药物半衰期的测定
目的：学习测定药物血浓度半衰期的基本方法
原理：半衰期为血药浓度下降一半所需要的时间。大多数药物按一级动力学规律消除，符合恒比规律
即㏒C/C0= —kt/2.303
公式中的C0、C的含义分别为t=0 的血药浓度及经过时间 t 后的血药浓度，因为C0 很难准确测定，又因药物消除的全过程皆符合公式（1），因此，从t1 时刻，血药浓度为C1，经过t 时间后的t2时刻，血药浓度C2，符合公式（1），
即得：㏒C2/C1= — kt/2.303 (2)
又根据半衰期的定义，从（2）式又可得：
㏒1/2= —kt1/2 /2.303 (3)
(3)÷(2)式得： —㏒2 t1/2
㏒C2/C1 t
该公式中为时刻血药浓度，为时刻血药浓度，为从时刻至时刻的时间间隔，所采用的单位即的单位，如 等。
因此在相同的条件下，只要测出时刻血浆中磺胺嘧啶的光密度，即可求得之值
（一）磺胺嘧啶的测定方法
现以磺胺嘧啶为例，学习药浓半衰期的测定方法。血浆中游离磺胺的测
定，是根据显色原理设计的。游离磺胺在酸性溶液中可与亚硝酸纳（）起重氮反应，产生重氮化合物，后者在碱性溶液中再与显色剂麝香草酚反应，生成橙红色偶氮染料。反应过程如下：
重氮化反应：
显色反应： 重氮+麝香草酚偶氮
偶氮颜料的深浅与磺胺的浓度有关，可用光电比色法测出其光密度。通过与标准品光密度的比较及运算，可推算出磺胺药的血药浓度。
计算公式如下：
器材：兔手术台，手术器械，72-2型分光光度计，离心机及试管，吸管，滴管
药品：4%磺胺嘧啶钠，5%三氯醋酸，0.5%，0.5%麝香草酚（用20%新鲜配制），肝素 动物：家兔
方法：
1、取家兔一只，由耳缘静脉注射4%磺胺嘧啶钠2.5，记录给药时间。
2、静脉注射肝素750抗凝，于给药磺胺嘧啶钠后30分钟及1小时，从对侧耳缘静脉各抽血
5（分别称为侧1、侧2）分别置于烧杯中，抽血前用肝素湿润针管抗凝。
3、用1注射器抽取上述血液各，立即置于预先盛有5%三氯醋酸（提供酸性条件并可使血液
中蛋白质沉淀）5的试管中，充分摇匀，5后经1500离心5，然后取上清液1.5标记待用。
4、标准液的配制：0.02%磺胺嘧啶钠溶液0.5，加入5%三氯醋酸5中摇匀待用。
5、各比色管的配制：
6、以上操作完成后，用72-1型分光光度计进行比色。选用波长520处的光密度，并进行运
算，推算出注射磺胺嘧啶钠30及1后血中该药浓度。
7、计算出磺胺嘧啶钠的半衰期。
第二篇：药物血浆半衰期的测定
磺胺嘧啶钠药物代谢动力学参数测定
[目的] 1.了解磺胺类药物(sulfonamides)在动物体内随时间变化的代谢规律。
2.掌握药代动力学参数的测定及计算方法。
3.了解药代动力学参数的测定及计算的临床意义。
[原理] 血浆半衰期是指血浆药物浓度下降一半所要的时间。临床上常用药物多数药物在体内按一级动力学的规律而消除，也就是血中药物消除速率与瞬时药物浓度成正比，根据这一规律可知：药物静脉注射后，如以血浆药物浓度的对数值为纵坐标，时间为横坐标，其时量关系常呈直线。
该直线的方程式为：
①
药物血浆浓度半衰期（t1/2）为：
②
因此，我们只要求出药物的消除速率常数Ke，就可以得出药物的血浆半衰期。由公式（1）可推出
③，只要我们测出两个时间的血浆药物浓度，又知道这两个浓度变化的时间间隔，就可以求出Ke，进一步算出血浆半衰期。那么我们怎样才能测出任意时间的血药浓度呢？为解决这个问题，我们首先学习下面这个问题。
显色原理：
