家兔失血性休克实验设计
【实验原理与目的】
休克是一种全身性病理过程，失血、创伤、感染、过敏等多种原因都可以引起休克。血容量急剧降低、血管容量扩大和急性心功能衰竭可以作为休克的始动环节。
本实验通过对家兔大量放血，使其血容量急剧降低，复制出家兔失血性休克模型，观察失血性休克时血流动力学改变及微循环变化，探讨其发生机制。
【实验对象】
家兔1只，体重2．0～3．0 kg。
【实验器材与药品】
1．仪器BL-410／BL-420生物机能实验系统(或MS一302生物信号记录分析系统)或二道生理记录仪，血压换能器，张力换能器。光学显微镜，超级恒温水浴器。
2．器械哺乳类动物手术器械一套，中心静脉压测量及输液装置，微循环观察装置(恒温灌流盒)，动脉导管，静脉导管，输尿管插管，记滴器，500 ml烧杯，5 ml、10 ml及50ml注射器，体温计，三通管。
3．药物生理盐水，0．5％肝素生理盐水(5 mg／ml)，3％戊巴比妥钠溶液，微循环灌流液(1％明胶台氏液)。
4．其他丝线、纱布、吸管、连接大号针头的胶管、硅胶管、擦镜纸。
【实验步骤与观察指标】
1．仪器装置按操作规程准备好BL-410／BL-420生物机能实验系统(或MS一302生物信号记录分析系统)或二道生理记录仪的血压、呼吸、尿滴记录装置(见《常用实验仪器》)，准备好微循环观察装置。
2．手术操作
(1)动物麻醉与固定：动物称重后，以3％戊巴比妥钠1 ml／kg(30mg／kg)静脉注射麻醉。将麻醉好的动物仰卧位固定于动物手术台上。
(2)备皮：剪去颈部、腹部及右侧腹股沟等手术部位的狗(或家兔)毛。
(3)颈部手术：在颈部正中切开皮肤(狗6～8 cm，家兔4～6 cm)，分离气管、左颈总动脉 和右颈外静脉。①行气管插管并连接马利氏鼓，通过鼓膜运动牵拉张力换能器的弹性敏感 梁活动，张力换能器与仪器连接，记录呼吸。②行左颈总动脉插管并经三通管一压力换能器与仪器连接，记录动脉血压。③将静脉导管从右颈外静脉插入到上腔静脉入右心房口处(锁 骨下1-2 cm)并与中心静脉压(CVP)测量输液装置连接，行测量中心静脉压和输液用。未测CVP时，维持每分钟10一15滴输液速度，以保持管道通畅。记录呼吸方法也可在剑突处皮肤上缝一针，用线连接张力换能器，但这种方法当动物清醒挣扎时，容易损坏张力换能器。也可以用呼吸换能器记录呼吸，免马利氏鼓。
(4)股部手术：于右侧腹股沟动脉搏动明显处沿动脉走向切开皮肤4～5 cm，分离出股动脉，夹上动脉夹。用连接大号针头胶管行股动脉插管，暂不松开动脉夹，备放血用。
(5)腹部手术：
1)在耻骨联合上作下腹部正切口，长约5 cm，找到膀胱，在其背面膀胱三角区找到并分离双侧输尿管，插入输尿管导管，用记滴器记录每分钟尿滴数或尿量。
2)在右侧腹直肌旁作6～8cm的腹部旁正中切口，钝性分离肌肉，打开腹腔后推开大网膜，找出一段游离度较大的小肠肠襻，轻轻拉出，置于微循环恒温灌流盒内，用显微镜观察肠系膜微循环。
3．观察与记录实验过程中动态观察记录的指标包括：动物一般情况、皮肤黏膜颜色、肛温、动脉血压、CVP、尿量和肠系膜微循环(血管口径、血流速和肠系膜毛细血管数及血液流变学参数)。
(1)放血前：手术完毕，待动物血压平稳后，观察与记录上述各项指标作实验对照值。
(2)放血造成休克：
1)松开股动脉上的动脉夹，预先在500 ml烧杯中加入肝素2 mg／kg，用于收集所放血
液。快速放血，在15 min内使平均动脉血压(MAP)降至40 mmHg(5．33 kPa)，通过调节放血量，维持MAP于40 mmHg，30 min。
2)测量放血量。
3)记录失血期间动物各项观察指标的改变，每5～10min记录1次，特殊变化随时记录。
(3)抢救：将所放出的血液用50ml注射器从静脉缓缓回输，输血完毕后观察30 min，每10 min记录1次各项观察指标变化。也可设计输入高渗盐水、胶体溶液等其他抢救方案。
【注意事项】
1．麻醉深浅要适度，麻醉过浅，动物疼痛可致神经源性休克。麻醉过程或麻醉后若出现呼吸暂停，应及时作人工呼吸。
2．尽量减少手术创伤引起出血。
3．牵拉肠襻要轻巧，以免引起创伤性休克。
4．血压换能器和动脉导管要排除气泡和加入一定量肝素抗凝。静脉导管一经插入后除非测量CVP，宜缓慢滴人生理盐水(10-15滴／min)，以保持管道通畅。
【思考题】
1．放血使MAP降至40 mmHg后即停止放血，MAP有什么变化?为什么?
2．急性大量失血是如何引起休克发生的?
3．为什么输回所失的全部血液后狗血压仍未能恢复至原来的水平?
