《普通植物病理学》实习报告
11植物保护（微生物工程）1班
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一、实习目的
通过两周的课程教学实习，巩固和加深对课堂所学知识的理解，将所学的理论知识用于分析实践问题，学会灵活运用课程知识解决生产实践问题，使对知识的掌握上一个台阶。通过实际操作和训练，掌握课程实践教学大纲所规定的 专业基本操作和实践技能，
主要包括：
病害标本采集方法、病害调查方法、病害田间诊断方法、不同病原类型（真菌、细菌、病毒、线虫、寄生性种子植物和非侵染性病害）的田间识别和症状观察、培养基制备、病原真菌和细菌的分离培养、线虫的分离和形态观察、病原真菌的玻片标本制作技术、病害鉴定技术、植物病害过塑标本和镜框标本制作法等。
二、实习内容与方法
(一) 植物病害标本的采集和制作及常见病害鉴定
(二) 植物病原的分离与培养
（三）植物病原真菌玻片标本制作
（四）植物病害过塑标本的制作
(五) 线虫的分离
三、实验步骤
标本采集
1、外出实习地点
(1)华农大农场
(2)华农大增城宁西基地
(3)广州白云区蔬菜地
2、采集方式与标本采集要求
(1)直接从病害植株以手、刀、剪刀提取病样。
(2)症状应具有典型性。标本应有典型的病状和病症，最好有不同阶段和不同部位的症状。这样才能使标本起到帮助人们正确识别病害的作用。
(3)真菌病害标本应采集有子实体的。对于真菌病害来说，鉴定病原物是正确诊断病害的重要条件之一，因此要求真菌病害标本必须有病菌的子实体。
(4)每种标本上的病害种类应力求单纯。如果一份标本上同时有几种病害，就会混淆视线，影响鉴定，这样就没有适用价值。
(5)采集时应进行必要的记载，以辅助标本不足。记载的内容应包括：寄主名称、发病情况、环境条件、以及采集日期、地点、采集人姓名等。
(6)寄主的鉴定也很重要，有些病害如锈病，不知道寄主是无法鉴定的。对于不认识的寄主植物。应将寄主鉴定所必需的部分，如枝、叶、花及果实等部分都采集齐全。
(7)适于干制的标本，应随采随压于标本夹中，尤其容易干燥卷缩的标本如水稻、小麦的叶片，最好立即夹在厚书本中，否则叶片失水卷缩后无法展平。
(8)柔软多汁或腐烂的标本，应用纸袋或标本纸包好，然后置于标本箱中，以免污染和挤坏标本，妨碍鉴定。
(10)黑白粉病、锈病、霜霉类标本等由于病菌孢子极易散落，所以采集时应用纸袋或标本纸包好后，再置于采集夹中或采集箱中，以免混杂妨碍鉴定。
(11)每种标本采集的数量不宜过少，以便在制作和应用中留有余地。
标本制作
（1）把适于压制的病样如植物的茎、叶以及去掉果肉的果皮等，整形后分层压在标本夹中，放一层标本纸（每层3-4张）放一层标本，并写上标签（标签内容为病害名称、采集地点、采集人姓名、采集日期）每个标本夹的总厚度以三寸左右厚为宜，用绳子将标本夹压紧。
（2）每隔一至两天就打开标本夹检查标本纸的干湿程度，及时更换较湿的标本纸。在第一次换纸时，同时将标本整形，使其达到既美观又便于观察的要求。
植物病原的分离与培养
实验前准备
(一)清洁环境：
分离工作严格说应在无菌条下进行，无菌室或无菌箱是分离不可缺少的设施。若限于条件实验只能在普通房间进行时，必须对房间进行彻底扫除，清洁环境、搞好卫生。地上多洒些水，以消除室内尘埃，分离开始前准备好一切用品，避免工作过程中频繁走动，以破坏环境带来杂菌，工作台上铺好湿毛巾，点燃酒精灯。
(二)实验材料及用品准备
1病组织材料
玉米小斑病病叶
水稻纹枯病病叶
水稻白叶枯病病叶
2用品准备
0.1%升汞溶液(广口瓶盛装)；
95%酒精(广口瓶盛装)；
1000ppm链霉素；
瓶装牛肉膏蛋白胨培养基；
瓶装马铃薯琼脂培养基；
此外，还有以下备品，无菌水1瓶，灭菌培养皿6付，灭菌1毫升吸管2支，解剖剪、 解剖刀和镊子各1把，移植环，移植钩、酒精灯、珐琅盘和试管架各1个，毛巾1条，玻璃铅笔1支及火柴等。
