏附分子的概念
三 一般介绍免疫细胞表面功能分子、黏附分子的功能、CD和黏附分子及其单克隆
抗体的临床应用
第八章 主要组织相容性复合体(MHC)及其编码分子
【目标】
一 掌握MHC的概念、结构、分布、功能、与抗原肽的相互作用,掌握MHC的多态性
概念
二 熟悉MHC单元型、MHC的生物学功能
三 了解MHC多基因特性、HLA多态性的产生及其意义、HLA与临床
【内容】
一 重点阐述MHC的概念、结构、分布、功能、与抗原肽的相互作用,掌握MHC的多
态性概念
二 详细讲述MHC单元型、MHC的生物学功能
三 一般介绍MHC多基因特性、HLA多态性的产生及其意义、HLA与临床
第九章 固有免疫的组成细胞
【目标】
5
一 掌握吞噬细胞、树突状细胞、NK细胞的功能。
二 熟悉吞噬细胞、树突状细胞加工提呈抗原启动免疫应答的过程,熟悉NK细胞杀
伤靶细胞的作用机制
三 了解吞噬细胞的免疫调节作用和其他固有免疫细胞
【内容】
一 重点阐述吞噬细胞、树突状细胞、NK细胞的功能。
二 详细讲解吞噬细胞、树突状细胞加工提呈抗原启动免疫应答的过程,熟悉NK细
胞杀伤靶细胞的作用机制
三 一般介绍吞噬细胞的免疫调节作用和其他固有免疫细胞
第十章 适应性免疫应答细胞:T淋巴细胞
【目标】
一 掌握T淋巴细胞亚群及T细胞的功能
二 熟悉T淋巴细胞表面分子及其作用、协同刺激分子
三 了解T淋巴细胞表面分子受体和协同刺激分子受体及调节性T细胞的功能
【内容】
一 重点阐述T淋巴细胞亚群及T细胞的功能
二 详细讲解T淋巴细胞表面分子及其作用、协同刺激分子
三 一般介绍T淋巴细胞表面分子受体和协同刺激分子受体及调节性T细胞的功能
第十一章 适应性免疫应答细胞:B淋巴细胞
【目标】
一 掌握B淋巴细胞亚群、B细胞抗原受体复合体及B细胞的功能
二 熟悉B淋巴细胞表面分子及其作用、协同刺激分子
三 了解B淋巴细胞表面分子受体和协同刺激分子受体
【内容】
一 重点阐述B淋巴细胞亚群、B细胞抗原受体复合体及B细胞的功能
二 详细讲解B淋巴细胞表面分子及其作用、协同刺激分子
三 一般介绍B淋巴细胞表面分子受体和协同刺激分子受体
第十二章 造血干细胞及免疫细胞的生成
【目标】
一 熟悉淋巴细胞抗原识别受体多样性产生的机制
6
二 了解造血干细胞的分化
【内容】
一 详细讲解淋巴细胞抗原识别受体多样性产生的机制
二 一般介绍造血干细胞的分化
第十三章 固有免疫细胞的免疫应答
【目标】
一 掌握固有免疫应答的特点、固有免疫应答与适应性免疫应答的关系
二 熟悉组织屏障及其作用和固有免疫细胞及其主要作用
三 了解固有免疫应答的作用时相
【内容】
一 重点阐述固有免疫应答的特点、固有免疫应答与适应性免疫应答的关系
二 详细讲解组织屏障及其作用和固有免疫细胞及其主要作用
三 一般介绍固有免疫应答的作用时相
第十四章 抗原提呈细胞与抗原的处理及提呈
【目标】
掌握APC的种类、特点和对Ag的处理与提呈
【内容】
重点阐述APC的种类、特点、抗原的摄取、加工处理及提呈
第十五章 适应性免疫:T淋巴细胞对抗原的识别及免疫应答
【目标】
一 掌握APC向T细胞提呈抗原的过程及相互作用、T细胞活化的信号传导、Th细胞的效应、CTL细胞的效应
二 熟悉T细胞活化涉及的分子、记忆性T细胞的形成
三 了解T细胞活化信号涉及的靶基因、抗原特异性T细胞克隆性增殖和分化、T细胞活化后诱导的细胞凋亡
【内容】
一 重点阐述APC向T细胞提呈抗原的过程及相互作用、T细胞活化的信号传导、Th细胞的效应、CTL细胞的效应
二 详细讲解T细胞活化涉及的分子、记忆性T细胞的形成
三 一般介绍T细胞活化信号涉及的靶基因、抗原特异性T细胞克隆性增殖和分化、 7
T细胞活化后诱导的细胞凋亡
第十六章 适应性免疫:B淋巴细胞对抗原的识别及免疫应答
【目标】
一 掌握B细胞对TD抗原的识别、B细胞的激化及增殖分化、体液免疫应答的一般
规律
二 熟悉B细胞对TI抗原的免疫应答
三 了解B细胞在生发中心的分化成熟
【内容】
