氨在肝性脑病发病机制中作用观察

1．实验目的：

1.1复制家兔急性肝功能不全模型。用十二指肠灌注复方氯化铵法，观察氨中毒对家兔脑功能影响。

1.2用耳缘静脉注射谷氨酸钠法治疗肝性脑病，探讨其治疗机制。

2．实验材料：

家兔，200g/L氨基甲酸乙酯，25g/L复方氯化铵溶液，25g/L复方谷氨酸钠溶液，生理盐水，手术器械。

3．实验方法：

3.1实验分组：

1组（1、2组）——模型组

2组（3、4组）——治疗组

3组（5组） ——假手术组

4组（6组） ——症状明显抢救组

5组（7、8组）——预防组

3.2实验步骤：

3.2.1麻醉、固定：家兔称重，按5ml∕kg体重剂量自耳缘静脉注射200g∕L氨基甲酸乙酯，家兔麻醉后背位固定于兔台上。

3.2.2急性肝功能不全动物模型复制

① 肝脏大部结扎术：从胸骨剑突起作上腹正中切口，长约8cm，沿腹白线剪开腹壁肌层及腹膜。暴露肝脏，剪断肝镰状韧带、肝胃韧带。右手食中指夹持粗棉线沿肝左外叶、左中叶和方形叶根部绕一周，结扎以阻断血流。 ② 十二指肠插管：沿胃幽门向下找出十二指肠，用眼科剪在肠壁作一小切口，将胶管顺十二指肠向远端插入肠腔内约5cm，作荷包缝合固定，然后用止血钳夹住腹壁切口边缘，关闭腹腔。向十二指肠插管中注入复方氯化铵溶液，每次10ml，间隔5min（2次，20ml）。然后每次5ml，间隔5min。观察家兔呼吸、肌紧张变化、出现抽搐及痉挛时停止灌注。

3.2.3肝性脑病治疗

① 治疗组：耳缘静脉注射复方谷氨酸钠溶液（30ml∕kg），直至症状缓解，并继续观察。

模型组：给予生理盐水。

② 实验分组设计

1组——模型组：不给药，给予生理盐水，观察出现明显肝性脑病症状。 2组——治疗组：仔细观察，出现抽动，立即给药，实施抢救。

3组——假手术组：手术全过程都做，只是不结扎肝脏，注入复方氯化铵溶液，观察是否出现肝性脑病症状。

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氨在兔肝性脑病发病机理中的作用

The Role of Ammonia in the Mechanism of Hepatic Encephalopathy

【教学对象与学时】

一、教学对象：五年制本科

二、学时：4学时

【预习要求】

预习肝性脑病的概念，发病机制及其决定和影响因素。

【目的要求】

一、采用肝大部分结扎，复制急性肝功能不全的动物模型。

二、观察肝性脑病的表现，探讨血氨升高在肝性脑病发病机理中的作用。

【重点和难点】

一、重点

1、掌握复制急性肝功能不全动物模型的实验方法；

2、掌握复制肝性脑病动物模型的实验方法；

3、观察肝性脑病的临床表现；

4、掌握血氨升高在肝性脑病发病机理中的作用。

二、难点

1、复制急性肝功能不全的动物模型；

2、血氨升高在肝性脑病发病机理中的作用。

【教学过程设计】

1、课前提问和预习检查

2、讲解本次实验的目的、所用动物和器材、实验分组、观察指标、实验步骤。

3、学生分组进行实验、记录结果。

4、实验结束前汇总全班实验结果，并对实验结果进行讨论。

【课前预习检查或提问】
1、Definition ofHepatic Encephalopathy

肝性脑病(hepatic encephalopathy)是由于急性或慢性肝功能不全，使大量毒性代谢产物在血循环中堆积，临床上出现一系列神经精神症状，最终出现肝性昏迷。这种继发于严重肝病的神经精神综合征，称为肝性脑病。对于这个概念，我要强调两点：第一、肝性脑病的病理生理条件是有严重肝脏疾病，第二，是在此条件上，并有诱因时出现了神经精神综合症。这两个方面缺一不可，共同构成肝性脑病这个概念。

