氯丙嗪的镇吐、降温作用及对电刺激小鼠激怒反应的影响
一、目的
1.观察氯丙嗪对电刺激小鼠激怒反应的影响
2.了解催吐作用的试验方法,观察氯丙嗪的镇吐作用。
3.观察氯丙嗪对小鼠的降温作用及其特点
二、作用机制
1.氯丙嗪的镇静作用是通过阻断中脑-边缘叶及中脑-皮质通路中的多巴胺受体。(镇静)
2.氯丙嗪可以阻断了延脑第四脑室底部的催吐化学感受区的D2受体,大剂量的氯丙嗪直接抑制呕吐中枢。(镇吐)
3.氯丙嗪对下丘脑的调节中枢的抑制。(降温)
三、实验材料
动物:小白鼠,体重18~22g,雌雄不拘。
药品:0.08%氯丙嗪,生理盐水,0.4%氯丙嗪,0.4%酒石酸锑钾,生理盐水,0.03%氯丙嗪,生理盐水,液体石蜡。
器材:药理生理多用仪及附件激怒盒、万用电表、小动物电子秤、鼠笼、1ml注射器、5号针头,小铁丝笼、小动物电子秤(或天平)、5ml注射器,口腔温度计、1ml注射器、小铁丝笼。
四、实验步骤
将小鼠编号0——11
(一)电刺激激怒实验
实验装置的连接和调置:将药理生理多用仪后板上的开关拔向“激怒”一边,交流电输出电压的电位调节旋钮逆时针旋转至最小,交流电输出接线一端插入“交流输出”插座,另一端分别夹在附件激怒盒的红、黑柱上,即与刺激盒的导电铜丝板相联。交流输入线一端插入“交流输入”插座,另一端接实验室电源。刺激方式拨到“连续B”,“B时间”置于1s,“A频率”置于4Hz,然后用万用表测其阈电压。
诱发小白鼠激怒反应:取异笼喂养的小白鼠各1只,称重后将2只小白鼠放入附件激怒盒的导电铜丝板上,把盖子盖上后,将电源打开,顺时针调节交流电压输出旋钮,直至引起小白鼠激怒反应,刺激电压一般为30V左右。激怒现象表现为:两鼠对应、前肢离地、对峙、互相撕咬等。若刺激1min以上仍未出现者弃之不用。以上法挑选有激怒反应的合格小白鼠两对,并记录其刺激电压。
给药及观察:取一对小白鼠腹腔注射0.08%氯丙嗪 0.1ml/10g,另一对腹腔注射生理盐水0.1ml/10g。给药后20min,先用万用电表调节刺激输出电压至给药前引起激怒反应的阈电压,然后断开电源,将该对小白鼠置于导电铜丝板上,再打开电源,刺激1min。观察给药前后反应的差异。
(二)镇吐作用
取小白鼠4只,称重,随机分为两组,并观察动物活动情况及有无呕吐现象。给甲组小白鼠腹腔注射0.4%氯丙嗪 0.8mg/10g(0.2ml/10g),1min后灌服0.4%酒石酸锑钾1.2ml/10g(0.3ml/10g)。给药后将小白鼠分别置于小铁笼中,记录给药时间,密切观察小白鼠出现何种反应,比较二组反应有何不同。
(三)降温作用
挑选合格动物:取小白鼠置小铁笼上,用左手拇指盒食指捏住其后头颈部之皮肤,翻转使之腹向上,以左手无名指将鼠尾压再拇指基部,右手拿口腔温度计,将水银柱甩到35oC以下,末端涂少许液体石蜡(或凡士林),插入小鼠肛门(深度约0.5cm,水银头端完全进入即可),3min后取出,记录体温读数。以上法挑选体温在36.5.~37.5℃小鼠3只。
给药及观察:取合格小鼠3只,称重后编号,观察正常活动情况,然后9号、10号小鼠分别肌注0.03%氯丙嗪0.1ml/10g,11号小鼠肌注等量生理盐水。给药后立即将9号、11号小鼠放入冰箱(避室温低10oC左右)30min。比较给药前后各鼠体温变化。
