实验4.3 叶绿体中色素的提取和分离

一、学习目标

1、知道实验原理（叶绿体色素的溶解性；纸层析法的原理）

2、学会色素提取和分离的方法和步骤

3、记住色素分离的结果：包括从上到下色素带的顺序、颜色和宽度。

二、实验内容

1、实验原理：

色素提取原理：叶绿体中的各种____   __属有机物，能够溶解在           中，所以用          提取叶绿体中的色素。

色素分离原理：叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同；

→溶解度高、分子量小的色素随层析液在滤纸上扩散得____，

溶解度低、分子量大的色素随层析液在滤纸上扩散得_____。

→用________就可以将叶绿体中的不同色素分离。

2、实验步骤

1）写出下列①-⑤步骤的名称：

 

2）各步骤操作中注意事项

（1）提取叶绿体色素

①取材时尽可能选择新鲜的、绿色较____的叶片，使滤液中含较多的色素。

②为使研磨充分，可将叶片去叶脉后先_____成细、碎片，研磨时加少量__________。

③无水乙醇应       加入。

④为了                      ，可加些__________进行保护

（其原理是当细胞破裂时，细胞液内有机酸会破坏叶绿素，碳酸钙能中和有机酸，从而保护叶绿素）。

（2）分离叶绿体色素

①制备滤纸条：滤纸条的一端要剪去两个角，主要考虑边缘毛细现象，保证层析起点一致，扩散均匀，分离时色素带平行。

②画滤液细线：画滤液细线时要______  _，一次干燥后再画第二次，以增加色素含量。（可用口吹气或轻轻晃动滤纸条加速干燥。）

③层析：ⅰ向大试管中加层析液时，不要污染试管壁，层析液量不要太多。

ⅱ滤纸条放入大试管前，先调整长度——保证层析时，滤纸顶端浸入层析液但层析液不能没及滤液细线，以防止                   。

3、观察记录色素条带

（1）顺序、名称以及相应的颜色：

经纸层析法分离，滤纸条上出现4条色素带，按从上往下的顺序：

四种色素的名称、颜色依次是            （        ）

            （        ）

            （        ）

            （        ）

扩散速度最快的是              ；

色素带最宽的是_______   _（色素带的宽度是由于各种色素含量不同造成的，含量越多，色素带越宽。）

4、叶绿素提取液荧光现象观察：

反射光（背对光源）——红色；透射光（正对光源）——绿色。

四、学习反馈

基础练习：练习册P28实验报告

记忆项目：

1、色素的提取 

无水酒精作用：               （原理：叶绿体中的色素不溶于水、但可溶于有机溶剂）石英砂作用：             ；碳酸钙作用__________      ；

2、色素的分离

分离的方法：__________         ；层析液：____________  

（原理：叶绿体中的色素随层析液在滤纸上             不同。）

3、在分离色素时，在滤纸条上划滤液细线，为什么越细、越齐，效果越好？

                                                             

4、为什么不能让层析液没及滤液细线？

                                                             

5、滤纸条上出现四条色素带的顺序、名称、颜色。

第二篇：叶绿体中色素的提取和分离实验改进

附件：

参评作者信息采集表

注：请每位参评作者都要填写。

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叶绿体中色素的提取和分离实验改进

从化中学 刘勇环

本实验的地位和作用

光合作用是高中生物学习的重点和难点内容。叶绿体是光合作用的场所，做好叶绿体中色素的提取和分离实验，有助于学生理解光合作用色素的种类和作用、加强学生对光合作用的理解和掌握。

改进的目的

（1）在提取叶绿体中色素时要用到丙酮，进行色素分离时要用层析液。丙酮和层析液有很强的挥发性，学生在进行实验的过程中难免会吸入一定的挥发性物质，对身体健康产生影响。所以，本实验要求在通风的条件下进行，实验结束后一定要用肥皂将手洗净。因此，希望能通过改进实验，降低有毒物质的挥发，保护学生的身体健康。（2）滤纸条的制备，如果要清楚的看到实验效果，滤纸条的选择是非常重要的。（3）画滤液细线，可以选取简单的工具代替。

改进一：色素的提取

操作步骤：课本中是将色素研磨液迅速倒入玻璃漏斗（漏斗基部放一块单层尼龙布）中进行过滤。由于很多同学研磨的不够充分，所以色素带不明显。所以在实际中可以剪取大纱布把研磨液及叶渣等用力榨取。

优点：得到的滤液不但比较多而且色素含量高，实验结果明显。

改进二：滤纸条的制备

操作步骤：将干燥的定性滤纸剪成长与宽略小于试管长与宽的滤纸条，将滤纸条的一端剪去两角，这两个角的剪取要大小一致，如果剪取大小不一致的情况下，色素在滤纸上的扩散会导致不均匀，但很多学生不理解原因，所以在教学中可以引导同学剪取滤纸条大小一致和大小不一致的两滤纸条同时放入烧杯下端，并在距这一端1CM处用铅笔画一条细的横线。

优点：学生能够将两组实验进行对比，学生自己能够找出滤纸条剪取不均导致的现象及原因。

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改进三：滤纸条种类

操作步骤：课本将干燥的定性滤纸剪成长与宽略小于试管长与宽的滤纸条，将滤纸条的一端剪去两角，放入试管下端，并在距这一端1CM处用铅笔画一条细的横线。很多同学剪取的不够直，扩散的不均匀，效果不好，我们可以将全班分成两大组，一半人用滤纸条，一半人用圆形滤纸滴在圆点上，然后将层析液滴在圆点上，色素就能够沿着层析液的扩散而扩散，实验结束后不同组的同学再进行对比。 优点：采用这样的分组可以让学生在小范围内有一个很好的参照。

改进四：画滤液细线工具

操作步骤：课本是要求用毛细吸管取少量滤液，沿铅笔线均匀地画出一条细而直的滤液细线。待干燥后，再画两三次。每次实验课前需要教师事先制备毛细吸管。 我们可以用盖玻片代替毛细吸管，用盖玻片均匀蘸取色素滤液，在滤纸条画取细线，滤液细线要求细、直、均匀。

优点：实验设备简单，实验要求低，学生容易掌握。

改进五：简易色素分离装置

操作步骤：

1、将画好滤液线的滤纸条插入胶塞的切口处。

2、将3 mL层析液倒入大烧杯瓶中，将滤纸条跟大烧杯的高度进行对照，将滤纸条折起挂在大烧杯边沿，用培养皿盖住。

3、色素分离后，及时将滤纸条取出，待滤纸条干燥后进行观察。

优点：操作简单，大烧杯可以放在讲台，多个同学可以共用一个烧杯，要求几个 同学同时把滤纸条放到大烧杯中，减少层析液的挥发，减少有害气体的吸入。实验结束后提醒学生整理实验桌、清洗自己的手、完成实验报告。

以上是我个人在教学过程中遇到的问题及其解决方法，仅供参考。

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