第二篇：家兔失血性休克
实验三 家兔失血性休克
【实验目的】
1.复制失血性休克的动物模型。
2.观察失血性休克时和抢救休克时动物的功能代谢变化及微循环改变。
3.了解失血性休克的治疗。
【实验原理】
休克是多种原因引起的，以机体急性微循环障碍为主要特征，并可导致器官功能衰竭等严重后果的全身性病理过程。失血导致血容量减少，是休克常见的病因。休克的发生与否取决于失血量和失血速度，当血量锐减（如外伤出血、胃十二指肠溃疡出血或食管静脉曲张出血）超过总血量的20%以上时，极易导致急性循环障碍，组织有效血液灌流量不足，即休克的发生。根据休克过程中微循环的改变，将休克分为三期：休克早期（微循环缺血期或缺血性缺氧期）；休克期（微循环淤血期或淤血性缺氧期）；休克晚期（微循环衰竭期或DIC期）。但依失血程度及快慢的不同，各期持续时间、病理生理改变和临床表现均有所不同。 对失血性休克的治疗，首先强调的是止血和补充血容量，以提高有效循环血量、心排血量，改善组织灌流；其次根据休克的不同发展阶段合理应用血管活性药物，改善微循环状态。
【材料与方法】
一、实验动物 家兔（体重2.0kg以上）
二、器材与药品
动物手术器械、动脉导管、静脉导管、三通管、体温计、注射器（1ml、10ml、50ml）、输液装置、丝线（7#、1#）、纱布、婴儿秤、兔固定台、微循环观察装置、MedLad生物信号采集处理系统。
20%氨基甲酸乙酯溶液，肝素生理盐水溶液，微循环灌流液、0.2%多巴胺、0.2%间羟胺。
三、手术步骤
⒈麻醉和固定 家兔称重后，20%氨基甲酸乙酯按5ml/kg体重耳缘静脉注射麻醉，动物仰卧固定，剪去手术部位被毛。
⒉颈部手术 从甲状软骨向下作5cm长的颈正中切口，分离气管、左侧颈总动脉和右侧颈外静脉。
⒊启动MedLad生物信号采集处理系统。点击MedLad“文件”菜单“打开配置”，选择“失血性休克”。 MedLad放大器和采样参数如表2-7-1所示。
表2-7-1 MedLad通道设置和采样参数
内容
处理名称
换能器
显示方式
DC/AC 通道1 通道2 中心静脉压 血压 10kPa 40kPa 记录仪 记录仪 DC DC 通道3 心电 心电电极 记录仪 AC 通道4 呼吸 呼吸换能器 记录仪 DC
放大倍数 采样间隔 100~500 1ms 100~500 1ms 500~1000 1ms 500~1000 5ms
⒋插管 左侧颈总动脉插入与40kPa换能器相连的颈动脉导管，推入少量的0.3%肝素抗凝，保持动脉通畅；从右侧颈外静脉插入与10kPa换能器相连的静脉导管，深约5cm，推入少量的0.1%肝素抗凝，保持静脉通畅；气管插管，连接呼吸换能器，描记呼吸曲线；分别将红、黄、黑针形心电电极放置于动物的右前肢、左前肢和右后肢皮下（或将红、黄、黑针形电极分别放置于下颌、心尖和右后肢皮下），描记心电波形。
【观察指标】
⒈放血前观察动物各项生理指标，包括一般情况、皮肤粘膜颜色、心率、血压、呼吸、 ⒉打开三通开关，使血液从颈总动脉流入含少量肝素抗凝的50ml注射器注射器内，注肛温以及肠系膜微循环状态。 意观察血压变化，一直放血使血压（平均动脉压）降至45mmHg，并通过调节注射器内放出的血量，使血压稳定在45mmHg水平15～20min后，观察失血后动物各生理指标和肠系膜微循环的变化。
⒊停止放血，分组抢救：①回输原血（50滴/min）；②按1∶1回输原血和生理盐水（50滴/min）；③回输原血和生理盐水后，给予多巴胺0.2mg/kg；④回输原血和生理盐水后，自行选择现有药物进行抢救。
输血输液后复查动物的各生理指标和微循环是否恢复正常，亦可根据休克的病理生理改变，自行设计方案，再观察抢救效果。
【注意事项】
⒈麻醉深浅要适度，麻醉过浅，动物疼痛，可致神经源性休克；过深则抑制呼吸。 ⒉牵拉肠袢要轻，以免引起创伤性休克。
⒊动、静脉导管，事先用肝素充盈，排除空气。导管插入后，再推入少量的肝素抗凝，防止导管前端堵塞；静脉导管插入后可缓慢滴注生理盐水保持管道通畅。放血后也应及时往动脉导管内推注肝素。
⒋不能将血液直接倒入输液瓶内，而要顺着瓶壁流下来，以免损伤红细胞。
⒌输液时应注意三通管的使用，输液装置只能单向与静脉导管相通，不能在输液的同时测中心静脉压。要观察中心静脉压时，需关闭输液通道，使换能器与静脉导管单向相通。
【思考题】
⒈失血性休克时微循环改变及其机制是什么？
⒉失血性休克时各观察指标变化的机制是什么？
⒊当血压降至45mmHg以后，停止放血，可以观察到血压有所回升，为什么？
⒋失血性休克的抢救原则及措施是什么？
⒌抢救药物的作用机理是什么，各自在什么时候应用比较恰当？
（戴雍月 王万铁）