五、实验结果
表1.小鼠激怒反应表
表2.镇吐作用表
表3.降温作用表
六、注意事项
1.切忌将交流输入插头插入交流输出,否则将少坏仪器。
2.导电铜丝板使用前,应用砂纸擦一下,以去除表面的氧化层,增强导电性。
3.刺激电压必须从小到大,过低不能引起激怒反应,过高可致小白鼠逃避,且每次刺激完后,应将刺激电压旋钮调至最小,并将小鼠放回鼠笼,以免在铜丝板排便影响导电
4.酒石酸锑钾应新鲜配制,久放失效。灌服方法:用注射器将药液灌入小白鼠胃中,以防发生外漏。
5.测小鼠肛门温时,温度计插入肛门的深度要相同。
6.1号、3号小鼠刚入冰箱的是间均控制在30min。
七、实验结果预测
1.给氯丙嗪的小鼠激怒时阈电位升高,激怒时间延长。
2.给氯丙嗪的小鼠不会被吹吐或催吐时间延长。
3.给氯丙嗪的小鼠的体温与环境相同,注射生理盐水的小鼠体温恒定。
八、参考文献
《药理学》主编 吴铁 科学出版社 P151
《药学实验教程》主编 崔燎 科学出版社 P113
《实验药理学》主编 丁虹 中国科学出版社 P601
第二篇:中药药理学实验
实验一 附子炮制前后致小鼠中毒死亡的情况比较
实验目的:用小鼠死亡数观察附子炮制前后毒性的不同
实验原理: 附子的有毒成份主要是乌头碱。它的性质不稳定,经长时间用水浸泡和加热煎煮炮制,都可使乌头碱水解成毒性较小的苯甲酰乌头胺和乌头胺。生附子中乌头碱含量高,经过炮制后乌头碱含量减少,毒性也降低,引起动物中毒死亡的剂量就比生附子大得多。
实验器材:小鼠笼(或罐)、电子天平、注射器(1ml),小鼠灌胃针头。
药品:生附子和熟附子水煎液1g/1ml、苦味酸。
材料:小白鼠。体重18-22g,雌雄不拘。
实验方法
1,取4只小白鼠,称重,用苦味酸标记后随机分为两组,分别0.2ml/10g的生附子和炮制后的附子水煎液灌胃。30min后观察两组小鼠中毒症状和死亡数有无不同。
2,生附子灌服后约20min动物出现腹部收缩,身体摇摆,步态不稳和不安静等现象;30min左右可能死亡。而炮制附子水煎液灌服后则无此中毒现象。观察结果并记录。
实验结果:
思考题:
1. 中药炮制后对临床有何指导意义
2. 为预防附子中毒,应如何降低其毒性
延胡索炮制前后镇痛作用的影响
实验目的:通过醋酸扭体法观察延胡索炮制前后镇痛作用的变化
实验原理:延胡索的醇制浸膏、醋制浸膏、散剂等均有明显镇痛作用。延胡索乙素镇痛作用最强,丑素次之,甲素较弱。延胡索乙素为镇痛主要有效成分,其镇痛作用较吗啡弱但优于复方阿司匹林,对钝痛的作用优于锐痛。与吗啡等麻醉性镇痛药相比副作用少而安全,没有成瘾性。镇痛时对呼吸没有明显抑制,也无便秘等副作用。生品中游离生物碱难溶于水,煎液中有效成分低,醋制后生物碱成盐,易溶于水,镇痛作用增强。
左旋四氢巴马汀是一个多巴胺受体阻断剂,其镇痛作用机制可能与阻断脑内多巴胺D1
受体,使纹状体亮氨酸脑啡肽含量增加有关。
实验方法:
取4只小白鼠,称重,用苦味酸标记后随机分为两组,分别0.2ml/10g的生延胡索和
炮制后的延胡索水煎液灌胃。45分钟后分别腹腔注射0.7%冰醋酸溶液。15min后观察小鼠们15分钟内扭体的次数。
实验结果:
思考题:
1. 炮制后延胡索镇痛作用增强的原因
