实验三 普通显微镜的构造与使用方法

一、实验目的和要求：

1.     熟悉两类显微镜的构造和原理

2.     正确掌握两类显微镜的使用方法

3.     牢记显微镜使用时的注意事项

二、显微镜的种类及原理

1.光学显微镜的类型

光学显微镜主要有以下几种类型：普通光学显微镜、体视显微镜、倒置显微镜、暗场显微镜、相衬显微镜、偏振光显微镜、微分干涉衬显微镜、荧光显微镜、万能衬显微镜、电视衬显微镜。其中普通光学显微镜、体视显微镜是海洋生物学实验经常使用的显微镜。

2.普通显微镜的构造和使用方法

普通显微镜的构造可分为光学系统和机械装置两部分（图1-1）：

1 ）光学系统

<1>．物镜：放大倍数越高越长。接近标本，因此也叫接物镜。物镜安装在镜筒的下端。它的作用是将标本作第一次放大，然后再由目镜将第一次放大的像作第二次放大。物镜是决定显微镜性能的最重要部件，即决定分辨力的高低，显微镜越好，分辨力越高。在使用高倍镜时，由于工作距离短，要特别注意不要使物镜直接碰到标本片，以免损坏镜头。

<2>．目镜：安装在镜筒上端，作用是把已经被物镜放大***的物象进一步放大。它相当于一个放大镜，并不增加显微镜的分辨力，一般常用的目镜放大倍数为4—20 倍。

<3>．聚光器：载物台中央，通光孔下方的聚光镜和可变光阑合称聚光器，聚光镜相当于一组凹透镜，可汇集来自内置光源的光（或反光镜反射的光）。可变光阑又叫光圈，位于聚光镜下方，由十几片金属薄片组成，中心部分形成圆孔，推动光圈的把手，可以随意调节园孔的大小，选择适当的光强度。

<4>．照明器：也称内置光源，通常采用高亮度、高效率的卤素灯和非球面聚光镜。

<5>．反光镜：没有照明器的显微镜都有反光镜，即安放在镜柱或镜座上的圆形平凹双面镜，可作各方向转动，对准光源（采自然光或灯光），把光线反射到聚光器。平面镜只具反光作用，凹面兼具反光和聚光作用，通常光线较弱时使用凹面镜，强光时用平面镜。

2 ）机械装置

<1>．镜座：显微镜最下方的底座，它支持显微镜的全部重量，并使显微镜能平稳放置桌面上。

<2>．镜臂：连接镜筒和载物台，并为移动显微镜时手执处。

<3>．镜筒：目镜下方的空园筒。

<4>．转换器：位于镜筒下方，可同时安放3—4 个不同倍率的接物镜，根据需要而转换使用。

<5>．载物台：连接于镜臂下端之方形或园形平台，用来放置玻片。中央有一通光孔，光线由此通过。载物台上有推进器，便于移动玻片进行观察。

<6>．调焦装置：镜臂上端有大小各一对螺旋，用来升降镜筒以调整焦距，大的为粗准焦螺旋，旋转一周可升或降镜筒10 毫米。小的是细准焦螺旋，旋转一周可使镜筒升或降0.1 毫米。另一类显微镜是通过升降载物台来调焦的，故调焦螺旋在镜臂下端。

三 显微镜的使用方法

从显微镜箱中取显微镜时，应以右手握住镜臂，左手托住镜座，置显微镜于桌上时，应小心轻放在相对座位稍偏左侧与桌沿有一定距离的桌面上，然后按以下步骤操作：

<1>.对光：旋粗准焦螺旋，使物镜的镜头离载物台2 厘米左右，移低倍镜至对准通光孔位置上，眼睛向目镜内观察，调节光源和光阑，至视野最明亮最均匀止。

<2>.放置玻片：将所备标本片放到载物台上，调节推进器使待观察材料对准通光孔中心。

<3>.调节和观察：转动粗准焦螺旋，使低倍物镜的镜头距玻片约1 厘米左右，然后眼睛再向目镜中观察，同时缓慢调粗准焦螺旋，稍微上下移动，到物象清晰为止。目镜中备有“指针”，可转动目镜，使指针指对所需观察的特定部位，以利再观察和绘图等。