一 重点阐述B细胞对TD抗原的识别、B细胞的激化及增殖分化、体液免疫应答的
一般规律、初次应答和再次应答及比较
二 详细讲解B细胞对TI抗原的免疫应答
三 一般介绍B细胞在生发中心的分化成熟
第十七章 免疫调节
【目标】
一 熟悉细胞水平的免疫调节
二 了解分子水平的免疫调节、整体和群体水平的免疫调节
【内容】
一 详细讲解细胞水平的免疫调节
二 一般介绍分子水平的免疫调节、整体和群体水平的免疫调节
第十八章 免疫耐受
【目标】
一 掌握免疫耐受的概念和中枢耐受的机制
二 熟悉免疫耐受的形成及表现和外周耐受的机制
三 了解免疫耐受的建立和打破与临床医学
【内容】
一 重点阐述免疫耐受的概念和中枢耐受的机制
二 详细讲解免疫耐受的形成及表现和外周耐受的机制
三 一般介绍免疫耐受的建立和打破与临床医学
第十九章 超敏反应
【目标】
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一 掌握超敏反应的概念,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型超敏反应的发生机制和常见疾病
二 熟悉超敏反应的分类、防治原则
【内容】
一 重点阐述超敏反应的概念,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型超敏反应的发生机制和常见疾病,各型超敏反应参与的成分及反应特点
二 详细介绍超敏反应的分类及防治原则
五、实验教学目标和内容
细胞免疫技术
【目标】
1.通过操作使学生掌握血液淋巴细胞的活力测定法和分离技术。
2.通过操作使学生掌握T细胞亚群及功能检查方法。
【内容】
1.小鼠淋巴结或小鼠脾脏淋巴细胞分离技术
2.细胞活力测定。
2.E花环试验。
3.淋巴细胞转化试验。
4.中性粒细胞吞噬反应
5.巨噬细胞吞噬反应
体液免疫检查法
【目标】
通过示教和独立操作使学生掌握抗原抗体在体内外反应的特点和常用的抗原抗体检查法。
【内容】
1.单、双向琼脂扩散试验。
2.免疫电泳。
3.凝集反应。
4.补体结合试验。
5.动物过敏性休克实验
免疫标记技术
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【目标】
1.独立完成免疫标记技术(ELISA测定)过程。
2.示教其他。
【内容】
ELISA测定。
实验项目与学时分配表 实验项目 学时
细胞活力测定 3
淋巴细胞分离技术 3
凝集反应 3
沉淀反应 3
E花环 ELISA测定 3
动物过敏性休克 3
补体结合实验
吞噬反应 3
合 计 21
六、措施和评价
【措施】
1.按教学目标的要求和教学大纲指导 教学的各个环节(包括备课、授课、实验、考试等)。
2.组织部分课堂讨论,加强师生间、学生之间的交流,发挥学生学习的主动性,促进独立思考,培养综合分析能力。
3.联系学科前沿知识,结合临床问题,开展专题讲座。开拓学生视野,激发学习兴趣,提高学生对免疫学在医学中的地位和重要性的认识。
4.充分应用录像设备、计算机、多媒体等电化教学手段,让微观的分子水平及抽象的概念,能直观形象的显示出来,增加免疫学教学的形象性,生动性,趣味性。
5.加强课外辅导,编写配套的学习参考书,指定合适的参考资料,培养学生的 10
目学能力。
6.逐步开展课外小组活动,在教师指导下查阅中,外文资料,进行初步的文献翻译或编译工作,参加部分科研活动,培养学生的科学思维和初步的科研能力。
【评价】
1.授课质量评价 按“教师教学质量评价表”, 由本人学生及教研室予以评定。
2.学生成绩评价 依照教学大纲,参考《统考大纲》进行期末理论考试与实验考试。期末实验考试以操作为主,结合问卷,并参考平时实验操作和实验报告进行综合评价。学科成绩满分为100分,理论成绩和实验成绩分别占70%、30%。
编写 何群力
审校
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