实验步骤
（一）玉米小斑病与水稻纹枯病原分离（组织分离法）
1、取样。取患玉米小斑病、水稻纹枯病的病样，分别切取材料2-3mm长的病健交界处。
2、表面消毒。将病组织用清水洗净，接着放到75%酒精里浸泡30s，然后放到0.1%升汞里浸泡0.5~1min，最后用无菌水洗3次。
3、培养。把材料放到PDA培养基上并在25℃培养箱里培养2~3天，观察结果。
（二）水稻白叶枯病原分离（稀释分离法）
1消毒：将剪下的植物组织用清水洗干净，然后用75%的酒精浸泡30秒，在用0.1%的升汞洗0.5~1分钟，最后用无菌水洗涤3次。
2捣碎：取用一个灭菌小皿，向内滴加1~2滴无菌水，然后灭菌剪刀剪碎已洗涤好的组织，放入水中静置5-10分钟，制备成菌悬液。
3划线：用接种环取一环菌悬液进行平板划线。
4培养：将平板倒置，写标签，至于28-30摄氏度培养，2天后，观察分离结果。
植物病原真菌玻片标本制作
1.内容、材料和方法
实验材料：苦瓜霜霉病病叶、竹子黑痣病病叶
实验器材：解剖针、剪刀、载玻片、盖玻片、无菌水、立体显微镜
2.实验步骤
（一）苦瓜霜霉病病原装片制作
1取苦瓜霜霉病病叶，用剃刀或解剖针 轻轻刮取苦瓜霜霉病病叶上的白色粉状物。
2在载玻片上点一滴绵蓝乳酚油，将针尖或刀片浸于绵蓝乳酚油中，使锈粉进入漂散于绵蓝乳酚油滴中。重复以上操作，待获得足够锈粉后，盖上盖玻片。贴上标签。
3显微镜下观察。
（二）竹子黑痣病病原装片制作。
1 取竹子黑痣病病叶，选取带黑色突起较多的部位，用刀片切取0.5*1 cm规格的薄片。
2.在立体显微镜下，徒手切片。
2 切得所需薄片后，置于绵蓝乳酚油的载玻片上，盖上盖玻片。用钝物轻轻压平，置于显微镜下观察。并贴上标签。
植物病害过塑标本的制作
材料：
熨斗，过塑机等
实验步骤
1.选取特征明显，典型的植物病害样本用熨斗烫平。
2.制作植物病害标签（包括病害名、拉丁名、采集地、采集小组和采集时间）。
3.一个样本对应一个标签放在一起，过塑。
线虫病害标本的采集、分离与鉴定
1.内容、材料和方法
塑料袋，铁铲，贝曼漏斗，解剖镜，显微镜，培养皿，酒精灯，解剖针等
2.实验步骤
1，采样 线虫多在植物生长高峰期，多数为夏末秋初。丰富于根系土壤。以植株为中心，用小铲取植物根部周围的土壤（深度为10cm）。装于塑料袋中。
2，分离 （贝曼漏斗法 ）
分离时在漏斗内放大小适中的金属网，筛上铺纸巾，漏斗下面接橡皮管，橡皮管下接离心管，加样本于网的纸巾上，加完样后紧贴漏斗边缘往漏斗里加水没过土样，但不没过纸巾边缘。
3，鉴定 经过一天左右，取下离心管，再静置十分钟，吸去一半，把剩下的一半倒进培养皿，因为线虫多数沉淀了。把培养皿置于解剖镜下观察，把线虫吸到玻片用低倍镜观察。
四、实验成果展示
1.部分已鉴定的病害列表
共计16种病害，14个属
几种病害的展示：
a.玉米瘤黑粉病
黑粉菌（Ustilago）引起的病害.玉米果穗膨大，内含黑粉状孢子. 镜检可见散生的冬孢子。
b.花生褐斑病
由尾孢属（Cercospora）引起的病害. 花生叶斑为褐色且周围有黄晕。分生孢子针形、倒棒形、鞭形，多隔膜。
过塑标本展示
五、个人收获与体会
通过这次实习我有很多收获，感受颇深。
1.通过这次实习，让我学到了很多知识，学习到了一些常见植物病害的特征，记住了30个常见病害的拉丁文名字，以及怎样初步鉴别一种病害。通过实践，加深了对课本知识的理解及掌握，并能够将课本知识运用到实际生产生活。进一步提高了动手能力，提高了切片及玻片制作的技能。
2.虽然外出的时候天气比较热，但大家都坚持了下来，提高了吃苦耐劳的能力，同时增进了班级内同学的交流沟通，增强了班级的凝聚力。在实验室里，大家分工合作每个人都主动去鉴定病害查阅资料，这种知识的共享让大家可以成长的更快，学到更多的知识。
