体液分别改变在家兔急性失血中的代偿作用

体液分别改变在家兔急性失血中的代偿作用【目的】本实验采用动脉血压的直接测量方法，观察神经和体液因素对动脉血压的调节作用，了解家兔急性失血模型的建立方法，观察家兔急性失血期间及停止失血后其动脉血压的变化及血红蛋白浓度的变化。 【原理】在生理情况下，人和…

体液分别改变在家兔急性失血中的代偿作用

【目的】

本实验采用动脉血压的直接测量方法，观察神经和体液因素对动脉血压的调节作用，了解家兔急性失血模型的建立方法，观察家兔急性失血期间及停止失血后其动脉血压的变化及血红蛋白浓度的变化。

【原理】

在生理情况下，人和其它哺乳动物的血压相对稳定，这种相对稳定是通过神经和体液因素的调节而实现的，其中颈动脉窦—主动脉弓压力感受性反射起着重要作用。此反射既可在血压升高时降压，又可在血压降低时升压，反射的传入神经为主动脉神经与窦神经。家兔的主动脉神经为独立的一条神经，又称减压神经，易于分离和观察其作用。在人、犬等动物，主动脉神经与迷走神经混为一条，不能分离。反射的传出神经为心交感神经、心迷走神经和交感缩血管纤维，心交感神经兴奋，其末梢释放去甲肾上腺素，去甲肾上腺素与心肌细胞膜上的b受体结合，引起心脏正性的变时变力变传导作用，心迷走神经兴奋，其末梢释放乙酰胆碱，乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体结合，引起心脏负性的变时变力变传导作用，交感缩血管纤维兴奋，其末梢释放去甲肾上腺素，去甲肾上腺素与血管平滑肌细胞膜上的a受体结合，引起阻力血管的收缩。

机体对一定量的急性失血有代偿能力。急性失血使动脉血压下降，血容量减少，在失血的瞬时，通过压力感受性反射和容量感受性反射，阻力血管、容量血管收缩、心脏活动增强以维持动脉血压。急性失血引起交感-肾上腺髓质系统兴奋，导致儿茶酚胺大量分泌，出现血管的明显收缩。静脉系统属于容量血管，可容纳血液总量的60%~70%。静脉的收缩可以迅速而短暂地增加回心血量。微动脉和毛细血管前括约肌比微静脉对儿茶酚胺更为敏感，导致毛细血管前阻力比后阻力升高更明显，毛细血管灌流不足，流体静压下降，使组织液进入血管，循环血量增加。抗利尿激素、血管紧张素Ⅱ、皮质激素的产生和分泌增加也参与急性失血的代偿。

本实验应用液压传递系统直接测定动脉血压。即由动脉插管、测压管道及压力换能器相互连通，其内充满抗凝液体，构成液压传递系统。将动脉套管插入动脉内，动脉内的压力及其变化，可通过密闭的液压传递系统传递压力，通过压力换能器将压力变化转换为电信号，用微机生物信号采集处理系统记录动脉血压变化曲线。

【预习要求】

1．仪器设备知识 参见第二章第三节 RM6240微机生物信号采集处理系统（或第四节PcLab和MedLab微机生物信号采集处理系统）。

2．实验理论 实验动物知识参见第二章第一节 生理科学实验常用实验动物的种类；第四章第一节 动物实验的基本操作、第四节 实验动物手术；统计学知识参见第5章第四节 常用统计指标和方法；生理学教材有关动脉血压的调节理论，病理生理学教材有关失血性休克理论。检索全文数据库中的相关研究论文，检索方法参见第五章第五节。

3．预绘制实验原始数据记录表格和统计表格。

【材料】

家兔，200g/L氨基甲酸乙酯或10g/L戊巴比妥钠，1000U/ml肝素，0.1g/L去甲肾上腺素，10-2g/L乙酰胆碱，放血瓶，血红蛋白比色计全套，动脉插管，血压换能器，微机生物信号采集处理系统。

