药敏实验

检验原理：含有定量抗菌药物的纸片贴在已接种测试菌的琼脂平板上，纸片中所含的药物吸收琼脂中的水分溶解后不断的向纸片周围区域扩散，形成递减的梯度浓度。在纸片周围抑菌浓度范围内的细菌的生长被抑制，形成透明的抑菌圈。抑菌圈的大小反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的最低抑菌浓度（MIC）呈负相关，即抑菌圈越大，MIC越小。

样本要求:鉴定后的致病微生物纯菌落

检验方法：

1、菌液制备：挑选鉴定后的致病微生物纯菌落3~4个菌落置于灭菌0.9%氯化钠液中，制成均匀悬液。

经与浊度管（0.5麦氏单位比浊管）比较，浊度一致。

2、接种平板：用灭菌的棉拭子蘸取制备好的接种菌液，在管壁上旋转挤压几次，去掉过多的菌液，再用试子涂布整个培养基表面，反复几次，每次将平板旋转60℃，最后沿平皿周边绕两圈，用镊子压平。？每张纸片间距不少于24mm，纸片中心距平皿边缘不少于15mm。

3、孵育：贴好纸片后在15min内放到35℃孵箱，将平板倒置培养。平板孵育16~18h后取出。

4、结果判定：培养后取出平板，测量抑菌环的直径，抑菌环的边缘以肉眼见不到细菌明显生长为限。 【检测结果的解释】

用毫米尺量取抑菌环直径，参照下表判读结果，按敏感（S）、中介（I）、耐药（R）报告。

纸片法药敏试验抑菌环直径判断标准（非苛养菌）

药敏实验

　 一、试验步骤

　　 1.试验材料：

　　 1.1普通营养琼脂培养基：可去生化试剂店购买，做不同细菌的药敏试验可选择不同的培养基，如做大肠杆菌的药敏试验可选择普通营养琼脂或麦糠凯培养基。做沙门氏菌可选择血清培养基。

　　 1.2药敏试纸：购买或自制。

　　1.3细菌：待做药敏试验的细菌。

　　 1.4接种环、酒精灯、打孔器、牛津杯。

　　 1.5移液器、滴头。

　　 2.试验准备：

　　 2.1药敏片的准备：购买或自制。

　　 2.1.1药敏片的制备：取新华1号定性滤纸，用打孔机打成6毫米直径的圆形小纸片。取圆纸片50片放入清洁干燥的青霉素空瓶中，瓶口以单层牛皮纸包扎。经15磅高压、15-20分钟消毒后，放在37℃温箱或烘箱中数天，使完全干燥。

　　 2.2.2抗菌药纸片制作：在上述含有50片纸片的青霉素瓶内加入药液0.25毫升，并翻动纸片，使各纸片充分浸透药液，翻动纸片时不能将纸片捣烂。同时在瓶口上记录药物名称，放37℃温箱内过夜，干燥后即密盖，如有条件可真空干燥。切勿受潮，置阴暗干燥处存放，有效期3-6个月。

　　 2.2药液的制备(用于商品药的试验)：按商品药使用治疗量的比例配制药液；如商品药“百病消”按其说明量治疗量0.01%饮水，可按这个比例配制药液，可取10毫克加入10毫升的水中混匀。此稀释液即为用于做药敏试验的药液。

　　 3.试验操作方法：

　　 3.1药敏片法

　　 3.1.1在“超净台”中，用经(酒精灯)火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式；用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。找到第二点划线至平皿的1/2，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。(另可挑取待试细菌于少量生理盐水中制成细菌混悬液，用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基表面，涂布均匀致密)。

　　 3.1.2将镊子于酒精灯火焰灭菌后略停，取药敏片贴到平皿培养基表面。为了使药敏片与培养基紧密相贴，可用镊子轻按几下药敏片。为了使能准确的观察结果，要求药敏片能有规律的分布于平皿培养基上；一般可在平皿中央贴一片，外周可等距离贴若干片(外周一般可贴七片)，每种药敏片的名称要记住。

