白细胞分类计数标准操作程序

一.目的：规范白细胞手工分类标准操作

二.适用范围：适用于镜下白细胞分类

三.支持性文件：全国临床检验操作规程第三版

四.原理：血涂片瑞氏染色分类法

五.仪器：OLYMPUS显微镜

六.试剂：瑞氏—姬姆萨复合染色液

I液：取瑞氏染粉1g、姬姆萨染粉0.3g，置洁净研钵中，加少量甲醇(分析纯)，研磨片刻，吸出上层染液。再加少量甲醇，继续研磨，再吸出上液。如此连续几次，共用甲醇500ml。收集于棕色玻璃瓶中，每天早、晚各振摇3min，共5天，以后存放一周即能使用。

Ⅱ液：pH6．4—6．8磷酸盐缓冲液，磷酸二氢钾(无水) 6．64g，磷酸氢二钠(无水) 2．56g， 加少量蒸馏水溶解，用磷酸盐调整pH，加水至1000ml。

七.样本要求：静脉采血使用EDTA-K2抗凝。毛细血管采血应擦去第一滴血，以免混入组织液影响结果。

八.操作步骤：

1．采血后推制厚薄适宜的血膜片，血膜应呈舌状，头、体、尾清晰可分。

2．推好的血膜在空气中晃动，以促使快干。天气寒冷或潮湿时，应于37C温箱中保温促干，以免细胞变形缩小。

3．染 色

(1)瑞氏—姬姆萨染色法：平置玻片于染色架上，滴加染液3～5滴，使其迅速盖满血膜，约lmin后，滴加缓冲液5～10滴，轻轻摇动玻片或对准血片吹气，与染液充分混和，5～lOmin后用水冲去染液，待干。

4、先在低倍镜下浏览全片，了解染色的好坏和细胞分布情况，观测有无异常细胞。

5．选择涂片的体尾交界处染色良好的区域，在油镜下计数100个白细胞，按其形态特征进行分类计数，求出各类细胞所占比值 (百分率)。

6.结果输入上海新和中文操作系统打印报告。

九.参考范围： 见表l—l—1。

表1—1—1 白细胞分类计数参考值

细胞类别 成人

中性粒细胞

杆状核 0.01-0.05(1%-5%)

分叶核 0.50-0.70(50％～70％)

嗜酸性粒细胞 0.005-0.05(0．5％～5％)

嗜碱性粒细胞 0-0.01 (0％～1％)

淋巴细胞 0.20-0.40(20%～40%)

单核细胞 0.03-0.10 (3％～10％)

十.注意事项：

1．要避免重复计数，玻片应由血膜边缘向中央依次上下呈曲线移动。

2. 白细胞总数超过20X109／L,应分类计数200个细胞。白细胞数明显减少的血片，可检查多张血片。

3．白细胞形态变化较大，应经常由高年资检验人员进行核实，以减少误差。

4．禁止在计数池内或涂片下用高倍镜作白细胞分类。

第二篇：白细胞计数5

XT-1800i白细胞检验

1. 实验原理

本实验采用半导体激光器，以流式细胞术原理分析白细胞。当全血进入白细胞通道后，通过流式细胞技术半导体激光的照射形成白细胞散射图，从而计算出白细胞的数量。

2. 标本采集：

2.1 标本种类：新抽取的凝血或手指末梢血

2.2 标本要求：

2.2.1 抗凝剂采用EDTA K2抗凝

2.2.2 用手指末梢血作白细胞检验时，最少样品量为200ul，如手指有冻疮，则主张采用耳垂血。

3. 标本储存：2小时内完成检验，室温放置下不超过8小时，4-8℃保存不超过48小时。

4. 标本运输：室温运输

5. 标本拒收标准：污染，凝固标本不能作测定

6. 试剂

6.1 试剂名称:sysmex血细胞分析试剂

6.2 生产厂家：希森美康株式会社

6.3 试剂组成

试剂1：嗜碱细胞溶血素

试剂2：嗜碱细胞溶血素

试剂3：白细胞分类染液

试剂4：稀释液

6.4 试剂储存条件及有效期：储存温度为5-30℃，有效期为一年，开封后的使用期限为60天。

7. 仪器设备

7.1 仪器名称：sysmex血细胞分析仪

7.2 仪器厂家：日本sysmex株式会社

7.3 仪器型号：XT-1800i

8. 操作步骤

先打开血液分析系统软件,再打开仪器电源,自检完成后即可进行检测。

8.1 手工模式：

8.1.1上下颠倒试管将内容物充分混匀。

8.1.2 轻轻取下盖子，防止血液溅出。

8.1.3 将试管正确放入手工吸引管，吸引管浸入样品。

8.1.4 按start键，样品开始吸取。

8.1.5 当ready led 暗（并发出两声短音）移开试管。

8.1.6 当ready led再次亮起时，准备下一个样品，重复上述步骤。

8.2 进样器模式：

8.2.1 将试管入试管架，将试管架放在进样器的右侧槽中，最多能入5个试管架。

8.2.2打开XT—1800系统点击进样器，输入当前管架号、管号，点击确定。

9. 结果的分析与判断：在仪器显示屏上将显示结果

10. 质量控制

10.1检测前做室内质控,质控编号定为1001号，做出来的质控品结果不能超出质控靶值的上下限范围，否则实验无效。

10．2计算方法

当结果出现差异时需校正

11. 参考值范围：白细胞（WBC）检验：参考值：成年人4～5.5×109/L，婴儿（两周岁以下）11～12×109/L，新生儿15～20×109/L。

12. 临床意义：细菌性感染、尿毒症、严重烧伤、传染性单核细胞增多症、白血病和应激状态（急性出血和大手术）等增多（妊娠后期、月经期、饭后、剧烈运动后可有生理性增加）。病毒感染、伤害及副伤寒、疟疾、再生障碍性贫血、极严重感染、放射性辐照、肿瘤化疗后和非白血性白血病等减少。

13. 当检验系统（仪器）不能工作时，所采取的补救措施：当检验系统（仪器）不能工作时，可联系厂家，进行紧急修理，如一时不能修好，如别的实验室有同类仪器，可到别的仪器先检验，如别的实验室无同类仪器，申请厂家送一台正常的代替。

14. 参考文献

14.1全国临床检验操作规程第三版

14.2 SySmex XT-1800i中文操作说明书