【方法】

1．实验系统连接及参数设置

（1）颈动脉血压测量记录装置。将血压换能器固定于铁支柱上，其位置与心脏在同一平面。

（2）安装好放血装置使股动脉插管与放血瓶相连(瓶内预先盛60ml生理盐水)，打开三通将放血系统管道内的空气排出并充满生理盐水，然后关上三通。放血瓶内放入肝素0.5ml，记下瓶内液体量，调节放血瓶高度，使瓶内液平面距离颈心脏水平约65cm处可使血压维持在6.67kPa(50mmHg)左右。

（3）压力换能器输出线接微机生物信号处理系统第1或第4通道。

（4）微机生物信号处理系统参数设置：

① RM6240系统：点击“实验”菜单，选择“生理科学实验”菜单中的“兔动脉血压调节”。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数：1通道时间常数为直流，滤波频率100Hz，灵敏度12Kpa，采样频率800Hz，扫描速度：500ms/div。连续单刺激激方式，刺激强度5~10V，刺激波宽2ms，刺激频率30 Hz。

② PcLab和MedLab系统：点击“文件”菜单“打开配置”中的“动脉血压记录”项目。系统进入该实验信号记录状态。仪器参数：1通道放大倍数200、直流（DC）耦合，采样间隔1ms；串刺激方式，波宽2ms，刺激强度5~10V，时程1s，频率30 Hz。

.（3）血压换能器定标 实验室已将仪器和血压换能器系统进行了定标，无须再定标。定标方法见第七章实验16。实验过程中不能改变定标数值。

2．手术准备（参见第四章第一节 动物实验的基本操作、第四节 实验动物手术）

（1）家兔称重后，氨基甲酸乙酯按1g/kg体重的剂量于耳缘静脉注射麻醉。注意麻醉剂不能过量，注射速度不宜过快。

（2）动物仰卧固定缚于手术台上，固定四肢，前肢交叉固定，用棉绳钩住兔门齿，将绳拉紧并缚于兔台铁柱上。

（3）暴露颈部气管、颈总动脉、颈静脉、迷走神经和主动脉神经。用玻璃分针仔细分离右侧上述神经，各穿以不同颜色的细丝线以供识别。分离两侧颈总动脉和两侧颈静脉，各穿二线备用。

（4）给动物静脉注射肝素，剂量为1000U/kg体重。等1分钟后再进行下一步骤，以使肝素在体内血液中混合均匀。

（5）左颈总动脉插管 颈总动脉远心端结扎，近心端用动脉夹夹住，用眼科剪在靠近结扎处动脉壁剪一Ｖ字形切口，将动脉插管向心方向插入颈总动脉内，扎紧固定。

（6）用左手拇指和另外四指将股部皮肤绷紧固定，沿股腹面正中线从腹股沟下缘向膝部切开皮肤4~5cm。用止血钳分离皮下组织，暴露股部肌肉。用玻璃分针分离股动脉，分离出血管约2~3cm，在其下面穿入2根线，结扎远心端的血管，近心端用动脉夹夹闭血管。靠近远心端血管结扎线0.3cm处，用眼科直剪呈45°角剪开血管直径的1/3，用弯型眼科镊夹住切口游离尖端并挑起，插入血管导管2~4cm，在近心端结扎血管导管。利用远心端的结扎线再次结扎插管导管。

【模拟实验操作方法】

1．模拟实验窗口（见图6-2-13） 家兔颈部动脉插管用三通压力换能器和水银检压计相连，水银检压计指示动脉血压，仿真记录仪记录血压曲线。家兔股部股动脉插管通过三通阀与放血瓶相连。

2．鼠标点击手术刀并拖动至家兔颈部释放，记录仪描记动脉血压曲线。第一道记录动脉血压曲线，第二道记录心率，第三道记录实验项目标记。仿真记录仪面板设灵敏度、位移、纸速调节按钮，面板设数字显示框，分别显示记录仪第一道灵敏度、动脉血压、心率。

