篇一 :酪蛋白的制备英文实验报告

Preparation of casein

I. The purpose and requirements

1. Master to use the centrifuge;

2. Master prepared from milk casein in the principles and methods. II. The experimental principle

Casein is protein phosphorus, but also the heterogeneous mixture, rich in Tyr, Met, Gys, (Gys) 2, pI equal to 4.7 to 4.8, insoluble in ethanol. The experimental use when in the isoelectric point of the principle of minimum solubility, the milk's pH to 4.7, the casein will precipitate out. Sediment washed with ethanol to remove lipid impurities, you get pure casein

III. Equipment and reagents

1. Equipment

a. Centrifuges

b. Filtration system(Buchner funnel);

c. Constant temperature heating device

2. Reagent

a. pH4.7 acetic acid - sodium acetate buffer (0.2mol/L) 30ml

b. Milk 30ml

c.95% ethanol

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篇二 :酪蛋白的制备----生化实验

酪蛋白的制备

一、目的

1、学习从牛奶中制备酪蛋白的原理和方法。

2、掌握等电点沉淀法提取蛋白质的方法。

二、原理

牛乳中的主要的蛋白质是酪蛋白,含量约为35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物,等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理,将牛乳的pH调至4.7时,酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物,除去脂类杂质后便可得到纯酪蛋白。

三、材料、试剂与器具

(一)材料

新鲜牛奶

(一)试剂

1、95%乙醇 1 200mL

2、无水乙醚 1 200mL 3、0.2mol/L pH4.7醋酸——醋酸钠缓冲液 300ml 先配A液与B液

A液:0.2mol/L醋酸钠溶液 称NaAC·3H2O 54.44g,定容至2000ml。 B液:0.2mol/L醋酸溶液,称优 纯醋酸(含量大于99.8%)12.0g定容至1000ml。

取A液1770ml,B液1230ml混合即得Ph4.7的醋酸——醋酸钠缓冲液3000ml。

4、乙醇——乙醚混合液

乙醇:乙醚=1 :1(V/V)

(二)器具

1、离心机 2、抽滤装置

3、精密pH试纸或酸度计 4、 电炉

5、烧杯 6、温度计

四、操作步骤

(一)酪蛋白的粗提

100mL牛奶加热至40℃。在搅拌下慢慢加入预热至40℃、pH4.7的醋酸缓冲液100mL.用精密pH试纸或酸度计调pH至4.7。

将上述悬浮液冷却至室温。离心15分钟(3000 r /min)。弃去清液,得酪蛋白粗制品。

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篇三 :实验报告-从牛奶中分离酪蛋白

实验报告

一、 实验名称:从牛奶中分离酪蛋白

二、 实验目的:

1. 学习从胶体中提取某一类物质的方法。

2. 学习蛋白质的各种颜色反应及其原理。

三、 实验原理:

1. 蛋白质是两性化合物,溶液的酸碱性直接影响蛋白质分子所带的电荷。当调节牛奶的pH值达到酪蛋白的等电点(pl)4.8左右时,蛋白质所带正、负电荷相等,呈电中性,此时酪蛋白的溶解度最小,会以沉淀形式从牛奶中析出。

2. 缩二脲反应原理:具有两个或两个以上肽键的化合物在碱性条件下与Cu2+反应,生成红紫色的络合物。所有的蛋白质均有此显色反应。

3. 蛋白黄色反应原理:硝酸将蛋白质分子中的苯环硝化,在加热状态下产生了黄色硝基苯衍生物,再加碱颜色加深呈橙黄色。这是含有芳香族氨基酸特别是含有酪氨酸和色氨酸的蛋白质所特有的颜色反应。

4. 茚三酮反应原理:蛋白质与茚三酮共热,产生蓝紫色的还原茚三酮、茚三酮和氨的缩合物。此反应为一切氨基酸及α-氨基酸所共有。

四、 实验步骤及现象:

1. 取50mL脱脂牛奶于150mL烧杯中,用热水浴加热至40℃,维持此温度,边搅拌边加稀醋酸(1:9)溶液约2mL——有白色沉淀析出。

2. 继续搅拌并使悬浊液冷却至室温,然后将混合物转入离心杯中,于3000r/min离心15min。

3. 离心完毕后,上清液倒入乳糖回收瓶中,沉淀用95%的乙醇(20ml)搅匀,然后用布氏漏斗减压过滤,用乙醇-乙醚(1:1)混合液洗涤沉淀2次,每次约10ml,最后用5ml乙醚洗涤沉淀一次,减压过滤至干——得到干燥的白色固体。

4. 将干粉铺于表面皿上,称量并计算牛奶中酪蛋白含量。

5. 称取0.5g酪蛋白,溶解于0.4M氢氧化钠溶液的生理盐水(5mL)中,然后滴加3-4滴1%硫酸铜溶液,振荡试管——溶液变成紫色。

五、 实验数据:

