蔬菜中维生素C的测定设计实验
设计者： 张茹佳（0113号）
祝 玲（0112号）
邓 楠（0130号）
李 厦（0132号）
组 长： 张茹佳
班 级： 09化学一班
实验日期：20xx年4月20日
蔬菜中维生素C的测定设计实验
一：教学目标
（1）：通过测定黄瓜中Vc的含量来了解果蔬中Vc含量情况；
（2）：学习和掌握测定Vc的原理和方法，来掌握正确的设计实
验方法和能力。
二：教学重难点
重点：维生素C测定中的滴定方法；
难点：维生素C的含量测定原理及方法；
三：教学用具
药品：醋酸缓冲溶液 、10%KI溶液 、淀粉、碘酸钾、硫酸、 仪器：酸式滴定管 、烧杯 、离心机、榨汁机、胶头滴管 四：实验原理
测量果蔬及其制品中Vc含量的方法有很多种，各有特点，本实验采取间接碘量法来对红尖辣椒中VC的含量进行测定，维生素C的结构中有—C = C—基团，又具有烯醇式结构,还原性强，水溶液中可解离成氧化型抗坏血酸。因此具有还原性，又称为还原性抗坏血酸。
维生素C能还原KIO3中的碘，还原性抗坏血酸还原碘后，本身被氧化成脱氢抗坏血酸，在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准KIO3的量与样品中所含抗坏血酸量成正比（1:3）。
当KIO3刚刚加入时，IO3－离子会与溶液中的I－离子迅速发生氧化还原反应生成I2
IO3－+ 5I－+6H＋=3I2+3H2O
然后生成的I2会与VC发生反应氧化还原反应，反应方程式如下： I2 + C6H8O6 = 2HI + C6H6O6
生成的I2被迅速消耗，当溶液中的Vc全部反应完后，会生成多余的I2
所以可以用淀粉作指示剂，通过淀粉作指示剂可迅速判断终点，当有多余碘存在时，淀粉呈蓝色，即可指示终点。
由于维生素C具在较强的还原性，在空气中极易被氧化成而成黄色，尤其在碱性条件下更甚，所以在搅拌和测定时加入HAC缓冲溶液，以减少维生素的副反应。
并且应当注意的是应该在终点附近加入淀粉，因为淀粉是大分子物质，会吸附溶液中的分子和离子，过早加入淀粉生成的物质会吸附在淀粉上，影响反应终点的判断，所以应该在终点附近加入淀粉。
而且在测定时还要在溶液中加入过量的KI溶液。这有两个原因：一是过量的KI会确保KIO3中的I(+5价)会完全参加反应，第二个原因是I2在一般水溶液中溶解度很小，会影响终点的灵敏度，但是在KI溶液中I2中的溶解度较大，这样当反应刚刚过量时，生成的I2会迅速与淀粉发生显色反应，提高终点的灵敏度，使反应的误差相对较小。所以KI溶液只要保证过量就可以，不必要进行精确配制。
记下终点消耗的KIO3体积，通过KIO3的消耗量来计算出红尖辣椒中的VC含量。由以上两步反应方程可知，消耗的VC的量是KIO3量的3倍。所以根据KIO3溶液的用量可以算出溶液中Vc的含量进而求出样品中VC的含量。
测定反应关系式如下：
n(VC)＝3 ×V(KIO3) ×C(KIO3)
即：M×参考值（mg/100g）÷M(VC) =3 ×V(KIO3) ×C(KIO3) 其中:M为样品质量M的范围，即样品称量范围，黄瓜的参考值大约是176mg/100g C(KIO3)为大致配制，一般配制0.002mol/L ,0.005mol/L或 0.01mol/L， 本实
验大概配制的浓度为0.005mol/L。
。
五：教学过程
一、溶液的配制与准备