3．采血及血红蛋白测定 窗口出现颈静脉和采血注射器，点击注射器针芯采血，采血完毕后，窗口出现血红蛋白吸血管，点击吸血管胶头，取血完毕，出现血红蛋白比色计和蒸馏水试剂和吸管。待血样加入血红蛋白比色计后，点击蒸馏水试剂中吸管的胶头，并拖动至血红蛋白比色计的加样口释放，随着蒸馏水加入，测试样品呈现与标准管相同的颜色并显示血红蛋白的浓度。

4．鼠标器点击股动脉插管旁的三通阀，可进行放血操作。

5．测量按钮 按测量按钮，仿真记录仪显示所做实验项目的实验曲线，仿真记录仪面板按钮变为图标按钮，有放大、缩小、压缩、扩展、定位图标按钮，分别可使仿真记录仪内的实验曲线纵向放大或缩小，横向压缩或扩展，定位图标按钮可使所选记录曲线处的位置移到仿真记录仪左边框。

7．测量状态 在测量状态下，鼠标器在仿真记录仪内移动，可对实验曲线进行测量，并从仿真记录仪的面板数字显示框“压力”和“Time”中读出血压和心动周期时间。在曲线上点击，可测量相对值。拖动仿真记录仪面板上的滚动条，可使实验曲线左右滚动，显示前后实验数据曲线。

8．操作控件均有提示。鼠标点击“返回”按钮，程序返回到模拟实验窗口。

图6-2-13 失血代偿模拟实验窗口

【观察项目】

1．记录一段正常的动脉血压曲线，从颈静脉内取血0.5ml测定Hb浓度。

2．待血压稳定后，打开放血装置的三通阀，使动脉血放入放血瓶，持续失血3分钟后关闭三通阀，终止失血。连续观察放血过程中血压动态变化，于失血停止后10、20、30分钟分别采血，测定Hb浓度。

【实验报告】

1．题目。

2．署名 作者和合作者姓名及单位。

3．结构式摘要（目的，方法，结果，结论）。

4．材料和方法 主要实验材料，仪器装置连接和仪器参数。

5．观察项目和观察指标。

6．结果 列各项处理前后的动脉血压的收缩压，舒张压，平均动脉压，心率原始数据表格，用文字和数据逐一描述实验结果。实验结果曲线剪贴并标注。

来源：生物帮http://doc.bio1000.com/list-125.html  动物实验,实验动物,实验动物学 lb

第二篇：失血性休克

家兔失血性休克

【实验原理与目的】

休克是一种全身性病理过程，失血、创伤、感染、过敏等多种原因都可以引起休克。血容量急剧降低、血管容量扩大和急性心功能衰竭可以作为休克的始动环节。

本实验通过对家兔大量放血，使其血容量急剧降低，复制出家兔失血性休克模型，观察失血性休克时血流动力学改变及微循环变化，探讨其发生机制。

【实验对象】

家兔1只，体重2．0～3．0 kg。

【实验器材与药品】

1．仪器BL-410／BL-420生物机能实验系统(或MS一302生物信号记录分析系统)或二道生理记录仪，血压换能器，张力换能器。光学显微镜，超级恒温水浴器。

2．器械哺乳类动物手术器械一套，中心静脉压测量及输液装置，微循环观察装置(恒温灌流盒)，动脉导管，静脉导管，输尿管插管，记滴器，500 ml烧杯，5 ml、10 ml及50ml注射器，体温计，三通管。

3．药物生理盐水，0．5％肝素生理盐水(5 mg／ml)，3％戊巴比妥钠溶液，微循环灌流液(1％明胶台氏液)。

4．其他丝线、纱布、吸管、连接大号针头的胶管、硅胶管、擦镜纸。

【实验步骤与观察指标】

1．仪器装置按操作规程准备好BL-410／BL-420生物机能实验系统(或MS一302生物信号记录分析系统)或二道生理记录仪的血压、呼吸、尿滴记录装置(见《常用实验仪器》)，准备好微循环观察装置。