　　 3.1.3将平皿培养基置于37℃温箱中培养24小时后，观察效果。

　　 3.2牛津杯法

　　 3.2.1在“超净台”中，用经(酒精灯)火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式：用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。然后，找到第二点划线至平皿的1/2，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。(另可挑取待试细菌于少量生理盐水中制成细菌混悬液，用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基表面。要求涂布均匀致密。)

　　 3.2.2以无菌操作将灭菌的不锈钢小管(内径6mm、外径8mm、高10mm圆形小管，管两端光滑，也可用玻璃管、瓷管)，放置在培养基上，轻轻加压，使其与培养基接触无空隙，在小管处标记各种药物名称。每个平板可放4-6支小管。几分钟后，向各小管中滴加一定数量的各种药液，勿使其外溢。在37℃下培养8-18小时，观察结果。

　　 3.2.3将平皿培养基置于37℃温箱中培养24小时后，观察效果。

　　 3.3打孔法：该法较简单，成本低，易操作，比较适用于商品药物的检测。

　　 3.3.1在“超净台”中，用经(酒精灯)火焰灭菌的接种环挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌涂布到平皿培养基上。具体方式：用灭菌接种环取适量细菌分别在平皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的1/2。找到第二点划线至平皿的1/2，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。(另可挑取待试细菌于少量生理盐水中制成细菌混悬液，用灭菌棉拭子将待检细菌混悬液涂布于平皿培养基表面，涂布均匀致密。)

　　 3.3.2以无菌操作将灭菌的不锈钢小管(外径为4毫米、孔径与孔距均为3毫米，管的两端要光滑，也可用玻璃管、瓷管)，放置在培养基上打孔，将孔中的培养基用针头挑出，并以火焰封底，使培养基能充分的与平皿融合(以防药液渗漏，影响结果)。

　　 3.3.3加样：按不同药液加样，样品加至满而不溢为止。

　　 3.3.4将平皿培养基置于37℃温箱中培养24小时后，观察效果。

　　 二、结果观察：

　　 过夜培养后形成一个抑菌圈，抑菌圈越大，说明该菌对此药敏感性越大，反之越小，若无抑菌圈，则说明该菌对此药具有耐药性。其直径大小与药物浓度、划线细菌浓度有直接关系。

　　 三、判定标准：

　　 1.药敏试验的结果，应按抑菌圈直径大小作为判定敏感度高低的标准。

　　 表1（药物敏感试验判定标准）

　　 2.药物敏感试验判定标准参考

　　 在9毫米以上为敏感，6-9毫米为低敏，无抑菌圈为不敏。

　　 四、影响药敏结果的因素

　　 1.培养基：应根据试验菌的营养需要进行配制。倾注平板时，厚度约5-6mm，一般90mm直径的培养皿，倾注培养基18-20ml为宜。培养基内应尽量避免有抗菌药物的拮抗物质。

　　 2.细菌接种量：细菌接种量应恒定，如太多，抑菌圈变小，能产酶的菌株更可破坏药物的抗菌活性。

　　 3.药物浓度：药物的浓度和总量直接影响抑菌试验的结果，需精确配制。商品药应严格按照其推荐治疗量配制。

　　 4.培养时间：一般培养温度和时间为37℃、8-18小时，有些抗菌药扩散慢如多粘菌素，可将已放好抗菌药的平板培养基，先置4℃冰箱内2-4小时，使抗菌药预扩散，然后再放37℃温箱中培养，可以推迟细菌的生长，而得到较大的抑菌圈。

　　 五、应用

　　 药物敏感试验后，应选择高敏药物进行治疗，也可选用两种药物协助使用，以减少耐药菌株。

　　 在选择高敏药物时应考虑药物的吸收途径，因为我们药敏试验是药液直接和细菌接触，而在给禽用药的时候，必须通过机体的吸收才能使药物达到一定的效果，所以在给禽用药时，高敏药物一定要配合适宜的给药方法，这样才会达到好的治疗效果。

第二篇：细菌药敏实验中需要关注的问题(1)

细菌药敏实验中需要关注的问题（1）

写在课前的话

长期以来，各种致病菌耐药性的产生使各种常用抗菌药物往往失去药效，以及不能很好的掌握药物对细菌的敏感度，所以一个正确的结果，可供临床医师选用抗菌药物的参考，并提高疗效。这就需要利用药敏试验进行药物敏感度的测定，以便准确有效的利用药物进行治疗。