用减量法称取为0.25g≤M≤0.27g，将C(KIO3)配制成约0.005 mol/L的KIO3溶液，记下质量，用容量瓶配制成250毫升溶液。
HAC缓冲溶液和KI溶液可由标淮溶液大概配制。
二、样品准备
取黄瓜用自来水洗净后，再用蒸馏水冲洗2遍，待基本沥去水分，去皮备用。
取上述黄瓜约20g移入搅拌机内，搅拌5分钟，搅拌完后取出溶液，注意要在搅拌时要用专用的容器来承装，并且在取出时要对容器进行多次冲洗，取出后倒入锥形瓶并立即加入10~20ml的HAC缓冲溶液，摇匀。注意溶液最后的体积要尽量小，最好能在30ml左右。
最后用漏斗对溶液进行过滤，在滤纸上过滤得提取液。注意动作要迅速以减少VC被氧化。
三、测定VC的含量
取滤液加10ml-15ml10%KI溶液和8mL 2g/L的硫酸溶液，并加入蒸馏水，使全部溶液达40～60ml，摇匀。
以约0.005mol/L的碘酸钾溶液滴定，用1%淀粉试剂作指示剂，至溶液呈蓝色且不褪色为终点，记下终点时消耗的碘酸钾溶液读数。
【实验装置图】：
【实验现象】：
滴入淀粉时，溶液变为蓝色。
【实验结论】: 黄瓜中VC含量较平均值较低。
评分标准及作业评价
实验操作占60% ；实验报告占40%
实验操作：60分
1. 清洗仪器 3分
2. 仪器安装顺序3分；
3. 润洗滴定管4分；
4. 检查仪器、药品。3分
5. 液体药品的取用 3分；
6. 滴定时量取液体药品的方法7分；
7. 滴定方法正确7分
8. 实验数据的记录10分；
9. 实验现象和实验结论准确、规范10分；
10. 实验态度和习惯（整理仪器、废品的存放等）10分。 实验报告：40分
1.实验名称 2分
2.实验目的 2分
3.实验仪器 3分
4.实验原理 5分
5.实验报告书写规范 7分
6.实验记录 5分
7.实验数据处理 7分
8.实验结果与分析 9分
总成绩：实验操作+实验报告
作业反馈：
作业等级分为优、良加、良、良减。同学们的实验报告都写的很认真，步骤完整，但在细节方面还存在问题，如有的同学不花实验装置图，有的同学不记录实验现象和数据，或者只有现象没有数据。大多数同学之计算了结果，没有对结果进行分析，即得出实验结论。
第二篇：水果、蔬菜中维生素C含量的测定——紫外分光光度快速测定方法探讨
第２３卷，第４期
２ｏｏ光谱实验室Ｃｈ油ｅｓｅＶ０１．２３，Ｎｏ．４６年７月Ｊｏ吖ｎｎ｝ｏｆｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐ，Ｌａ６仃ｒ砒ｏｒ，Ｊｕｌｙ，２０Ｏ６
水果、蔬菜中维生素Ｃ含量的测定
——紫外分光光度快速测定方法探讨
郑京平①
（福建省测试技术研究所福州市北环中路６１号３５０００３）
摘要本文利用维生素Ｃ具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性。建立了紫外分光光度快速测
定水果、蔬菜维生素ｃ含量的新方法。维生索ｃ浓度在１．ｏｏ一１２．ｏｐｇ／ｍＬ范围内与吸收值呈良好的线性关系；检出限为ｏ．０１他ｇ／ｍＬ；力口标回收率在９７．９％一９９．ｏ％之间。该法操作简单，结果准确，应用于维生素Ｃ含量的测定．结果令人满意。
关键词维生素Ｃ，紫外分光光度法．水果．蔬菜。
中图分类号：０６５７．３２文献标识码：Ａ文章编号：１００４—８１３８（２００６）０４一０７３１一０５
１前言
