封闭抗体检测
封闭抗体（Blocking antibodies,BA）是人类白细胞抗原（HLA），滋养层及淋巴细胞交叉反应抗原（TLX） 等刺激母体免疫系统，所产生的一类IgG抗体。研究认为，孕妇血中BA可以表现以下作用：（1）BA中和同种异体抗原，而不使胎儿受到排斥：（2）抗体直接作用于具有免疫功能的细胞如：CTL细胞，NK细胞等：（3）直接结合到靶细胞的抗原上，从而降低他们对对受体细胞参与的免疫反应的敏感性。以往研究认为，反复自然流产的发生与母体缺乏BA有关，流产次数越多的患者，其体内BA缺乏的可能性越大。BA的产生不足，母体对胎儿产生的强烈排斥现象，发生于孕早期可出现反复自然流产，孕晚期则可出现妊娠高血压疾病，胎儿宫内生长受限，甚至出现胎死宫内。因此对反复流产患者进行BA检测是非常有必要的。
中文名称 英文名称 检测方法
封闭抗体 Blocking antibodies 酶联免疫（EIA）
参考范围 ：该项目检测结果对不同人群意义不一样，详情请咨询医生。
样本 血清/血浆 0.4ml 室温：8小时 冷藏：7天 冷冻：1月
标本要求：标本应无严重溶血，脂血，黄疸，无微生物污染；不满足上述要求的标本拒收，标本的采集应使用清洁，无菌的一次性的干躁管。
第二篇：封闭抗体检测对习惯性流产的检测意义
封闭抗体
【目录】
1 、封闭抗体对反复性自然流产 (RSA) 2 、封闭抗体主要检测方法 3 、收费标准 / 采购价格 / 赢利分析 4 、封闭抗体产品说明
【参考文献】
的检测意义
第一部分 封闭抗体对反复性自然流产 (RSA) 的检测意
义
现代生殖免疫学认为，妊娠是成功的半同种移植过程，在母体免疫功能正常时，既保护母体不受外来微生物的侵犯，又对宫内胚胎移植物不发生免疫排斥反应，并维持妊娠的继续。人类妊娠大约有 70% 不成功，其中50% 左右的受精卵在下次月经来潮之前就发生了流产，即所谓的临床前流产。这种流产可能未被本人察觉而仅仅认为是一次血量偏多的正常月经或延期月经。仅20% 左右的自然流产可能被患者感知或被医生确诊。真正能够发育成熟正常分娩者仅占人类妊娠的1/4 左右，由此可见人类流产的发生率相当高。自然流产连续发生二次或二次以上者为反复性自然流产(RSA) ，反复性自然流产的原因比较复杂，而且常为多种因素共同所致。比较明确的病因有：①遗传因素约占4.5%-25% 。②内分泌因素约占13%-20% 。③生殖器官异常约占12%-15% 。④感染因素约占2% 。除此之外，原因不明者约占40% ～60.00% ，其中80% 与免疫因素有关。
在正常孕妇的血清中，存在一种抗配偶淋巴细胞的特异性 IgG 抗体，既抗丈夫淋巴细胞抗体(Antipatemal lymphocyte antibody, APLA) ，它可抑制淋巴细胞反应（MLR ），封闭母体淋巴细胞对培养的滋养层的细胞毒作用，防止辅助T 细胞识别胎儿抗原的抑制物，并可阻止母亲免疫系统对胚胎的攻击。封闭同种抗原刺激的淋巴细胞产生巨噬细胞移动抑制因子（MIF ），故称其为封闭抗体（blocking antibodies,BA ）。封闭抗体是人类白细胞抗原(HLA) 、滋养层及淋巴细胞交叉反应抗原(TLX) 等刺激母体免疫系统，所产生的一类IgG 型抗体。研究认为，孕妇血中的APLA 可以表现以下作用：(1)APLA 中和同种异体抗原，而不使胎儿受到排斥；(2) 抗体直接作用于具有免疫能力的细胞如：CTL 细胞、
NK 细胞等；(3) 直接结合到靶细胞的抗原上，从而降低它们对受体细胞参与的免疫反应的敏感性。以往研究认为，反复自然流产的发生与母体缺乏APLA 有关，流产次数越多的患者，其体内APLA 缺乏的可能性越大。APLA 的产生不足，母体对胎儿产生强烈的排斥现象，发生于孕早期可出现反复自然流产，孕晚期则可出现妊娠高血压疾病、胎儿宫内生长受限、甚至出现胎死宫内。因此对反复自然流产患者进行APLA 检测是非常有必要的。