磺胺类药物在酸性溶液中，可使苯环上的氨基（-NH2）离子化生成铵类化合物（-NH3+），进而与亚硝酸钠起重氮反应，产生重氮盐（-N=N+-）。此重氮盐在碱性溶液中与酚类化合物如麝香草酚起偶联反应，生成橙红色的偶氮化合物。偶氮染料的显色深浅与磺胺的浓度有关。可用光度计测出其光密度，通过与标准品光密度的比较及运算，即可推算出磺胺的浓度。计算公式如下：
[材料]
器材：72型分光光度计、离心机、兔手术台、手术器械一套、动脉夹、动脉插管、磅称一台、1ml注射器三支和5ml一支、lml和10ml吸管各一支、2ml吸管5支、吸球一个、离心试管、试管架。
药品：20％磺胺嘧啶钠溶液（sodium sulfadiazine,NaSD）、10％肝素钠溶液、0.02％磺胺嘧啶钠标准液、7.5％三氯醋酸溶液、0.5％亚硝酸钠溶液、0.5％麝香草酚溶液（用20％NaOH配制）、20％NaOH溶液、20％乌拉坦溶液（Urethane）、蒸馏水。
动物：家兔，体重2kg左右。
[方法]
1. 血药浓度的测定：
（1） 麻醉：取家兔一只（实验前禁食12小时,不禁水），称重，用20％乌拉坦5ml／kg行静脉麻醉，然后固定于手术台上。
（2） 手术：可选用颈总动脉（或股动脉）。手术区剪毛，沿正中线切开颈部皮肤，切口约6cm左右，钝性分离皮下组织和肌肉，找出一侧颈总动脉并分离约2～3cm左右，在其下穿线两根，一根结扎远心端，一根备用。耳缘静脉注射肝素2ml。
（3） 插管：用动脉夹夹住动脉近心端，在于两线中间的动脉上剪一“V”形切口，插入动脉插管，用备用线结扎牢固以备取血用。
（4） 打开动脉夹放取空白血样2ml置于预先用1％肝素（或0.1ml肝素稀释10倍）浸过的离心试管中，摇匀标记待用。然后由耳缘静脉注射20％的磺胺嘧啶钠2ml／kg，于给药后15分钟及 45分钟各由动脉抽血2ml，分别置于同上试管中，摇匀待用。
（5） 用1ml注射器抽取上述血液各0.2ml，立即置于盛有7.5％三氯醋酸（提供酸性条件并可沉淀血中蛋白质）5.8ml的试管中充分摇匀，然后以 1500转／分的转速离心5分钟待用。
（6） 标准液的配制：取0.02％磺胺嘧啶钠0.2ml，加入到7.5％三氯醋酸5．8ml中，摇匀待用（标准管磺胺浓度200mg/L）。
（7） 各比色管的配制（见下表）
（8） 完成以上配制操作后，用7230型分光光度计进行比色，选波长520nm，以空白管调“0”点，读出标准管及各测定管光密度，并按以上公式计算t1/2。
2. 药代动力学参数计算：按下列公式计算出各药代动力学参数
（1）消除速率常数： （min－1）
（2）消除半衰期：t1/2=0.693/Ke （min）
（3）表观分布容积：Vd=D/C0 （D=400mg／kg×xxkg） (L)
（4）血浆清除率：CL=Ke·Vd （L/min）
［思考题］
1．测定半衰期有何意义？
2．根据Vd=D／Co，当用药剂量400mg／kg（D）你能计算出零时药浓Co及表现分布容积Vd吗？
［注意事项］
1.动脉插管后，由耳缘静脉注射肝素2ml。
2.取血试管取血前一定要用肝素浸润；每次取血之前要先将残血放掉。
3.每吸取一个血样时，必须更换注射器；加样时注射器头不要碰到三氯醋酸液面。
4.将血样加到三氯醋酸试管中应立即摇匀，否则易出现血凝块。
5.加亚硝酸钠和麝香草酚顺序不要混乱。
6.各吸量管注意分开使用。
7.注意各比色杯要清洗干净、擦干并匹配及吸取药液要准确。
8.离心时要注意离心管的配平。
9.注意严格按照7230操作方法进行操作。