维生素ｃ又称抗坏血酸，是所有具有抗坏血酸生物活性的化合物的统称。它在人体内不能合成，必须依靠膳食供给。维生素ｃ不仅具有广泛的生理功能，能防止坏血病，关节肿，促进外伤愈合，使机体增强抵抗能力。而且在食品工业上常用作抗氧化剂、酸味剂及强化剂。因此，测定食品中维生素ｃ的含量以评价食品品质及食品加工过程中维生素ｃ的变化情况具有重要的意义。
维生素ｃ纯品为白色无臭结晶，熔点在１９０一１９２ｒｃ，易溶于水，微溶于丙酮，在乙醇中溶解度更低，不溶于油剂。结晶抗坏血酸在空气中稳定，但它在水溶液中易被空气和其他氧化剂氧化，生成脱氢抗坏血酸；在碱性条件下易分解，见光加速分解；在弱酸条件中较稳定。
维生素Ｃ含量的测定方法很多。一般方法有２．６一二氯靛酚滴定法；２．４一二硝基苯肼比色法；荧光分光光度法；电化学法和高效液相色谱法。
维生素ｃ广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜中含量较多。水果、蔬菜维生素ｃ含量的测定依国标ＧＢ／Ｔ６１９５—１９８６是采用２．６一二氯靛酚滴定法［１］。根据维生素Ｃ的氧化还原性质，从样品溶液由蓝色转变为粉红色来辨别其终点的到达。但是多数水果、蔬菜样品其提取液都具有一定的色泽，有的即使用硅藻土电很难脱色，因此，滴定终点不易辨认。而ＧＢ／Ｔ６１９５—１９８６附录Ａ二甲苯一二氯靛酚比色法虽然适用于测定深色样品还原型抗坏血酸，但由于萃取液二甲苯为有机溶剂，有很强的毒性，既不利于操作人员的健康，也不利于环境保护，故不推荐此测试方法。紫外分光光度快速测定法【２１是根据维生素Ｃ具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，于波长２４３ｎｍ处测定样品溶液与碱处理样品两者吸光度之差，通过查校准曲线，即可计算样品中维生素Ｃ的含量。此法操作简单、快速准确、重现性好，结果令人满意。特别适合含深色样品的测定。
①联系人．电话：（０５９１）８７８１４３７４（办）；（０５９１）８７７３２３８９（宅）；Ｅ—ｍａｉｌ：ｚｚｎ９９１０５１３＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ
作者简介：郑京平（１９６ｌ～）．女．福州市人．工程师．主要从事化学分析工作。收稿日期：２００６一０３一０７；接受日期：２００６一０３—２９
万方数据
光谱实验室第２３卷
２实验部分
ＤＶ２．１仪器与试剂６５０单光束扫描型紫外分光光度计（美国贝克曼公司）；Ａ乒一２４０电子天平（瑞士梅特勒公司）；高速组织捣碎机；８００型离心沉淀器（上海手术器械厂）。
浸提剂：２．ｏ％（Ⅳ∥）偏磷酸溶液：ｏ．５ｍｏｌ／Ｉ。氢氧化钠溶液；１００弘ｇ／ｍＬ抗坏血酸标准溶液。以上试剂均为分析纯，实验用水为蒸馏水。
２．２实验方法
２．２．１校准曲线的绘制
称取抗坏血酸１０ｍｇ（准确至ｏ．１ｍｇ），用２％偏磷酸溶解，小心转移到１００ｍＩ。容量瓶中，并加偏磷酸稀释到刻度，混匀，此抗坏血酸溶液的浓度为１００弘ｇ／ｍＩ。。吸取ｏ．ｏｏ、ｏ．１０、ｏ．２０、ｏ．４０、ｏ．６０、ｏ．８０、１．００、１．２０ｍＬ抗坏血酸标准使用溶液，置于１０ｍＬ比色管中；用２％偏磷酸定容，摇匀。此标准系列抗坏血酸的浓度分别为ｏ．００、１．００、２．００、４．００、６．００、８．００、１０．ｏ、１２．ｏｐｇ／ｍＩ。。以蒸馏水为参比，在波长２４３ｎｍ处，用１ｃｍ石英皿测定标准系列抗坏血酸溶液的吸光度。抗坏血酸吸光度为Ａ，试剂空白吸光度为Ａｏ，计算吸光度差△Ａ—Ａ一４。的值。以吸光度差值△Ａ对抗坏血酸浓度Ｃ绘制校准曲线。