2、Stages

 ofHepatic Encephalopathy

临床上根据肝性脑病症状的轻重进行分期，即意识障碍程度、神经系统症状和脑电图的变化，将肝性脑病分为四期，分别为：前驱期；昏迷前期；昏睡期；昏迷期。

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氨中毒在肝性脑病发病中的作用

XXX

（XX大学，09级针灸推拿学，本部2班，20091020---）

[摘要]目的：对经不同处理的实验动物输入氯化氨，观察出现症状所需氯化铵用量及时间，以探讨氨在肝性脑病发病机制中的作用；了解降低肠道pH及注射谷氨酸是针对氨中毒的一项基本治疗措施。方法：将家兔麻醉后实施腹部手术，部分实验组和对照组结扎家兔肝脏的其中3叶，其余实验组和对照组不结扎家兔的肝脏，所有实验组静脉注射氯化铵，所有对照组静脉注射生理盐水，观察家兔是否出现行为异常以及出现异常所需的时间。对出现行为异常的家兔静脉注射醋酸进行救治。结果：未结扎的注射生理盐水或氯化铵的家兔和结扎了注射生理盐水的家兔没有出现抽搐及角弓反张等异常行为，结扎肝脏后的家兔出现了有节律的抽搐，出现四肢伸直，头尾昂起，脊柱挺硬等角弓反张现象。注射了醋酸后的家兔得到救治，角弓反张的现象有所缓解，而没有进行救治的家兔持续抽搐，死亡。结论：当肝功能受损时，，肝脏将氨转化为尿素的能力减弱，可导致血氨升高，间尔影响脑的功能。 。

[关键词]：氨中毒 肝性脑病

肝性脑病是各种严重肝脏疾病所致的以代谢紊乱为基础的神经、精神综合征。其发病机制比较复杂而且是在多种因素共同作用下发生。国内外学者经过多年研究，对肝性脑病发病机制提出多种假说，但目前仍没有一种理论能够满意解释肝性脑病时肝脏功能异常、神经系统紊乱与临床表现之间的相互联系。本文就对肝性脑病的发病机制进行综述。

1材料和方法

1.1实验动物 家兔，由浙江中医药大学实验动物中心提供

1.2主要试剂及仪器 氨基甲酸乙酯，复方氯化铵溶液，复方谷氨酸溶液，醋酸，生理盐水，手术台，纱布，玻璃分针，哺乳动物手术器械，不同型号的注射器，粗绳线，培养皿

1.3方法

1.3.1实验分组 随机选取一半数量的实验动物作为实验组动物，另一半动物作为正常对照组动物。

1.3.2 麻醉 家兔称重，按5ml/kg体重剂量自耳缘静脉注射200g/L氨基甲酸乙酯，家兔麻醉后背位固定于兔台上。

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氨中毒在家兔肝性脑病发病机制中的作用观察

【摘要】目的：①复制家兔急性肝功能不全模型，用十二指肠灌注复方氯化铵法，观察氨中毒对家兔脑功能影响；②用耳缘静脉注射谷氨酸钠法治疗肝性脑病，探讨其治疗机制。方法：全班分为五大组，其中第一组为模型组，第二组为治疗组，第三组为假手术组，第四组为症状明显抢救组，第五组为预防组。结果：复方氯化铵可使家兔大脑功能受影响,而肝可解氨中毒，复方谷氨酸钠也可缓解其作用。结论：肝具有解毒作用，肝功能不全在肝性脑病的发生中占极大地作用。 【关键词】氨中毒 肝性脑病 复方谷氨酸钠 1实验材料

1.1对象：家兔(2.8kg)；

1.2实验试剂：氨基甲酸乙酯，复方氯化铵溶液，复方谷氨酸钠溶液；

1.3实验仪器：10ml注射器、50ml注射器及针头，手术剪，镊子、止血钳、兔手术台、棉线若干、婴儿秤、缝针、导管；

2实验方法

2.1实验分组 本组实验为假手术组

2.2麻醉 家兔称重，按5ml/kg剂量由耳缘静脉注射13.5ml氨基甲酸乙酯。待家兔麻醉后背位固定于兔手术台上。

2.3急性肝功能不全动物模型复制 从胸骨剑突下沿腹正中线行长8cm的切口，打开腹腔；暴露肝脏，向下压肝脏，剪断肝与横膈之间的镰状韧带，使肝叶游离，辨明肝脏各叶，用粗棉线绕肝左外叶、左中叶、右中叶根部一周，不结扎肝脏。