一、摘要

随着抗菌药在临床的广泛使用，耐药细菌越来越多，临床医生也越来越关注细菌对不同种类抗菌药物的敏感性。实验室检测细菌药敏就成了我们工作当中的一个主要的内容，怎么样才能做好细菌药敏试验？下面我们就来讨论一下细菌药敏试验中需要特别关注的几个问题。这些问题包括：一、哪些细菌需要进行药敏试验？二、采取什么方法进行药敏试验？三、药敏试验应该检测哪些抗菌药物？四、药敏试验时我们应该注意哪些环节？五、如何正确报告药敏试验结果？六、怎样做好药敏试验的室内质控？

二、哪些细菌需要进行药敏试验

（一） 需要进行药敏试验

需要进行药敏试验的情况主要包括两种情况：一个是明确了这个细菌是引起感染的病源，注意这是引起感染的病源。第二种情况是这种引起感染的细菌在治疗过程当中可能发生了耐药。

（二） 无需进行药敏试验

还有一些情况是不需要进行药敏试验的，比如我们正常呼吸道存在的一些菌群，像奈瑟菌，呼吸道的草绿色链球菌这些正常菌群是不需要进行药敏试验的。第二类不需要进行药敏试验的情况是到目前还没有发现对某种药物具有耐药的细菌，比如A群和B群的链球菌，它们对青霉素目前来说都是敏感的。所以也不需要进行药敏试验检测。第三种不需要进行药敏试验的情况是，已知这一种细菌对某种药物具有天然的耐药性。比如肺炎克雷伯菌对氨苄西林就是属于天然耐药，就没有必要再去检测肺炎克雷伯菌对氨苄西林的药物敏感性。第四种不需要进行药敏试验的情况是，尿液标本中如果分离到三种或三种以上的细菌都不需要进行药敏试验。

（三） 无需进行试验而报告了药敏结果可能导致的结果

如果我们把不应该进行药敏试验的细菌做了药敏试验，并且把药敏试验的结果出了报告，可能会导致什么情况？临床医生可能根据我们报告的药敏试验结果采取了相应的治疗，而且这种治疗应该说是不必要的，或者是不适当的。再就是由于不适当的治疗，可能要筛选出耐药细菌。更为严重的是，这种药敏结果的假象妨碍了进一步鉴定患者的真正病原菌。

（四） 以下情况是否需要进行药敏试验

1 、病例 1

第一个病例患者的标本来自于支气管抽吸物，临床诊断为肺炎。先是分离鉴定出草绿色链球菌、奈瑟菌和肺炎克雷伯菌，哪种细菌需要做药敏试验？很显然肺炎克雷伯菌在这里是需要进一步做药敏试验的。而草绿色链球菌和奈瑟菌就没有必要进行药敏试验了。

2 、病例 2

第二个患者标本是尿，临床诊断阑尾炎，在病人的尿标本中培养出大肠埃希菌，计数是60000CFU/ml，肠球菌是40000CFU/ml，凝固酶阴性葡萄球菌12000CFU/ml。根据上面所述，尿标本中分离出三种以上的细菌，是不进行药敏试验的，因为它们很可能都是污染的细菌，不能代表真正的病原菌。

3 、 病例 3

第三个病例标本来自于咽拭子，诊断是咽喉炎，分离培养出大量的A组链球菌。这种情况需要做药敏吗？不需要。因为A组链球菌对青霉素都是敏感的，所以临床可以使用青霉素来治疗，但是如果病人对青霉素过敏，需要选择红霉素，或红霉素这一类的药物，那我们就要检测这A组链球菌对红霉素是否敏感。因为有一部分链球菌对红霉素可能是耐药的。具体针对这个病人，咽拭子中的A组链球菌是否对红霉素耐药，必须通过药敏试验才能够得出结论。