3.在植物病原物培养的实验中，我的真菌培养的结果较好，而细菌的培养结果不是很好。在以后的工作学习中，细心是很重要的，细心才能把事情做好。
4.这次实习也让我们在紧张的学习生活之余有了又一种乐趣，实习是一件快乐的事，大家一起集体合作，一起动手，本来就是一件很快乐的事。同时实习时老师的耐心讲解，也让我们获益匪浅。
六、问题及建议
1.实习时间有点紧，实习完两天就期末考试，让我们没有太多的时间复习；同时实习中，每天都很忙碌，进度有点赶。
七、参考文献
1.许志刚主编 《普通植物病理学》 高等教育出版社，2009
2.吕佩珂等撰摄 《中国蔬菜病虫原色图谱》，农业出版社，1992
3.《中国农作物病虫图谱》 农业出版社，1985
第二篇：普通植物病理教学实习报告1
贵 州 大 学 农 学 院
《植物病理学》
实
习
报
告
学院： 农学院 专业：农产品质量与安全 姓名： 刘文涛 学号： 0909010009 姓名： 王芳 学号： 0909010013 姓名： 雷淞淋 学号： 0909010016 姓名： 袁圆 学号： 0909010017 班级： 农安091 实习性质： 教学实习 实习地点：学校教学实习农场、花溪附近村庄农田、青岩蔬菜基地 指导教师： 姜于兰 成绩：
第一部分 实 习 概 况
一．实习时间：20xx年7月3日至20xx年7月7日
二．实习地点：学校教学实习农场、花溪及附近村庄农田、青岩蔬菜基地
三．实习组员： 雷淞淋、王芳、刘文涛、袁圆
四．实习目的：
本次教学实习是《植物病理学》专业课程的重要组成部分，通过课程教学实习，掌握几种重要作物病害症状的特点及病原物形态特征，了解病情调查、病害标本的采集和制作病原的鉴定以及病害的田间诊断调查研究的常规方法，提高学生诊断和研究病害的能力。
五．实习内容概况：
项目一：植物病害标本的采集和干标本制作
项目二：植物病害标本的保藏
项目三：病原鉴定植物病害诊断
第二部分 实 习 内 容
（一）、植物病害标本的采集和制作
一．目的要求：基本掌握植物病害标本的采集和制作方法
二．材料用具：剪刀、塑料袋、标本夹、草纸、麻绳、
三．内容与方法：
（1）植物病害标本的采集
具体内容：
20xx年7月3日 花溪及附近村庄农田：玉米大斑病、玉米锈病、豇豆锈病、白菜霜霉病、莴苣霜霉病、葱锈病、辣椒黑根病
20xx年7月4日 去花溪蔬菜地及养牛村采集标本：菜豆轮纹病、梨锈病、
20xx年7月5日校园内进行采集标本：茄子褐纹病、芹菜大斑型枯斑病、辣椒疮痂病、黄瓜霜霉病莴苣褐斑病。
20xx年7月7日去花溪青岩蔬菜基地采集标本：
（2）植物病害标本的制作方法
1. 标本的分类:将分好类的患病植株的各患病器官再次按不同特征和类别在干净的桌子上铺开，如可把相同的病害放在一起以便于标本的制作。在鉴别的同时应即时进行干标本或液浸标本的制作，以避免因时间的原因而造成如叶片萎缩等问题。
2.标本的制作：将分好类的标本用标本夹分别夹好。在这里我们分工合作，一个同学负责夹标本，另一个负责写标签，这样就提高了我们的效率。将知道的写清楚，不知道的就暂时只写日期和作物的名字，有的也只是随便采集地名，这样便于日后的回忆和分辨。对于不清楚病害的植物我们在鉴定病害的时候才将我们的鉴定结果写上。
干标本制作的一些心得:
①一定要注意水分含量比较高的植物，在用草纸的时候可以增加用量，从而避免发霉或者影响到上下层标本的干燥程度。
②可以把标本夹带到日光充足的地方晒晒，这样有助于水分的蒸发和干燥。
③勤换纸。这个是成败的关键，一天应维持在2次以上的更换次数。
液浸标本的制作：
这种方法多用在果实、块茎、茎等多肉的植物部位，以供展览和教学示范用。有些标本如多汁的果实、块茎、块根及多肉的子囊菌和担子菌的子实体等，不适于干制，而且有些标本还需要保持原色，须用浸渍法保存在标本瓶中。