找出十二指肠，找其上壁血管较少的一处做一环形缝合，在环形中间剪一个小口，沿小肠方向插入导管并向下推进4~5cm，切口荷包缝合固定导管，用止血钳关闭腹腔切口。

2.4试剂注射 前两次分别向十二指肠内注入10ml的复方氯化铵溶液，之后的注射量都为5ml每次注射间隔5min，仔细观察并记录。 2.5实验观察

2.5.1记录家兔的呼吸频率：实验前、实验中、治疗中、死亡前。 2.5.2记录家兔抽搐及痉挛发生所需时间。 2.5.3记录所用复方氯化铵溶液的总量。

3实验结果

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氨中毒在家兔肝性脑病发病机制中的作用观察

【摘要】目的：①复制家兔急性肝功能不全模型，用十二指肠灌注复方氯化铵法，观察氨中毒对家兔脑功能影响；②用耳缘静脉注射谷氨酸钠法治疗肝性脑病，探讨其治疗机制。方法：全班分为五大组，其中第一组为模型组1，第二组为模型组2，第三组为治疗组，第四组为假手术组，第五组为预防组。结果：复方氯化铵可使家兔大脑功能受影响，而肝可解氨中毒，复方谷氨酸钠也可缓解其作用。结论：肝具有解毒作用，氨中毒在肝性脑病的发生中起重要作用。

1实验材料

1.1对象：家兔(2.0kg)；

1.2实验试剂：氨基甲酸乙酯，复方氯化铵溶液，复方谷氨酸钠溶液；

1.3实验仪器：10ml注射器、50ml注射器及针头，手术剪，镊子、止血钳、兔手术台、棉线若干、婴儿秤、缝针、导管；

2实验方法

2.1实验分组：本组实验为假手术组

2.2麻醉：家兔称重2.0kg，按5ml/kg剂量由耳缘静脉注射10ml20%氨基甲酸乙酯。待家兔麻醉后背位固定于兔手术台上。

2.3急性肝功能不全动物模型复制

2.3.1肝脏大部结扎术（本组不需结扎）

2.3.1.1从胸骨剑突下沿腹正中线行长8cm的切口，打开腹腔。

2.3.1.2暴露肝脏，向下压肝脏，剪断肝与横膈之间的镰状韧带，使肝叶游离，辨明肝脏各叶，用粗棉线绕肝左外叶、左中叶、右中叶根部一周，不结扎肝脏。

2.3.2十二指肠插管术：沿胃幽门向下找出十二指肠，用眼科剪在肠壁作一小切口，将胶管顺十二指肠向远端插入肠腔内约5cm，作荷包缝合固定。然后用止血钳夹住腹壁切口边缘，关闭腹腔。

2.4试剂注射：向十二指肠插管中注入复方氯化铵溶液，每次10 ml，间隔5min（2次，20 ml）。然后每次5ml，间隔10min。观察家兔呼吸、肌紧张变化、出现抽搐及痉挛时停止灌注。 2.5实验观察

2.5.1记录家兔的呼吸频率：实验前、实验中、治疗中、死亡前。 2.5.2记录家兔抽搐及痉挛发生所需时间。 2.5.3记录所用复方氯化铵溶液的总量。

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氨中毒在肝性脑病发病中的作用

一、 实验目的：

对经不同处理的实验动物输入氯化氨，观察出现相应症状所需氯化铵用量及时间，以探讨氨在肝性脑病发病机制中的作用；了解降低肠道pH值及注射谷氨酸钠是针对氨中毒的一项基本治疗措施。