HLA 是位于人 6 号染色体短臂的一种高度变态性的紧密连锁基因群，是一类存在于各种组织及有核细胞表面并可引起强烈排斥反应的抗原，它所编码的主要组织相容性复合体（Major Histocompatibility Complex, MHC ）在特异性免疫中处于中心地位，经典的HLA 抗原在胎盘无表达，而HLA-G 在胎盘绒毛外细胞滋养层特异表达。反复自然流产的夫妇含有相同的HLA 抗原的频率高于正常夫妇，过多的共有抗原阻止母体对妊娠胚胎作为异体抗原的辨识，不能刺激母体产生足够以维持妊娠所需的APLA ，由于缺乏抗体的调节作用，母体免疫系统面对胚胎产生免疫攻击而导致流产。由于HLA 基因的遗传多态性，个体之间细胞膜表面的HLA 抗原分子相容性概率很低，构成了同种免疫。正常妊娠中，夫妇HLA 抗原不相容，胚胎所带的父源性HLA 抗原( 滋养细胞表面) 能刺激母体免疫系统并产生APLA ，即抗配偶淋巴细胞的特异性IgG 抗体(APLA) ，它能抑制混合淋巴细胞反应，并与滋养细胞表面的HLA 抗原结合，覆盖来自父方的HLA 抗原，从而封闭母体淋巴细胞对滋养层细胞的细胞毒作用，保护胚胎或胎儿免受排斥。
国内外学者一致认为 RSA 是由于母体不能识别父方抗原而产生保护性反应所致，临床采用配偶淋巴细胞免疫治疗诱导母体产生同种免疫反应，从而出现APLA 及微淋巴细胞毒抗体，使母体免疫系统不易对胎儿产生免疫攻击，使妊娠继续。部分学者认为，RSA 与母体存在特异性的流产易感基因或单体有关，这种易感基因或单体可能存在于HLA 复合体内或与其紧密连锁。含有易感基因或单体的母体对胚胎抗原呈低反应状态，同样不能产生APLA ，使胚胎遭受母体免疫系统的排斥而发生流产。
对于 APLA 阴性的患者，可有针对性地选用丈夫淋巴细胞主动免疫疗法，因为这些患者的流产次数越多，体内免疫系统紊乱越严重，若没有针对性有效的免
疫干预，她们很难有机会成为母亲。自1981 年Taytor 和Beer 等创立了RSA 淋巴细胞主动免疫疗法，经过20 余年的临床研究表明，免疫治疗确能有效阻止APLA 缺乏性RSA 。国内外不同学者对原因不明性反复自然流产患者进行淋巴细胞免疫治疗后，妊娠成功率达72.73%-86.2% ，且未发现对母、儿的副反应，APLA 的阳性率明显高于治疗前，而APLA 阳性者再次妊娠的成功率明显高于阴性者。 根据国内外经验，对于反复性自然流产的患者先进行APLA 检查，如果APLA 阴性，则采用丈夫淋巴细胞主动免疫疗法。 主动免疫原首选丈夫淋巴细胞, 若丈夫不宜作为免疫原供者( 如HBsAg 阳性) 则选用无关的健康个体, 抽取供者外周血30ml 肝素抗凝, 在无菌条件下常规分离提取淋巴细胞, 用生理盐水洗涤3 次后, 调至淋巴细胞浓度为(2 ～4) ×107 /ml, 细胞悬液量约3 ml, 用皮内注射的方法, 注入女方左右手臂皮内6 ～8 个点。每隔2 ～3 周一次, 4 次为1 个疗程, 治疗过程中避孕。疗程结束2 周后复查APLA ， 如APLA 转为阳性，则可计划受孕（包括监测排卵、促排卵、人工授精、试管婴儿等）。如APLA 仍为阴性，则需继续注射治疗，直至APLA 转为阳性后再考虑受孕。 如获妊娠，则马上再进行一个疗程的维持治疗, 直至孕16 周左右。 大量研究证实淋巴细胞免疫治疗RSA 有效安全，并且APLA 对再次妊娠结局有良好的预示价值。
第二部分 封闭抗体主要检测方法
目前临床上检测封闭抗体主要有两种方法： 淋巴细胞毒交叉试验 （ CDC ）和酶联免疫法（ ELISA ）。
一、 CDC 方法
所需仪器和试剂：离心机、电热恒温培养箱、旋转混合器、荧光显微镜、加样枪、干板、免疫磁架、免疫磁珠、荧光染液、 PBS 粉剂。
二、 ELISA 方法
1 、所需仪器
①
② 离心机：用于离心血清。 电热恒温培养箱：用于 37 ℃孵育。
2 、所需试剂：封闭抗体 ELISA 检测试剂盒。 3 、结果判断
①
②
检测结果可直接用眼睛观察，蓝色为阳性，无色为阴性。 如果医院科室配备有酶标仪，也可以采用酶标仪自动分析。
第三部分 收费标准 / 采购价格 / 赢利分析
1 、国内部分地区收费标准：
2 、试剂采购价格：
3 、医院赢利分析：
第四部分 封闭抗体产品说明
1、
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3、 产地：美国原装进口。 保质期：一年。 注册：已在国家食品药品监督管理局注册，并获得进口药品
注册证。
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6、 客户： 全国目前已有 80 多家医院开展封闭抗体检测。 售后服务：公司会派 技术人员至使用科室对相关人员进行 操作方法培训 ，建议用户提前收集 10 ― 20 例样本。 其他
① 酶标仪：如医院采用酶标仪自动分析，建议采用 Bio-Tek 公司的 ELX800NB 。
② 酶标仪自动分析软件：全中文版，如需安装，收费价格为安装费 2000 元，软件费 6000 元。