液浸标本制作的要求是病害采集完后，有部分标本需要用液浸的方法制作才能更好的保存。根据需液浸标本具有的不同性质，有不同的功效的浸渍液，类型如：
①普通防腐性浸渍液：只适于防腐没有保色的作用
②保存绿色标本液
③保持红色标本液
④保存黄色及桔红色标本液
⑤保持真菌色素的浸渍液
同时，液浸标本的封口方式也很有讲究。
（二）、植物病害标本的保藏
一．目的要求：了解植物病害标本的保藏方法。
制好的标本，除保存在标本瓶中的浸渍标本外，绝大部分是干制的腊叶标本。保存腊叶标本，一般采用以下两种方法。
①把标本装在标本盒中，主要适用于教学示范标本和展览用标本。
②先将标本封在适当大小的普通油光纸夹中，再将其置于牛皮纸袋或牛皮纸中。
将做好的标本放在实验室进行保藏，这是所有的实习任务完成后要做的。干标本放在标
本盒中置于干燥阴凉处保藏，液浸标本可放置在柜子里。
这样我们的标本保藏工作就做完了。
（三）、植物病害的诊断
一．目的要求：通过实习，掌握植物真菌、细菌、病毒病害的症状特点，掌握植物真菌、细菌和病毒病害的田间诊断方法。
二．内容与方法：
真菌病害的初步诊断是在田间进行的，我们根据采集的标本，观察其外观特征，通过对植物病害的了解，在什么季节有什么样的病害产生等对其可以进行初步诊断其是侵染性还是非侵染性病害。具体的做法主要是在田间根据自己的观察或是老师的讲解进行初步诊断。
如无法确认，则需将其带回实验室，借助显微镜，参照有关书籍等进行更具体的诊断。 另外，在实习中我们也碰到了气候斑等非侵染性病害，要是经验不足的人，一定会以为是病毒病害，以为其没有病征。这也提醒我们在实习的时候要把眼睛擦亮，思维开阔才行。
（四）、植物病原真菌的鉴定
一．目的要求：过实际操作，基本掌握标本病原的鉴定方法。
二．材料用具：显微镜、挑针、擦镜纸、载玻片、盖玻片、病叶等。
三．内容与方法：
80%左右的植物病害是由植物病原真菌引起，因此植物病原真菌的鉴定在普通植物病理学教学实习中占有十分重要的地位。
具体方法：
1．将采集回来的标本在不破坏其病原体和症状的情况下，进行简易的清洁工作，；
2．用挑针在有病原物的地方挑取一点病原，将其制作成玻片；
3．在显微镜下寻找并观察病原物特征，初步鉴定孢子种类；
4．查看相关书籍，查找对应的孢子名称；
5．进一步鉴定出病害名称，并画出孢子特征图。
第三部分 实 习 总 结
（一）、实习体会
经过本次实习，让我懂得知识不仅仅是从课本上学来的，还要深入田间，了解病害的基本情况。此外，明白了病害的发生不仅局限于病害的发病情况，还与田间管理有关。“书上得来终觉浅，不若田间半日长”，深深地的让我理解了田间了解病情的重要性，只有以“课本知识”为基础理论，以“田间知识”为拓展方向，才能做好植物病害这一大课题，才能解决植物病害这一问题。当然，随着植物病害防治的进步，病害也在不断进步，所谓“道高一尺魔高一丈”，问题的关键不在于彻底解决植物病害这一问题，而在于将植物病害，充分的、有效的控
制在一定范围内，极高的提高农业产率。毛主席说“一切反动派，都是纸老虎”。从农业上来讲，“一切的病虫害，都是纸老虎”。只要一手抓理论知识，一手抓田间知识，一切问题都能迎刃而解！采取“两手都要抓”，以消灭植物病害为目的，以有效控制植物病害为基础，争取以植物病害消灭于萌芽状态为崇高理想，为中国农业做贡献，为老百姓谋农业，彻彻底底解决植物病害这一块。在不污染环境的情况下，为这一理想，这一目标，不懈努力，不懈奋斗！
实习在同学和老师们的汗水和勤劳中结束了。作为我们专业重要的学科之一，这次实习更是让我们受益匪浅，使我们体会到了一个农安工作者道路的艰辛。
通过这次实习，使我们将学习和实践联系了起来。让我体会到了一些学以致用的好处。掌握了正确地描述一些病害症状的方法，加深了对一些植物病害的感性认识，了解了一些症状在病害诊断中的作用，了解了植物病毒、细菌和真菌所致病害的外部症状的区别，并掌握利用这些特征进行诊断的一般方法。通过这次实习，我了解一些预防措施，我们不能根除病害，但我们能认识病害规律后可以预防病害的发生。同时，通过这次实习，磨砺了我们的意志，增强了我们团队协作的意识和加深了对彼此的了解。