2．手术操作

(1)动物麻醉与固定：动物称重后，以3％戊巴比妥钠1 ml／kg(30mg／kg)静脉注射麻醉。将麻醉好的动物仰卧位固定于动物手术台上。

(2)备皮：剪去颈部、腹部及右侧腹股沟等手术部位的狗(或家兔)毛。

(3)颈部手术：在颈部正中切开皮肤(狗6～8 cm，家兔4～6 cm)，分离气管、左颈总动脉 和右颈外静脉。①行气管插管并连接马利氏鼓，通过鼓膜运动牵拉张力换能器的弹性敏感 梁活动，张力换能器与仪器连接，记录呼吸。②行左颈总动脉插管并经三通管一压力换能器 与仪器连接，记录动脉血压。③将静脉导管从右颈外静脉插入到上腔静脉入右心房口处(锁 骨下1-2 cm)并与中心静脉压(CVP)测量输液装置连接，行测量中心静脉压和输液用。

未 测CVP时，维持每分钟10一15滴输液速度，以保持管道通畅。记录呼吸方法也可在剑突处皮肤上缝一针，用线连接张力换能器，但这种方法当动物清醒挣扎时，容易损坏张力换能器。也可以用呼吸换能器记录呼吸，免马利氏鼓。

(4)股部手术：于右侧腹股沟动脉搏动明显处沿动脉走向切开皮肤4～5 cm，分离出股动脉，夹上动脉夹。用连接大号针头胶管行股动脉插管，暂不松开动脉夹，备放血用。

(5)腹部手术：

1)在耻骨联合上作下腹部正切口，长约5 cm，找到膀胱，在其背面膀胱三角区找到并分 离双侧输尿管，插入输尿管导管，用记滴器记录每分钟尿滴数或尿量。

2)在右侧腹直肌旁作6～8cm的腹部旁正中切口，钝性分离肌肉，打开腹腔后推开大网膜，找出一段游离度较大的小肠肠襻，轻轻拉出，置于微循环恒温灌流盒内，用显微镜观察肠系膜微循环。

3．观察与记录实验过程中动态观察记录的指标包括：动物一般情况、皮肤黏膜颜色、肛温、动脉血压、CVP、尿量和肠系膜微循环(血管口径、血流速和肠系膜毛细血管数及血液流变学参数)。

(1)放血前：手术完毕，待动物血压平稳后，观察与记录上述各项指标作实验对照值。

(2)放血造成休克：

1)松开股动脉上的动脉夹，预先在500 ml烧杯中加入肝素2 mg／kg，用于收集所放血 液。快速放血，在15 min内使平均动脉血压(MAP)降至40 mmHg(5．33 kPa)，通过调节放血量，维持MAP于40 mmHg，30 min。

2)测量放血量。

3)记录失血期间动物各项观察指标的改变，每5～10min记录1次，特殊变化随时记录。

(3)抢救：将所放出的血液用50ml注射器从静脉缓缓回输，输血完毕后观察30 min，每10 min记录1次各项观察指标变化。也可设计输入高渗盐水、胶体溶液等其他抢救方案。

【注意事项】

1．麻醉深浅要适度，麻醉过浅，动物疼痛可致神经源性休克。麻醉过程或麻醉后若出现呼吸暂停，应及时作人工呼吸。

2．尽量减少手术创伤引起出血。

3．牵拉肠襻要轻巧，以免引起创伤性休克。

4．血压换能器和动脉导管要排除气泡和加入一定量肝素抗凝。静脉导管一经插入后除非测量CVP，宜缓慢滴人生理盐水(10-15滴／min)，以保持管道通畅。

【思考题】

1．放血使MAP降至40 mmHg后即停止放血，MAP有什么变化?为什么?

2．急性大量失血是如何引起休克发生的?

3．为什么输回所失的全部血液后狗血压仍未能恢复至原来的水平?