二、 实验材料：

家兔；氨基甲酸乙酯，复方氯化铵溶液，复方谷氨酸钠溶液，醋酸，生理盐水。

三、 实验方法：

（1）实验分组：随机选取一半数量的实验动物作为实验组动物，另一半动物作为正常对照组动物。

（2）麻醉：家兔称重，按5ml/kg体重剂量自耳缘静脉注射200g/LL氨基甲酸乙酯，家兔麻醉后背位固定于兔台上。

（3）急性肝功能不全动物模型复制：从剑突下沿腹正中线行长约8cm的切口，打开腹腔；暴露肝脏，向下压肝，剪断肝与横膈之间的镰刀状韧带，再将肝叶上翻，钝性分离肝胃韧带，使肝叶完全游离，辨明肝脏各叶。用粗棉线绕肝左外叶、左中叶、右中叶和方形叶根部一周并结扎，以阻断肝血流。找出十二指肠，切开一小口，插入导管向下推进约4—5cm，切口荷包缝合固定导管，组织钳关闭腹壁切口。

（4）实验观察：①观察并记录兔一般情况，呼吸，角膜反射，对刺激的反应等指标。然后每隔5min向十二指肠导管口注入25g/L复方氯化铵溶液5ml，动态观察并记录各项指标的变化，直至出现全身性抽搐、角弓反张为止，记录所用的复方氯化铵的总量，并计算每公斤体重的用量。②治疗：按20ml/kg剂量自耳缘静脉缓慢注入25g/L复方谷氨酸钠溶液，

【】并按5ml/kg体重向十二指肠注入10g/LL醋酸进行治疗处理，观察症状有无缓解。1

四、 实验结果：

V氯化铵=35ml中毒时间=25分 呼吸频率增加、角膜反射减弱、瞳孔变大、对刺激的反应减弱、家兔的肌紧张加剧，以至于出现抽搐甚至角弓反张等表现。立即给复方谷氨酸钠溶液和醋酸，实施抢救，兔角弓反张消失,恢复角膜反射，瞳孔变小，对刺激的反应增强，逐渐恢复正常。

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氨中毒在家兔肝性脑病发病机制中的作用

2010级 临滨(1)班 谢冬 20102090116

【实验目的】

对经不同处理的实验动物输入氯化铵，观察出现相应症状所需氯化铵用量及时间，以探讨氨在肝性脑病发病机制中的作用。了解降低肠道PH及注射谷氨酸钠是针对氨中毒的一项基本治疗措施。

肝性脑病是继发于严重肝脏疾病的一系列精神神经综合症。有关肝性脑病的发病机制有多种学说，其中氨中毒学说受到重视。正常情况下，血氨的来源与清除保持动态平衡，而氨在肝中合成尿素是维持此平衡的关键。病理情况下当肝功能严重受损时，或慢性肝硬化等疾病使肠壁吸收肠道内生成的氨过多，或经侧支循环进入体循环，均可导致血氨升高。增高的血氨可通过血脑屏障进入脑组织，通过干扰脑组织对能量代谢，使脑内神经递质发生改变等作用，引起脑的功能障碍从而出现相应的症状和体征。

谷氨酸可与血中过多的氨结合而成为无毒的谷氨酸钠，由尿排出，进而降低血氨。谷氨酸还可参与脑细胞的代谢，改善中枢神经系统的功能肠道给予醋酸溶液可使肠道PH降低，减少氨的吸收。

【实验材料】

家兔；氨基甲酸乙酯，复方氯化铵溶液，复方谷氨酸钠溶液，醋酸，生理盐水。

【实验步骤】

1、实验分组

1，2组：氯化铵+结扎+抢救（谷氨酸钠、醋酸）

3，4组：氯化铵+结扎+抢救（谷氨酸钠）

5，6组：结扎+抢救（谷氨酸钠、醋酸）+氯化铵

7 组：氯化铵+结扎+抢救（谷氨酸钠、醋酸）

2、 麻醉 家兔称重，按5ml/kg体重剂量自耳缘静脉注射200g/L氨基甲酸乙酯。待家兔麻醉后背位固定于兔手术台上。

3、急性肝功能不全动物模型复制 从胸骨剑突下沿腹正中线行长8cm的切口，打开腹腔；暴露肝脏，向下压肝脏，剪断肝与横膈之间的镰状韧带，使肝叶游离，

辨明肝脏各叶，用粗棉线绕肝左外叶、左中叶、右中叶根部一周，不结扎肝脏。找出十二指肠，找其上壁血管较少的一处做一荷包环形缝合，在环形中间剪一个小口，沿小肠方向插入导管并向下推进4~5cm，切口荷包缝合固定导管，用止血钳关闭腹腔切口。

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