4 、病例 4

第四个病例标本来自于血液，临床诊断不明原因发热，培养出凝固酶阴性葡萄球菌，注意这是一次血培养阳性。这也需要做药敏试验吗？一般认为来自于血里的细菌都是致病菌，但是注意凝固酶阴性葡萄球菌一次分离自血液，特别是在48小时以后，培养出阳性的，通常都是属于污染菌，不必常规做药敏。但是如果临床确实有需要，那么可以跟实验室联系，再进行药敏试验。其实最好的还是应该有两次以上血培养为凝固酶阴性葡萄球菌。那这个凝固酶阴性葡萄球菌在病人发热当中的致病作用我们才可以认为是它的致病菌。

三、采取什么方法进行药敏试验

（一）药敏试验方法

采取什么方法进行药敏试验？药敏试验的方法各异，各自的优缺点也是大不相同。

1 、纸片扩散法

首先纸片扩散法是我们现在实验室最常用的一种方法，因为它经济、实用、简便，这是一种定性的试验，通过邻近纸片之间抑菌圈的形态变化我们可以观察抗菌药物之间的相互作用。

2 、浓度梯度法

第二种药敏试验方法就是浓度梯度法。浓度梯度法需要采取E-test试条，试条的成本比较高，但是这种方法操作比较简单，结果判定也是比较清楚的，是一种定量的方法。

3 、微量液体稀释法

第三种方法，微量液体稀释法，这是把抗菌药物加到了微孔板当中，进行了不同的稀释，已经稀释好的 , 所以操作比较繁琐，在孔里面生长的细菌我们看不出来是不是有污染菌，因此要判定它是不是有污染菌必须再转种到平板上进行判定，这是一种定量的方法，可以直接给出最低抑菌浓度。

4 、琼脂稀释法

第四种方法，琼脂稀释法。琼脂稀释法是把抗菌药物加到了菌制板里，然后把细菌再接种到平板上，这种方法适合大批量细菌进行药敏检测，能够进行定量检测。

5 、仪器法

现在越来越多的实验室引进了先进的自动化的仪器，如VTTEK、MicroScan和Phoenix，都是可以进行细菌药敏试验的。它们最大的优点就是可重复，检测时间比较快，避免了手工量读的错误，而且还带有专家分析系统。当然仪器方法也离不开人工要提前制备细菌菌悬液，菌悬液制备的纯度和浓度会影响仪器的结果，由于仪器是需要配套的，抗菌药物板，因此它的耗材比较贵，抗菌药物组合是由厂家规定的不能由用户随意更改。对于临床相关的一些苛养的细菌，还有厌氧菌，部分非发酵菌仪器方法是不能测定的。对一些特殊耐药机制或者是低水平耐药的细菌，用仪器方法也不能够检测出来。所以细菌药敏试验的方法确实是比较多，各个实验室根据自己的情况来选用不同的试验。据悉国内多数的医院还是在使用纸片扩散法。

（二）纸片扩散法不适用的情况

纸片法虽然比较常用，但是它不能用于以下一些情况的测定。

第一种情况葡萄球菌对万古霉素的敏感性，第二种是葡萄球菌和肠球菌对达托霉素的敏感性，第三种情况是幽门螺杆菌对克拉霉素的敏感性。第四种是肺炎链球菌对苯唑西林抑菌环直径≤19mm的时候，也不能单纯的判定敏感或者是耐药，必须要行MIC值的测定。

还有草绿色链球菌对青霉素和氨苄西林的敏感性，脑膜炎奈瑟菌对青霉素和氨苄西林的敏感性都不能用纸片扩散法。不动杆菌对粘菌素及多粘菌素、洋葱伯克霍尔菌对左氧沙星、替卡西林、棒酸以及嗜麦芽窄食单胞菌对头孢他啶、替卡西林加棒酸都需要进行MIC值的测定，使用纸片扩散法的结果是不可靠的。这一点在一些采用纸片扩散法进行药敏试验的实验室应该给予重视。

所以说没有一种方法可以完美的检测所有细菌对所有抗菌药物的所有耐药性。那怎么办？对于多数采用纸片扩散法为主进行药敏试验的实验室可以加一种MIC测定的方法备用，或者是稀释方法或者是E-test试条，在需要进行MIC测定的时候，就可以很方便的进行使用。以仪器法为主进行药敏试验的实验室，就可以备一种纸片扩散法，主要是针对一些需要观察药物之间相互作用的情况，比如说我们测定葡萄球菌当中红霉素对克林霉素的诱导耐药的时候，那纸片扩散法观察D这个现象是非常好的。

