思考题
1、蛋白质沉淀有哪几种方法?哪些是可逆的沉淀反应?
2、 乙醇引起的变性与沉淀实验时,其中一管加入pH4.7 醋酸-醋酸
钠的缓冲溶液有何目的?
3、 通过预习请你简单设计提取核酸过程中可用什么方法去除蛋白
质,达到提纯核酸的目的,为什么?
1. 答: <1> 蛋白质沉淀的方法:盐析法;有机溶剂沉淀法;等
电点沉淀法;低温下用乙醇(或丙酮);重金属盐沉淀法;生物碱试
剂以及某些酸类沉淀法
<2> 低温下用乙醇(或丙酮);盐析作用
2. 答:利用缓冲溶液来维持溶液原来的PH
3. 答:酚氯仿抽提出去蛋白质,再用乙醇沉淀得到核酸。因为酚可
以使蛋白质沉淀,离心后位于水相和有机相之间,而核酸溶解于水相。再加入NaAc和无水乙醇在低温下可以夺取核酸分子周围的水分子,
使核酸沉淀。? 因为在水溶液中的蛋白质分子由于表面生成水化层
和双电层而成为稳定的亲水胶体颗粒,在一定的理化因素影响下,蛋
白质颗粒可因失去电荷和脱水而沉淀。
第二篇:蛋白质两性性质和等电点测定
用蛋白质的NaOH溶液观察两性反应,溶液颜色变化迅速明显。
用蛋白质的醋酸钠溶液测定等电点,醋酸钠溶液为缓冲液,维持pH稳定。
溴甲酚绿有酸式,碱式。但在pH5.4时就显蓝色,为碱式,但溶液不是碱性。