２．２．２样品的测定
样液的制备；将水果、蔬菜样品洗净、擦干，称取具有代表性样品的可食部分１００９，放人组织捣碎机中，加入１００ｍＬ浸提剂，迅速捣成匀浆。称取１０一５０９浆状样品，用浸提剂将样品移入１００ｍＬ容量瓶中，并稀释至刻度，摇匀。若提取液澄清透明，则可直接取样测定，若有浑浊现象，可通过离心来消除。
样液的测定：准确移取澄清透明的ｏ．１一ｏ．５ｍＬ提取液，置于１０ｍＬ的比色管中，用２％偏磷酸稀释至刻度后摇匀。以蒸馏水为参比，在波长２４３ｎｍ处，用１ｃｍ石英皿测定其吸光度。
待测碱处理样液的测定：分别吸取ｏ．１一ｏ．５ｍＩ。澄清透明提取液，加入６滴ｏ．５ｍｏｌ／Ｉ。氢氧化钠溶液，置于１０ｍＩ。比色管中混匀，在室温放置４０ｍｉｎ后＇力口入２％偏磷酸稀释至刻度后摇匀。以蒸馏水为参比，在波长２４３ｎｍ处测定其吸光度。
２．２．３结果计算
由待测样品与待测碱处理样品的吸光值之差查校准曲线，即可计算出样品中维生素ｃ的含量，也可直接以待测碱处理液为参比，测得待测液的吸光值，通过查校准曲线，计算出样品的维生素Ｃ的含量。
维生素ｃ的含量，ｍｇ／１００９一篇簧等；
其中：肌——样品重量，ｇ；２００——稀释倍数；Ｃ——从校准曲线上查得抗坏血酸的含量，ｐｇ／ｍＬ；
ｙ——测试时吸取提取液体积，ｍＩ。。
３结果与讨论
测定波长的选择３．１反应条件选择３．１．１
维生素ｃ是烯醇化合物，具有一Ｃ—ｃ一基，在可见区无吸收，在紫外区有吸收，按实验方法，分别对不同浓度的维生素Ｃ与试剂空白溶液在２００—４００ｎｍ波长范围内进行扫描，结果见图１。由紫外吸收光谱图表明，最大吸收峰在２４３ｎｍ。因此，选２４３ｎｍ作为测量波长。
万方数据
第４期郑京平：水果、蔬菜中维生素ｃ含量的测定——紫外分光光度快速测定方法探讨７３３３．１．２溶剂的选择ｏ?８０００
由于维生素ｃ极不稳定，在样品前
常重要的。可采用添加偏磷酸、草酸的方蚤ｏ．４４００５处理过程中，防止抗坏血酸的氧化是非篆
ｏ．０８００
吸光度Ａ
３．１．４ｏ．４ｌｄ２（）．３８６３ｏ．３６７０Ｎａ（）Ｈ试剂用量选择．
水果、蔬菜加碱量与提取液的取样量有关，当提取液取样量≤ｏ．５ｍＩ。时，加入６滴（约ｏ．３ｍＬ）ｏ．５ｍｏｌ／Ｉ。Ｎａ（）Ｈ溶液，溶液呈碱性（ｐＨ值＞１０），利用维生素在碱性介质中不稳定特性，达到破坏维生素ｃ的目的。若碱液加入量过大，会影响最终测定液的酸碱度，故选加人６滴ｏ．５ｍｏｌ／Ｉ。ＮａＯＨ溶液。若取样体积大于ｏ．５ｍＩ。时，应适当多加碱液至溶液ｐＨ值＞１０，此时在室温静置的时间也必须延长。
３．２方法的相关性和检测范围
在优化的实验条件下，校准曲线按本法测定，数据见表２，最大吸光度值最好不要超过ｏ．８Ａ，否则浓度过高容易造成曲线弯曲。以吸光度差值△Ａ对维生素Ｃ含量作图，得回归方程△Ａ—ｏ．０５４９６ｃ＋ｏ．００６５１，相关系数７一ｏ．９９９９，结果表明，维生素Ｃ在１．ｏＯ一１２．ｏ肛ｇ／ｍＩ。范围内吸光度△Ａ与浓度ｃ之间呈良好的线性关系，服从比耳定律，结果见图２。
表２校准系列测定结果
３．３方法检出限
连续测定空白吸光值１０次，吸光表３空白１０次平行测定结果
度值见表３，在置信度约９０％时，取置
信系数Ｋ一３，按上述线性方程，其校
准曲线斜率５一ｏ．０５４９６，则相对应的万方数据