为什么说没有一种方法可以完美地检测所有细菌对所有抗菌药物的所有耐药性？

四、药敏试验应检测哪些抗菌药物

（一）抗菌药物分组

根据美国临床实验室标准化委员会的规定，检测细菌对抗菌药物的敏感性，抗菌药物分了几组，A、B、C、U，还有O组等。

A组药主要是针对的抗菌药物，要首选，而且是常规报告。对于B组的抗菌药物要进行首选试验，但是选择性报告。所谓选择性报告就是当A组的同类药物耐药，或者是病人对这种药物过敏，或者是临床治疗无效的时候，就应该用B组的药物，所以我们要选择性报告B组药物。还有一种情况就是对特定部位的标本进行B组药物的报告，这种特定部分的标本主要是脑脊液当中的肠杆菌，对三代头孢菌素的敏感性，泌尿道的一些分离的菌株，它们对复方磺胺的敏感性。再就是多种细菌感染或者是多部位感染的时候应该选择性的报道一些B组的药物。

C组的药物主要是指的替代或者是补充性的，不作常规报告也是选择性的报告，选择C组药物报告主要是在一些基本药物过敏或者是这些菌株容易造成局部或者是广泛流行的这些菌株。还有就是治疗少见菌的感染，比如肠道用分离的沙门菌检测它们对氯霉素的敏感性。

U组的药属于泌尿道感染药物，像呋喃妥因，或者是喹诺酮类的药物，主要用在泌尿道感染。

（二）常见细菌的主要测试药物

1 、肠杆菌科

肠杆菌科的细菌常规试验首选报告也就是A组的药有氨苄西林、头孢唑啉、头孢噻吩、庆大霉素和妥布霉素。

B组的药比较多，有阿米卡星、阿莫西林、克拉维酸、氨苄西林、舒巴坦、哌拉西林、三唑巴坦，还有头孢呋辛、头孢吡肟、头孢西丁、头孢替坦、头孢噻肟、头孢噻肟或头孢曲松。另外还有环丙沙星、左氧沙星、厄他培南、亚胺培南、美罗培南、哌拉西林和复方磺胺制剂。

C组的药主要是有氨曲南、氯霉素、头孢他啶还有四环素。

另外就是U组的药物： 洛美沙星或氧氟沙星、喃妥因、磺胺异噁唑、甲氧苄啶、诺氟沙星。

上面头孢噻肟跟头孢曲松之间用了一个“或”，就是说这两种药物选择其中的一种来做就可以了。肠杆菌科的细菌，比如说大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌以及变型杆菌是常见产生ESBL的细菌，如果需要的话要进行ESBL的确认试验。

关于肠杆菌科的细菌药敏试验选择测试的主要药物说法错误的是（）

A. A组药物：氨苄西林，头孢唑啉，庆大霉素

B. B组药物：阿米卡星，阿莫西林，头孢呋辛

C. C组药物：氨曲南，氯霉素，头孢他啶

D. U组药物：洛美沙星，美罗培南，环丙沙星

正确答案：D

解析：肠杆菌科的细菌常规试验首选报告，A组药有：氨苄西林、头孢唑啉、头孢噻吩、庆大霉素和妥布霉素。B组药：阿米卡星、阿莫西林、克拉维酸、氨苄西林、舒巴坦、哌拉西林、三唑巴坦，还有头孢呋辛、头孢吡肟、头孢西丁、头孢替坦、头孢噻肟、头孢噻肟或头孢曲松。另外还有环丙沙星、左氧沙星、厄他培南、亚胺培南、美罗培南、哌拉西林和复方磺胺制剂 。C组药主要是有氨曲南、氯霉素、头孢他啶还有四环素。U组的药物：洛美沙星或氧氟沙星、喃妥因、磺胺异噁唑、甲氧苄啶、诺氟沙星。美罗培南，环丙沙星是B组药，故答案选择D。