实验二:生大黄制大黄对小肠运动的影响
实验目的:观察泻下药大黄、制大黄对小白鼠肠蠕动的影响以及它们的药理研究。
实验原理:大黄的主要成分为蒽醌衍生物及二蒽酮类衍生物,大黄为泻下药的代表,临床发现病人大量服用大黄后会产生继发性便秘,在中医治疗中,常以芒硝、厚朴、枳实等配伍应用,以减轻此副作用 。现代研究表明,是因为大黄同时含有泻下作用的蒽苷及止泻作用的鞣质所致,蒽苷泻下作用强而作用时间较短,鞣质止泻作用强度较弱而作用时间长,大黄不同炮制品的致泻强度亦不同,生大黄的致泻强度高于熟大黄(九蒸九晒品、热压一次品及热压三次品)和制大黄酒(或醋)炒后泻下效力降低30%左右。有研究表明,大黄煎煮时间越长,致泻作用愈小,以热水浸50℃以下减压浓缩为好。
实验步骤:取体重20±2g相近的小白鼠8只,随机均分为2组,每组4只,用苦味酸做标记。分别用上述3种炭末液0.2ml/10g体重灌胃。给药30min后脱颈椎处死,切开腹腔分离肠系膜,剪取上端至幽门,下端至回盲肠的肠管,置于托盘上。轻轻将小肠拉成直线,测量肠管长度作为“小肠总长度”,从幽门至炭末前沿的距离作为“炭末在肠内推进距离”,取各组小鼠平均值,用公式计算炭末推进百分率。
炭末推进率=炭末在肠内推进距离(cm)÷小肠全长(cm)×100%
实验结果:
思考题:1.大黄泻下的主要成分及机制
2.大黄炮制前后化学成分有何变化
实验三:猪苓泽泻对家兔的利尿作用
实验目的:学校导尿法,观察猪苓泽泻的利尿作用
实验原理:猪苓味甘、淡、性平,归肾、膀胱经,具有利尿渗湿作用,且作用于黄芪、玉米须、木通、淡竹叶等。主治小便不利、水肿、泄泻、淋浊、带下。实验研究表明猪苓的利尿作用与抑制肾小管对水、电解质的重吸收有关,但其利尿特点及分子生物学机制尚不明确。 研究发现,其为利尿药,也有降血压的作用,可医治肾性水肿、心脏性水肿、烦热口渴、小便不利、泻痢及其他新陈代谢障碍等。猪苓提取物对肾结石大鼠实验表明: 猪苓具有明显促进肾排泄Na+、k+、cl-,而抑制尿ca+排泄及抑制尿草酸钙结晶的生长与聚集作用,同时其肾脏骨桥蛋白(OPN) mRNA的表达也得到抑制,表现出明显的利尿和抑制尿结石形成作用,并具有明显的肾功能保护作用。研究发现,猪苓含钾量不高(30mg) ,亦不稀释血液,其利尿作用可能是由于抑制了肾小管对电解质和水的重吸收。
泽泻性寒,味甘、淡,归肾、膀胱经。具有利水渗湿、泄热之功效。用于小便不利、水肿胀满、泄泻、尿少、痰饮、眩晕、热淋涩痛等症。泽泻有明显的利尿作用,这与其含有大量的钾盐有关。泽泻可用于小便不利、水肿胀满、泄泻尿少、痰饮眩晕、热淋涩痛、高脂血症、泽泻含三萜类化合物及甾醇、生物碱、苷类、黄酮、有机酸、氨基酸、多糖、挥发油等成分。研究发现,泽泻对人及家兔均有利尿作用,可使健康人尿量增加63%,尿中排钠、尿素量也增加,而泽泻经甲醇、苯和丙酮提取的组分T 10mg/kg给药可使猫和兔的血压下降。
实验步骤:取一只家兔称重,固定,耳缘静脉注射生理盐水10ml/kg,固定在手术台上,插导尿管,排空膀胱内尿液,收集5~10min内尿液两次,一只家兔灌胃猪苓泽泻水煎液,另一只灌胃等量的生理盐水,30min后收集30min的尿液。
实验结果:
思考题:
1. 影响中药利尿的因素有哪些?