光谱实验室第２３卷
分析物浓度作为方程的检出限Ｄ?Ｌ—ＫＳＤ／Ｓ—ｏ．０１４（ｐｇ／ｍＩ。）。
３．４方法准确度ｊｏ．７
为确认分析结果的可靠性，了解试样中有藕“３
无干扰物质存在，应用本法对样品进行加标回
率在９７．９％一９９．ｏ％之间，平均回收率为‘
９８．３％，认为共存物质构成干扰已消除。
表４加标回收率测定结果粢。。２６ｌＯ１４收试验，结果见表４，由表４可知，本方法回收。维生素Ｃ浓度／ｕｇ?ｍ∥图２维生素Ｃ的校准曲线
３．５方法精密度
取２种维生素Ｃ表５平行样品测定结果（ｎ＝５）
含量不同的样品，每
种样品平行测定５次，
结果见表５，从测定结
果可以看出，平行样测定有较好的重现性。
３．６不同方法对比试验．
紫外分光光度法与２．６一二氯靛酚滴定法采用相同的前处理溶液，只是测试方法不同，从表６可以看出，不同方法测得维生素Ｃ的相对平均偏差均＜５．ｏ％，表明２种方法结果相吻合，且紫外分光光度法不受颜色干扰和其他还原性物质的影响，更适合于含深色泽样品的测定。
表６不同方法对几种水果、蔬菜的测定结果
３．７干扰物质的消除
由于水果、蔬菜中成分复杂，有些成分在紫外区２４３ｎｍ处也会产生吸收，利用维生素Ｃ在碱性溶液中具有不稳定性，可在样品中先加入碱液，调节溶液的ｐＨ值至碱性，破坏样品中维生素Ｃ，用此液作为空白，来校正干扰物质所产生的吸光值，此法具有较强的专一性。
３．８酸度的影响
在波长为２４３ｎｍ，石英皿为１ｃｍ时，１０ｍＩ，２％的偏磷酸的吸光值与６滴ｏ．５ｍｏｌ／Ｉ，ＮａＯＨ溶液和２％偏磷酸配制成１ｏｍＩ．溶液的吸光值，６次测定，结果吸光度恒定，说明少量的Ｎａ０Ｈ溶液而引起溶液微弱酸碱度变化，对吸光值不影响。
万方数据
第４期郑京平：水果、蔬菜中维生素ｃ含量的测定——紫外分光光度快速测定方法探讨７３５４分析过程中的注意点
（１）标准抗坏血酸溶液必须现用现配。
（２）要求每批测定样品都要有校准曲线。
（３）在处理各种样品时，如遇到泡沫产生，可以加入数滴辛醇消除。
（４）若样品浑浊，则可用离一亡Ｉ、机分离。用转速３０００ｒ／ｍｉｎ，时间约为２０一３０ｍｉｎ，至样液澄清、透明，取上清液分析。
（５）一般分析纯抗坏血酸纯度为９９．５％以上，可不标定。如试剂发黄，则弃去不用。或按ＧＢ／Ｔ６１９５—１９８６附录Ｂ方法标定后再用。
５结论
本文利用维生素Ｃ具有对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，建立了紫外分光光度快速测定水果、蔬菜维生素ｃ的新方法。实验结果表明，维生素ｃ浓度在１．ｏｏ一１２．ｏｐｇ／ｍＩ。范围内与紫外吸收值呈良好的线性关系，利用此方法测定样品中维生素ｃ含量最低检出限为ｏ．０１４弘ｇ／ｍＩ。，回收率在９７．９％一９９．ｏ％之间，相对标准偏差ＲｓＤ＜５％，表明该方法简单易行，结果准确、灵敏度高，检出限低，可快速测定水果、蔬菜中维生素Ｃ，值得推广应用。
参考文献
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ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＶｉｔａｍｉｎＣｉｎＦｒｕｉｔｓａｎｄＶｅｇｅｔａｂｌｅｓ
ＤｉｓｃｕｓｓｉｏｎｏｎＵＶＳｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ
ＺＨＥＮＧＪｉｎｇ—Ｐｉｎｇ
ＬＴｈｌｌｆ、ｔ’Ⅱ（“，¨ｔｙｏｊＴ｛?髓ｉ｝ｌｇＴｔ．ｔｈｎｏＣｆＪｇｙｔＪｆＦｕｊｉｍｔ，ＦＭｚｈｏｎ３５０Ｑ０３，Ｐ．Ｒ．Ｃｈｉｎ曲
ＡｂｓｔｒａｃｔＡｃｃｏｒｄｉｎｇｌｏｔｈｅｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｔｈａｔＶｉｔａｍｉｎＣｃａｎａｂｓｏｒｂｕｌｔｒａＶｉｏｌｅｔｒａｄｉａｔｉｏｎａｎｄｉｓｖｏｌａｔｉｌｅｔｏａｌｋａｌｉ，ｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｃｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｓａｎｅｗａｎｄｆａｓｔｍｅｔｈｏｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｖｉｔａｍｉｎＣｉｎｆｒｕｉｔｓａｎｄＶｅｇｅｔａｂｌｅｓｂｙｕｌｔｒａＶｉ（）ｌｅｔｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｎｌｅｔｒｙ．Ｗｈｅｎｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｉｓｂｅｔｗｅｅｎ１．００弘ｇ／ｍＩ。ａｎｄ１２．０ｐｇ／ｍＩ．，ＶｉｔａｍｉｎＣｈａｓｆａｖｏｒａｂｋｌｉｎｅａｒｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｗｉｔｈｔｈｅｖａｌｕｅｏｆａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ．ＴｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｌｉｍｉｔｉｓＯ．０１４『』ｇ／ｎ１Ｉ。，ａｎｄｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｙｒａｔｉｏｓａｒｅｂｅｔｗｅｅｎ９７．９％ａｎｄ９９．０％．Ｔｈｉｓｍｅｔｈｏｄｉｓｅａｓｙｔｏｏｐｅｒａｔｅｗｉｔｈｈｉｇｌｌｐｒｃｃｉｓｉｏｎ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｉｓｓａｔｉｓｆａｃｔｏｒｙｗｈｅｎｉｔｗａｓｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｒｍｉｎｅｖｉｔａｍｉｎＣ．
ＫｅｙｗｏｒｄｓＶｉｔａｍｉｌｌＣ，ＵＶ—Ｓｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｍｅｔｒｙ，Ｆｒｕｉｔ，Ｖｅｇｅｔａｂｌｅ．
万 方数据
水果、蔬菜中维生素C含量的测定——紫外分光光度快速测定
方法探讨
作者：
作者单位：
刊名：
英文刊名：
年，卷(期)：
被引用次数：郑京平， ZHENG Jing-Ping福建省测试技术研究所,350003光谱实验室CHINESE JOURNAL OF SPECTROSCOPY LABORATORY2006,23(4)22次
参考文献(2条)
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