2 、铜绿假单胞菌

铜绿假单胞菌也是实验室常见的细菌，对于这种常见细菌进行药敏试验的药物选择A组的药有头孢他啶、庆大霉素、妥布霉素和哌拉西林。B组药有阿米卡星、环丙沙星、左氧氟沙星、氨曲南、亚胺培南、美罗培南、头孢吡肟、哌拉西林、三唑巴坦和替卡西林。洛美沙星或者是氧氟沙星、诺氟沙星都是属于U组类，也就是说当从尿道里分离到铜绿假单胞菌的时候要报告U组的药。

3 、不动杆菌

不动杆菌在近几年来在我们国家的很多医院都分离出耐药的一些菌株，那么如何测定不动杆菌的敏感抗菌药？

A组的药有氨苄西林、舒巴坦、头孢他啶、环丙沙星、左氧沙星、亚胺培南、美罗培南、庆大霉素和妥布霉素。

B组药有阿米卡星、多西环素、米诺环素、四环素、哌拉西林、三唑巴坦、替卡西林、克拉维酸、哌拉西林（这是单纯的哌拉西林），还有头孢吡肟、头孢噻肟、头孢曲松。注意这个地方的头孢噻肟和头孢曲松之间没有“或”，所以这两种不能互相推测，必须单独各自测定。B组药还有甲氧苄啶和磺胺甲噁唑的复合磺胺制剂。

C组药就是粘菌素和多粘菌素B。要注意如果发现有多耐药的不同杆菌，需要进行粘菌素检测的时候，必须要测定MIC值，纸片扩散法结果是不可靠的。

4 、洋葱伯克霍尔德菌

对于洋葱伯克霍尔德菌实验室主要要鉴定的这几种药，A组药就是复方磺胺，B组里可以用纸片法测定的有头孢他啶、美罗培南和米诺环素、氯霉素、左氧沙星、以及替卡西林加克拉维酸，都得要测定MIC值。

5 、嗜麦芽窄食单胞菌

嗜麦芽窄食单胞菌能够用纸片扩散法测定的药就三种，一个是复方磺胺制剂，还有就是左氧沙星、米诺环素，而头孢他啶、氯霉素、替卡西林和克拉维酸都需要测定MIC值。

6 、葡萄球菌属

葡萄球菌是我们细菌室最常见的一种细菌，对于它的药敏试验，我们又应该注意什么？

A组药有红霉素或者是克拉霉素或者是阿奇霉素，也就是说这三种只能选其中的一种做，没必要都去做，因为只要做出一种就可以推测对其他两种的敏感性了。再就是克林霉素，克林霉素在泌尿道感染的细菌，我们不做常规报告。测定葡萄球菌对苯唑西林的敏感性是用头孢西丁纸片来做的，但是要注意的是我们虽然是用头孢西丁纸片来做检测，报告的则是苯唑西林的耐药性。再就是要测定青霉素、甲氧苄啶、磺胺甲噁唑的敏感性。对于苯唑西林耐药葡萄球菌也就是说用头孢西丁纸片来检测，如果检测到它是耐药的，那么对青霉素类的，还有含酶抑制剂的复合物、以及头孢类和亚胺培南都应该报告耐药了。所以在葡萄球菌检测当中，含酶抑制剂的复合物、头孢类和亚胺培南都没有作为常用的检测的药物。

B组的药有达托霉素、利奈唑烷、泰利霉素、多西环素、四环素、利福平和万古霉素。要注意一下，测定葡萄球菌对万古霉素的敏感性，要用MIC的方法。因为只有当万古霉素抑菌圈直径在6mm的时候我们才能报告葡萄球菌对万古霉素是耐药的，而大于6mm也就是7mm以上，纸片扩散法就不能很好的预测这个葡萄球菌对万古霉素是不是真正的敏感或者耐药，必须要测定MIC值。

葡萄球菌要测定的C组药有氯霉素、庆大霉素、环丙沙星或者是左氧沙星或氧氟沙星，再就是要用MIC的方法测定奎奴普丁和达福普丁的敏感性。还有一些U组的药物。

7 、肠球菌属

肠球菌属的细菌需要检测的A组药就两种青霉素和氨苄西林。 B组药有万古霉素、利奈唑烷、达托霉素，还有奎奴普丁、达福普丁，达托霉素和奎奴普丁、达福普丁要测MIC值才行。