2. 猪苓利尿作用机制
3. 泽泻利尿作用机制
实验四 三七对小鼠出血时间和凝血时间的影响
实验目的:学习玻片法测定出血时间及凝血时间的测定,观察三七缩短出血时间的作用
实验原理:三七具有良好的止血功效,能明显缩短出血和凝血时间。 研究表明,三七的止血成分主要为三七素(Dencichine)。三七素能促使血小板聚集、变形,释放ADP、血小板因子Ⅲ和钙离子等物质而达到止血作用。三七中含有的三七皂苷与人参皂苷均对ADP诱导的家兔血小板聚集有明显抑制作用,且表现出剂量——反应模式。在同等剂量下三七总皂苷与人参总皂苷的作用没有明显差转自http://www.foryn.cn异。三七皂苷表现出对血浆凝血因子与血小板聚集性均有抑制作用。且在对血小板聚集的抑制方面,三七皂苷与人参皂苷的作用相当。人参三醇型皂苷具有溶血作用,人参二醇型皂苷的溶血活性很低。因此,三七具有活血化瘀的功效!
实验步骤:取4只小白鼠,称重,用苦味酸标记后随机分为两组,分别0.2ml/10g的三七和等量的生理盐水灌胃。30min后剪去小鼠尾端尾巴3mm左右,每隔30秒用滤纸轻轻吸除尾巴上的血,直至血流自然停止。然后45min左右,眼球取血滴于再玻片上两滴。计时,每隔30秒用针头轻佻,直至有血丝出现,马上挑另一只予以验证。即为凝血时间。
实验结果:
思考题:
1. 三七及三七伤药片对凝血时间有何影响,此作用临床意义何在?
2. 测定凝血时间有何临床意义?
实验五 桔梗对小鼠的祛痰作用
实验目的:学习酚红从呼吸道分泌法,观察桔梗对小鼠的祛痰作用
实验原理:指示剂酚红自小鼠腹腔注射并经腹腔吸收后,可部分地由支气管黏液腺分泌入气道,有祛痰作用的药物在使支气管分泌液增加的同时,其由呼吸道粘膜排出的酚红也随之增多。因而可从药物对气管内酚红排泌量的影响来观察其祛痰作用。酚红在碱性溶液中呈红色,将气管放入定量的生理盐水中,加碳酸氢钠使其显色,用比色法,分光光度计,测出酚红的排泌量。从而得到药物的祛痰作用。
实验步骤:取小鼠 4 只,随机分为对照组和桔梗水煎液组,按 20ml/kg,体重,灌胃给药 30min 后。对照组给同体积生理盐水。由腹腔注射酚红溶液0.5ml/只。30min 后颈椎脱臼处死小鼠,剥去气管周围组织,剪下自甲状软骨至气管分支处的一段气管,放进盛有 3ml 生理盐水的试管中,再加入 0.1ml 碳酸氢钠溶液。比较生理盐水组和桔梗组的液体颜色。
实验结果:
思考题:
1.桔梗祛痰作用的机制?
实验六 人参对小鼠游泳时间的影响
实验目的:了解人参对小鼠游泳时间的影响,掌握疲劳作用药物的常用筛选方法
实验原理:人参能促进人体对糖原和三磷酸腺苷等能量物质的合理利用,并使剧烈运动时产生的乳酸转化为丙酮酸进入三羧酸循环,为机体提供更多的能量,减轻体力运动时的疲劳。本实验以小鼠游泳时间为指标观察人参的抗疲劳作用。
实验步骤:玻璃缸内加水,水深20cm,水温保持在20±0.5℃。取4只小鼠,雌雄不限,称重,用苦味酸标记,随机分为两组。给药组每只灌胃人参水煎液0.25ml/10g,对照组每只灌胃等容量的生理盐水,给药后30min分别放入玻璃缸内游泳,立即计时并注意观察,当小鼠头部沉入水中10s不能浮出水面者即为体力耗竭,停止计时,记录小鼠游泳时间。与对照组比较并进行统计学处理。分别算出两组的平均游泳时间实验结果:
思考题:
1.为什么人参可以抗疲劳?
2.影响小鼠游泳时间的因素有哪些?