<4>.需要进行高倍镜观察时，应先移动玻片，使待观察部位处于视野正中，然后转开低倍物镜，让高倍物镜对准通光孔，一边向目镜中观察，一边小心旋动细准焦螺旋，至看清物象止。

<5>.显微镜放大倍数计算：显微镜的放大倍数＝物镜放大倍数×目镜放大倍数，如目镜为10×，物镜为40×，则放大倍数为400×。

四 注意事项

<1>.取镜时，如发现显微镜损坏或没按规定放置时，报告老师，并填写实验室情况登记表。显微镜是较为贵重、精密的仪器，取、放时要小心，不得随意转动螺旋或拆装其他零部件。

<2>.擦拭时，镜头要用擦镜纸擦，动作要轻，然后用吸球吹数次。金属部分可用干净的绸布（或纱布）擦。

<3>.不可让水滴，特别是酸、碱或其它试剂、染色液等流到载物台上，更不要沾到镜头上。若出现上述情况，及时擦干。

<4>.使用物镜应先低倍后高倍，用高倍物镜观察时，如需更换玻片，应先升高镜筒(或下降载物台)，取下玻片，换上新片后，按从低倍到高倍的过程重新进行。使用细准焦螺旋时，一定要注意，不能一直朝一个方向旋动，否则会损坏显微镜。

<5>.观察完毕，有照明器（即内置光源）的显微镜，需切断电源，并认真填写显微镜使用卡（包含使用者姓名、专业、使用日期和显微镜正常与否等内容，若有故障，则要写明具体情况，并报告老师），然后转动粗准焦螺旋，下降载物台，使镜头离开玻片，取下玻片，用清洁纱布把机械部分擦干净，

用擦镜纸把光学部件擦干净，再把物镜转离通光口，上升载物台，使之贴近物镜，（没有照明器的显微镜还需将反光镜放垂直），然后放入镜箱。

第二篇：实验一生物显微镜的构造和使用方法

实验一 生物显微镜的构造和使用方法

一、目的要求

（一）熟悉生物显微镜的构造及其功用，正确掌握显微镜的使用方法并牢记使用时的注意事项。

（二）学习低、高倍镜的镜检技术。

二、实验内容

   （一）观察显微镜的各部分结构，理解其基本性能。

   （二）学习使用显微镜的方法。

   （三）初步认识几种类型的显微镜。

三、材料和用具

   电子生物显微镜、载玻片、盖玻片、擦镜纸、牙签、 洗耳球，甲基蓝染色液、滤纸。

四、操作与观察

（一）显微镜的基本结构：

    显微镜是实验室中最常用的仪器。我们要了解它的基本结构，并学会使用显微镜的方法。

显微镜的中部有一弯曲的柄，称镜臂；基部有一马蹄形部分，是镜座。自柜中取用时，用右手握紧镜臂，左手托住镜座，保持镜体直立，轻轻放置于桌上，观察各部构造。

镜座上的短柱叫镜柱。镜臂基部有一个方形或圆形的平台，是载物台（或称镜台）。台的中央有一圆孔，可通过光线。两侧有压片夹，用以固定玻片标本。现代的显微镜具镜台X-Y驱动器，用以固定和移动玻片标本。在圆孔的下面，有由一片或数片透镜所组成的聚光器，有集射光线于物体的作用。在聚光器下方有反光镜，可将光线反射至聚光器。此镜一面平，一面凹。凹面具有较强的反光性，多用于光线较暗的情况下；光线较强时用平面镜即可。电子显微镜的光源来源于内光源，位于镜座靠后方。镜座右侧臂有调节螺旋，可以前后调节改变光线的强弱。光线较强适于观察色深的物体；光线较弱适于观察透明（或无色）的物体。

在载物台的圆孔上方，有一附于镜柄上端的圆筒称为镜筒，其上下两端附有镜头。现代的显微镜一般有两个镜筒。两镜筒之间的距离，可按观察者双目的的距离调节。

镜筒上端为接目镜（或称目镜），可从镜筒内抽出。接目镜有低倍和高倍之分。

在镜筒下端有可放置的圆盘叫旋转器，下面附有2～4个接物镜（或称物镜）以螺旋旋入旋转器内。接物镜也有低倍和高倍之分。转动旋转器可换用接物镜。

在镜臂上有两组螺旋。大的叫粗调焦器，小的叫细调焦器。现代的显微镜粗、细调焦器常组合在一起，外周粗的螺旋为粗调焦器，小的叫细调焦器。用调焦器调焦点。粗调焦器升降镜筒较快，用于低倍镜调焦；细调焦器升降镜筒较慢，用于高倍镜调焦。