植物病理学的实习主要是采集病害植株，在还没有采集之前，我以为采集植物应该是很容易的，但真正开始的时候，我才知道，其实病株的采集工作，并不是想象中那么简单的。我深刻体会到“经验”对于农安工作的意义所在。对于缺乏经验的我们，在经过病害植株的时候，完全视为不见。而老师经过的时候，就可以轻易的发现，当提醒我们它是有病的时候，我们才蜂拥而至地去采集。我经常会将虫害叶子拿给老师帮忙认，她看一眼就知道这是虫害而并非病害。从这方面就可以看到，“经验”的重要性。同时，也告诉了我们，只具有丰厚的理论知识对于一个合格的农安工作者来说是不足的，农安工作是一份重实践的工作，还应有充足的实际操作来充实自己，而“经验”就是最好成果和工具。
实习中，每一个环节，自己都亲身经历过，所以知道每一步都是多么的不容易。长途跋涉的采集过程、操作细致的鉴定步骤、费力繁琐的标本制作，可以说辛苦的同时，也是一个考验我们耐力的过程，而当我们见到病株的时候、鉴定到新的病原物的时候，成功的喜悦也是难以言喻的。
以前在书本学习的知识在这次的实习中得到很极好的验证。非侵染性病害和侵染性病害是植病诊断首先要分清楚的事情。经过这次实习，我意识到在接触病害的时候，特别是没有病征的病害，我们应该把把想象的空间放大，不能单纯以为无病征的就是病毒病害，因为譬如气候等造成的非侵染性病害的病状和病毒的病状非常的相似。
鉴定的过程，我始终认为是最难的。挑取病原物是很有讲究的，挑针的力度把握要合适，用力太轻无法挑取病原物，用力过猛不仅挑不到病原物，还有可能连寄主的组织一同破坏掉。针对比较干的叶片，可以在病原物的部分滴少许水，这样可以提高挑取的成功率。另外，制片的时候要保证载玻片上的病原物没有其他病原物的污染。用显微镜的时候，不能急，应该慢慢调试。在参考书籍的选择上不宜选年代过久的鉴定书，因为随着植病的发展，很多属名或者病原物的名称等都有少许的改动，特别是在无性和有性阶段不同上，所产生的名字也是很多的，这给我们的鉴定带来一定的难得，但也要求我们要分清其无性和有性阶段。
压标本是很繁琐的一个过程，一定要有耐性。标本一定要干，否则就会发霉，可以带标本到日光充足的地方晒，这样可以有效地蒸发水分。不过，最有效的还是换纸，换纸讲究的是一个“勤”字。刚开始的时候，没有充分体会到水分给标
本带来的损害有那么大，所以换纸没有很勤。后来在老师的提醒下，才意识到这个问题。所以我们的标本中，前期的可能有少许的发霉，但后期的标本会有很大的改善。
最后就是这份实习报告和名录了。名录的画图部分还是要认真的，平时自己的画图能力还是可以应付这些的。实习报告，我觉得要讲求真实，这个是最重要的，如果里面全是体面的“官方语言”，那么实习的意义就没有了。
总之，这次实习的意义是肯定的，积极的，受益匪浅的。虽然老师和同学都很辛苦，但是笑声始终贯彻整个实习过程，同学们的交流多了，我们班也更团结了。
最后把我在实习总结上的感言附上： 书到用时方恨少； 理论和实践的存在巨大的差异； 基本功不够扎实，需要提升自己； 需要有吃苦耐劳的精神； 团队精神很重要； 分析问题要全面； 无菌操作需要细心、耐心； 亲自动手之后才发现做玻片标本是一件很艰难的事情； 当自己做了一个比较好的标本的时候那种喜悦是根本无法用言语来表达； 需要提高自己的动手能力，提高专业技能很重要；科学需要严谨细致，不能有丝毫的马虎，需要提升自己的科学素养；真正做过之后，才发现个中艰难，所以更应该尊重他人的劳动，好好珍惜他人的劳动成果。
在总结的最后，还要感谢带我们实习的姜老师，您辛苦了！
（二）、提出的相关建议
1、
2、
第四部分 实习日记
第五部分 病害名录