空表面皿的质量m0 =28.15g

表面皿与酪蛋白的总质量m1 =31.78g

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篇四 :实验 酪蛋白的制备

实验四 酪蛋白的制备

一、实验目的

1、学习从牛奶中制备酪蛋白的原理和方法。

2、掌握等电点沉淀法提取蛋白质的方法。

二、实验原理

牛乳中的主要的蛋白质是酪蛋白,含量约为35g/L。酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物,等电点为4.7。利用等电点时溶解度最低的原理,将牛乳的pH调至4.7时,酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物,除去脂类杂质后便可得到纯酪蛋白。

三、材料、试剂与仪器

1. 材料

新鲜牛奶

2. 试剂

(1)95%乙醇 1 200mL

(2)无水乙醚 1 200mL

(3)0.2mol/L pH4.7醋酸—醋酸钠缓冲液 300ml 先配A液与B液

A液:0.2mol/L醋酸钠溶液 称NaAC·3H2O 54.44g,定容至2000ml。

B液:0.2mol/L醋酸溶液,称优 纯醋酸(含量大于99.8%)12.0g定容至1000ml。 取A液1770ml,B液1230ml混合即得Ph4.7的醋酸——醋酸钠缓冲液3000ml。

(4)乙醇—乙醚混合液 乙醇:乙醚=1 :1(V/V)

3. 仪器

离心机、抽滤装置、精密pH试纸或酸度计、电炉、烧杯、温度计

四、操作步骤

1. 酪蛋白的粗提

100mL牛奶加热至40℃。在搅拌下慢慢加入预热至40℃、pH4.7的醋酸缓冲液100mL.用精密pH试纸或酸度计调pH至4.7。 将上述悬浮液冷却至室温。离心15分钟(3000 r /min)。弃去清液,得酪蛋白粗制品。

2. 酪蛋白的纯化

(1)用水洗涤沉淀 3次,离心10分钟(3 000r/min),弃去上清液。

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篇五 :实验七 牛乳中酪蛋白的制备

实验七 牛乳中酪蛋白的制备

目的要求:

学习从牛乳中分离纯化酪蛋白的原理和方法。

实验原理:

牛乳中主要含有酪蛋白和乳清蛋白两种蛋白质。其中酪蛋白占了牛乳蛋白质的80%。酪蛋白是白色、无味的物质。不溶于水、乙醇及有机溶剂,但溶于碱溶液。牛乳在pH4.7时酪蛋白等电聚沉后剩余的蛋白质统称乳清蛋白。乳清蛋白不同于酪蛋白,其粒子的水合能力强、分散性高,在乳中呈高分子状态。

本法利用等电点时溶解度最低的原理,将牛乳的pH调至4.7时,酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物,除去脂类杂质后便可得到纯的酪蛋白。酪蛋白含量约为35g/L。

试剂和器材

一、试剂

95%乙醇;无水乙醚;乙醇—乙醚混合液 (V/V=1∶1);冰乙酸 。

0.2mol/L pH4.7醋酸—醋酸钠缓冲液3000mL:

A液:称取NaAc?3H2O 54.44g,定容至2000mL。

B液:称取优级纯醋酸(含量大于99.8%)12.0g定容至1000mL。

取A液1770mL,B液1230mL混合即得pH4.7的醋酸—醋酸钠缓冲液3000mL。

二、材料

牛奶制品。

三、器材

低速离心机,精密pH试纸或酸度计,水浴锅,烧杯,温度计,天平。

操作方法

1.将25mL牛奶加热至40℃。在搅拌下慢慢加入预热至40℃、pH4.7醋酸缓冲液25mL。用精密试纸或酸度计调pH值至4.7。

将上述悬浮液冷却至室温。离心15min(3000r/min)。弃去清液,得酪蛋白粗制品。

2.用等体积水洗沉淀三次,离心10min(3000r/min),弃去上清液。

3.在沉淀中加入约10mL乙醇,搅拌片刻,离心10min(3000r/min)弃上清。

4.用乙醇—乙醚混合液洗沉淀2次;最后用乙醚洗沉淀2次,2mL/管。

5.将沉淀从离心管转移出来,摊开在表面皿上,风干;得酪蛋白纯品。

6.准确称重,计算酪蛋白含量(g/100mL牛乳), 并和理论含量为3.5g/100mL牛乳相比较,求出实际得率。

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篇六 :蛋白质的定量测定实验报告

篇七 :生化综合实验报告--测定蛋白质含量的三种方法及其比较

 

本科学生综合性实验报告

学号              姓名

学院             专业、班级

实验课程名称测定蛋白质含量的三种方法及其比较

教师及职称

开课学期      至学年       学期

            填报时间       年   月    

云南师范大学教务处编印

实验设计方案


实验报告


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篇八 :蛋白酶的发酵及酶活力测定实验报告

蛋白酶的发酵及酶活力测定实验报告

               学院:生物科学与工程学院   

             专业: 生物技术            

             班级: 1班                

             姓名:                      

             学号:                      

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