接物镜有低倍和高倍之分。较短的是低倍，一般放大10倍（10×）；较长的是高倍，一般放大40倍（40×）、油物镜放大100倍（100×）。接目镜也有高低倍之分，较长的是低倍，一般放大5倍（5×）或6倍（6×），较短的是高倍，一般放大10倍（10×）、12倍（12×）或15倍（15×）。

显微镜的总放大倍数是接目镜的放大倍数与接物镜放大倍数的乘积。例如，作用5×接目镜与10×接物镜，则总放大倍数是50倍。使用10×接目镜与40×接物镜，则总放大倍数是400倍。

（二）显微镜的使用方法

    1．光线的调节：使用显微镜时，应使镜臂向着自己（现代显微镜使镜臂反向对着自己），摆好显微镜，平放在实验台上。转动粗调焦器，把镜筒向上提起。转动旋转器，使低倍接物镜对准载物台的圆孔。二者相距约2cm左右，打开光源按钮，向前向后移动按钮，两眼对着双筒接目镜观察，调节光线的强弱至适宜强度。

2．低倍镜的使用：将需观察的标本装片放在载物台上，使标本正对中央圆孔。用玻片夹固定。俯首侧视接物镜，并顺时针方向旋动粗调焦螺旋，使载物台上升到装片与接物镜约0.5厘米处。危重双眼全睁自目镜观察，并向逆时针方向慢慢地转动粗调焦螺旋，使载物台下降至能见到物像为止。为使见到的物像更清晰，再来回转动细调焦螺旋。

3．高倍镜的使用：需用高倍镜时，一定是在上述低倍镜下能看清物像的前提下进行。首先将要详细看的部分移到视野正中央，转动转换器，换高倍物镜。转动细调焦器，上下调节，使物像达到最清晰为止。

电子显微镜

（三）镜检练习

    1、字母或汉字观察：取干净载玻片，在其正中用钢笔写上一个英文字母或汉字，字体越小越好，于低倍镜下观察，上下左右轻轻移动装片，观察物像与实际物像及物像移动方向如何？思考一下原因。

    2、人口腔粘膜上皮细胞的观察：取一干净的载玻片，放一滴清水，用消毒的牙签从口腔颊部轻轻地刮取一点粘膜物，置于载玻片的水中混匀，再将盖玻片一边与水外缘相接，然后将盖玻片以45°倾斜角匀速放下，制成涂片标本。依次进行低、高倍镜镜检。

（四）便用显微镜的注意事项

    1、加强责任心，养成爱护仪器的习惯，严格操作规程。

    2、取放显微镜时必须一手握镜臂，另—手托住镜座，禁止单手提着行走。

3、禁止拆散显微镜上任何部件。

    4、镜检时力求坐姿端正、自然、舒适，双目同时睁开观察，这样即利于绘图，又可减少

眼睛疲劳。

5、每次镜检，不论物体大小，其顺序必须是先低倍后高倍，最后用油浸镜。

    6、低倍镜检时必须一边俯侧观察载物台上升一边转动粗调螺旋，然后才能在目镜中观察降低载物台找物像。用高倍镜和油浸镜时，绝不能转动粗调螺旋。

7、观察带有水或其他药液的标本，一定要加上盖玻片，并用滤纸吸去盖玻片周围溢出的水或药液，以免接触腐蚀显微镜。

    8、显微镜各部分必须保持清洁。光学系统部分切勿用手、布、粗纸等擦拭，必须用擦镜纸轻轻揩擦，若镜头等光学部分积有灰尘时需先用洗耳球吸去灰尘后再擦拭，必要时可略蘸些二甲苯进行揩擦。金属等机械部分有灰尘时，可用纱布擦拭。

9、显微镜用毕后，必须把接物镜移开。使两个高、低倍接物镜以“八”字形朝前方，然后取出装片。拔掉电源，放回原位，罩好防护罩。最后要按仪器使用情况登记本如实填写该仪器使用情况。

五、作 业

1、绘制人口腔粘膜上皮细胞图。

2、使用显微镜应注意哪些事项？

3、由低倍镜转高倍镜应特别注意什么？