要注意的是肠球菌的C组药一般是实验室都要检测的，一个是高浓度的庆大霉素，一个是高浓度的链霉素。这是用来筛选肠球菌是不是具有高水平的耐药株的存在。U组药有环丙沙星、左氧沙星、诺氟沙星、呋喃妥因和四环素。

（三）病例标本

1 、病例 5

这是一份来自气管吸取物的标本，临床诊断肺炎。培养出来的细菌是粘质沙雷菌。我们看到这个报告当中，氨苄西林、头孢唑啉和庆大霉素都是属于A组药，头孢噻肟和磺胺以及亚胺培南是属于B组的药，它是庆大霉素和亚胺培南是敏感的，要注意我们报的是头孢噻肟耐药。那么可以预测头孢曲松也是耐药的，因为按照CLSI 的规定，头孢噻肟或头孢曲松只做其中的一种就可以了。

2 、病例 6

这是一个来自脓液的标本，临床诊断外伤。培养出铜绿假单胞菌，这里报了四种药，一个头孢他啶、庆大霉素、环丙沙星还有哌拉西林、三唑巴坦。前两组是属于铜绿假单胞菌要检测的A组药，后两种是属于B组药，它们的结果都是敏感的。

3 、病例 7

这个病例标本来自于痰，诊断是肺部感染，培养出来的也是铜绿假单胞菌，这里报告了以下几种药：头孢他啶耐药、庆大霉素耐药、妥布霉素耐药，这是三种A组的药。哌拉西林、三唑巴坦耐药的，阿米卡星、环丙沙星和亚胺培南是属于敏感的。那么后四种药都是属于B组药，我们可以选择性报告，因为A组药耐药的都比较多，所以就多报了一些B组的药。

4 、病例 8

这个病例的标本来自于脑脊液，临床诊断是脑部的肿瘤术后，培养出鲍曼不动杆菌，对于鲍曼不动杆菌药敏试验报的药比较多，头孢他啶、环丙沙星、左氧沙星都是属于耐药的。美罗培南也是耐药的，这是属于A组的药。庆大霉素耐药，还有一些敏感的，有A组敏感的亚胺培南、B组敏感是阿米卡星、头孢噻肟、头孢曲松、哌拉西林、替卡西林和克拉维酸。

5 、病例 9

这个病例的标本来自于血液，临床诊断是一个发热的病人，培养出了金黄色葡萄球菌，对金黄色葡萄球菌进行了药敏试验，测定到克林霉素、红霉素、苯唑西林以及青霉素都是耐药的，这是属于A组药。而头孢唑啉、万古霉素和利福平测定都是属于敏感的，这里要注意两个问题，一个是我们用头孢西丁纸片已经检测到耐药了，报告了苯唑西林耐药，那就说明这是产生MSI的，也就是耐苯唑西林的金黄色葡萄球菌，头孢类的抗菌药物都应该报告是耐药，所以把头孢唑啉体外检测的敏感要更改成耐药。需要注意的是利福平试验检测是敏感的，我们应该在报告单上说明，利福平不应该单独用于抗菌治疗，因为单独治疗很容易发生耐药。

6 、病例 10

这个病例标本来自血，临床诊断是心内膜炎，这是分类培养的粪肠球菌。对于这种粪肠球菌药敏试验检测的是MIC值了，氨苄西林为2，敏感的，万古霉素小于0.5，也是敏感的，庆大霉素协同试验和链霉素的协同试验是敏感的，实际上它主要检测的是高浓度的庆大霉素和高浓度的链霉素都是敏感的，这样的结果就提示我们这是一个严重的肠杆菌感染了，那么需要使用氨苄西林或者是万古霉素，再联合庆大霉素或者是链霉素就可以了，如果选择氨苄西林加庆大霉素联合治疗应该说还是有效的。

随着新型致病菌的不断出现，抗菌药的防治效果越来越差。并且各种致病菌对不同的抗菌药物的敏感性不同，同一细菌的不同菌株对不同抗菌药物的敏感性也有差异。通过本课程学习掌握哪些细菌需要进行药敏试验，药敏试验方法，药敏试验应检测的抗菌药物等，便于临床的诊断和治疗。