敏筛过敏源检测系统工作制度
敏筛过敏源检测系统采用免疫印迹技术定量检测血清中sIgE和总IgE,sIgE分级的测试结果可以用于判断患者对某一过敏原的过敏程度。应用一专用CCD相机进行快速分析的敏筛系统是一技术先进,具有创意过敏原定量检测系统,它将科研用途的免疫印迹技术用于了实验室日常诊断。
一、敏筛过敏源检测系统安全工作制度
1、需做检查的患者,由临床医师据病情填写申请单。
2、采取患者清晨空腹静脉血2-3毫升,立即送检,采血过程遵循无菌原则。
3、血液标本不能立即检测时,应尽快放置于4℃,冰箱保存。
4、检测人员经过正规培训,熟悉仪器性能,严格执行操作规程。
5、建立健全资料登记、保存,便于日后查找。
6、检测仪器注意防尘、防污,定期保养维修。
7、注意安全,下班前关闭仪器,拔出电源,门窗加锁,过敏源检测室保持安静、整洁。
二、敏筛过敏源检测过程
(一)准备试剂,配制清洗液
从2-8℃冰箱中取出试剂(洗板液提前2-3小时,试剂和标本提前15分钟),并恢复至室温。
抽取清晨静脉血2ml,静置
(二)准备实验工具,开始实验
1、固定频率混匀仪(35振/分钟)和孵育暗盒
2、撕开试剂条包装袋,取出需要的试剂条后,立即密封好试剂条包装袋(注意:拿取试剂条时避免用手指接触硝酸纤维素膜);使用油性记号笔在试剂条手柄段标注样本编号
3、操作开始:
(1)将试剂条固定在孵育暗盒手柄上,试剂条水平固定在手柄上
(2)将配制好的清洗液注在试剂条上,把硝酸纤维素膜浸湿
轻轻摇晃手柄,确保硝酸纤维素膜完全浸泡在清洗液内,倾斜角度不必太大,以避免清洗液溢出
(3)使用移液器在试剂条上加入250微升的血清样本
孵育暗盒平放在混匀仪上(四颗防滑垫向上);启动混匀仪,振荡孵育45分钟
孵育结束后,将条带内的样本倾倒在水槽中,使用洗瓶均匀冲洗硝酸纤维素膜,
确保每根试剂条保持冲洗5秒钟,在试剂条内注满洗液,轻轻摇晃手柄以增强清洗效果;废弃的清洗液倾倒在水槽中(重复以上清洗过程3-5遍),在纸巾上轻轻拍打试剂条,去除多余的清洗液。
(4)保持试剂瓶竖直,在试剂条中加入标记有生物素的抗人IgE抗体(5滴)(白色)
混匀45分钟,洗板,拍干。
(5)保持试剂瓶竖直,在试剂条中加入酶标链霉亲和素(5滴)(红色) 混匀20分钟,洗板,拍干。
(6)保持试剂瓶竖直,在试剂条中加入底物(5滴)(蓝色)
4、混匀20分钟,使用洗液或者大量蒸馏水冲洗试剂条以终止试剂条显色,使用电吹风快速干燥
5、使用专用成像系统读取定量结果
(三)实验结束
将剩余的试剂条和试剂、装有清洗液的洗瓶放回冰箱2-8℃冷藏
如何配置洗板液:准备一只容量为500ml的量筒,注入480ml蒸馏水(或去离子水)。
将浓缩洗液全部倒入洁净的洗瓶中,将480ml蒸馏水注入洗瓶,静置10分钟(配制好的清洗液需在2-8℃环境下保存,8周内有效)
第二篇:敏筛定量过敏原检测系统
敏筛定量过敏原检测系统
过敏性病群发生率很高,是临床常见多发病。免疫学检测对过敏性疾病的诊断、治疗及预后判定均具有重要意义,检测发现过敏源并采取有效措施避免与之接触,是过敏性疾病防治的基本原则。敏筛过敏源检测系统采用免疫印迹方法,定量检测人血清中过敏原特异性lge抗体(slgE)。
特异性过敏原被吸附于硝酸纤维素膜表面,置于反应槽中。用移液器加入病人血清后室温下孵育,标本中过敏原特异性的IgE抗体就会与过敏原发生反应,并结合到硝酸纤维素膜上。将多余的抗体洗脱后,再加入生物素标记的抗人IgE抗体,室温下孵育,洗脱未结合上的抗抗体。然后加上碱性磷酸酶标记的链酶亲和素,室温下孵育,链酶亲和素会和生物素结合。将未结合上的酶标链酶亲和素冲洗干净。
在加入BCIP/NBT酶作用底物孵育后,发生特定的酶显色反应,试剂条上出现沉淀。颜色深浅与血清中slge抗体含量成正比。待试剂条干燥后,有专用过敏原检测仪检测,读取定量检测结果。
敏筛定量过敏原检测系统由一专用快速阅读仪及配套汉化软件、孵育暗盒和固定频率的混合仪组成,系统具有极其良好的重复性、敏感度、特异性和准确性。 重复性:批内差:平均值为6.2%,批间差:平均值为3.1%。
142例血清标本与皮试的737样本的比较,灵敏度为95.1%,特异性为80.2%,准确性为88.3%。
881例血清样本与ELISA单项过敏原检测对比,灵敏度为84.3%,特异性为95.0%,准确性为90.6%
系统特点:
1、一份标本可同时测定20余种slgE,包括总lgE的检测,定量表示结果。
2、操作简单、方便、成本低。操作仅需4个步骤, 2.5小时完成全部实验,一次可同时处理30份标本。
3、采用免疫学确认技术---免疫印迹技术,抗原非共价吸附于硝化纤维素膜,采用机器自动划线技术,可靠性高,特异性好,敏感度高。
4、融合了生物素-链霉亲和素放大技术,这一免疫酶技术中的放大系统,大大地提高了反应的敏感度和特异性,可以进行极微量的抗原检测,灵敏快速,结果高度准确可靠。
5、特别针对中国市场的过敏原组合设计,详尽科学的中文试验报告单。
6、汉化操作软件,简单便捷,易于操作,技术先进,系统优良。
7
、在所有的过敏原定量检测系统中,仪器成本远远低于其他任何产品,在所有
过敏原检测产品中,单一过敏原检测成本最低。
8、无需任何日常维护,售后服务有保障,高水品的专业品牌服务。
9、通过欧盟CE
试验结果:
敏感度:AllergyScreen/皮试:95.1%; AllergyScreen/CAP:84.3%;CAP/皮试:95.8%
特异性:AllergyScreen/皮试:80.2%; AllergyScreen/CAP:95.0%;CAP/皮试:76.0%
符合率:AllergyScreen/皮试:88.3%; AllergyScreen/CAP:90.6%;CAP/皮试:87.5%
1.原理:免疫印迹法
2.抽血样:2-3ml每次
3.检测项目按组分类,最多20项每组,最少10项每组
试纸条:需要提供医院地区,不同地区价格不同
仪器高度大概30-40公分,宽度是15-20公分,重量大概在3公斤左右。