实验二 邻二氮菲分光光度法测定铁的含量
一、实验目的
1.掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的方法;
2.了解分光光度计的构造、性能及使用方法。
二、实验原理
邻二氮菲(又称邻菲罗啉)是测定微量铁的较好试剂,在pH=2~9的条件下,二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。配合物的lgK稳=21.3,摩尔吸光系数?510=11000 L·mol-1·cm-1。
在显色前,用盐酸羟胺把三价铁离子还原为二价铁离子。
+4Fe3++2NH2OH→4Fe2+ + N2O + 4H+ H2O
测定时,控制溶液pH=3较为适宜,酸度高时,反应进行较慢,酸度太低,则二价铁离子水解,影响显色。
用邻二氮菲测定时,有很多元素干扰测定,须预先进行掩蔽或分离,如钴、镍、铜、铅与试剂形成有色配合物;钨、铂、镉、汞与试剂生成沉淀,还有些金属离子如锡、铅、铋则在邻二氮菲铁配合物形成的pH范围内发生水解;因此当这些离子共存时,应注意消除它们的干扰作用。
三、仪器与试剂
1.醋酸 钠:l mol·L-1;
2.氢氧化钠:0.4 mol·L-1;
3.盐 酸:2 mol·L-1;、
4.盐酸羟胺:10%(临时配制);
5.邻二氮菲(0.1%):0.lg邻二氮菲溶解在100mL1:1乙醇溶液中。
6.铁标准溶液
(1)10-4mol·L-1铁标准溶液:准确称取0.1961g(NH4)2 Fe(SO4)2·6H20于烧杯中,用2 mol·L-1盐酸15 mL溶解,移至500 mL容量瓶中,以水稀释至刻度,摇匀;再准确稀释10倍成为含铁10 - 4mol·L-l标准溶液。
(2)10 μg·mL-1(即0.01 mg·mL-1)铁标准溶液:准确称取0.3511g(NH4)(SO4)6H202 Fe2·于烧杯中,用2 mol·L-l盐酸15 mL溶解,移入500 mL容量瓶中,以水稀释至刻度,摇匀。再准确稀释10倍成为含铁10 ug·mL-1标准溶液。
如以硫酸铁铵NH4Fe(S04)2·12H20配制铁标准浴液,则需标定。
7.仪器 分光光度计及l cm比色皿。
四、实验步骤
1.吸收曲线的绘制 用吸量管准确吸取10-4 mo1·L-l铁标准溶液10 mL,置于50 mL容量瓶中,加人10%盐酸羟胺溶液1 mL,摇匀后加人1mol·L-l醋酸钠溶液5 mL和0.1%邻二氮菲溶液3 mL,以水稀释至刻度,摇匀。在分光光度计上,用l cm比色皿,以水为参比溶液,用不同的波长,从430~570 nm,每隔20 nm测定一次吸光度,在最大吸收波长处附近多测定几点。然后以波长为横坐标,吸光度为纵坐标绘制出吸收曲线,从吸收曲线上确定进行测定铁的适宜波长(即最大吸收波长)。
2.测定条件的选择
(1)邻二氮菲与铁的配合物的稳定性 用上面溶液继续进行测定,在最大吸收波长510 nm处,从加人显色剂后立即测定一次吸光度,经15min,30 min,45 min,60 min后,各测一次吸光度。以时间(t)为横坐标,吸光度(A)为纵坐标,绘制A-t曲线,从曲线上判断配合物稳定的情况。
(2)显色剂浓度的影响 取25 mL容量瓶7个,用吸量管准确吸取10-4 mo1·L-1铁标准溶液5 mL于各容量瓶中,加人10%盐酸羟胺溶液1mL摇匀,再加入l mol·L-1醋酸钠5 mL,然后分别加入0.1%邻二氮菲溶液0.3,0.6,1.0,l.5,2.0,3.0和4.0 mL,以水稀释至刻度,摇匀。在分光光度计上,用适宜波长(510 nm),1 cm比色皿,以水为参比测定不同用量显色剂溶液的吸光度。然后以邻二氮菲试剂加人毫升数为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制A一V曲线,由曲线上确定显色剂最佳加人量。
(3)溶液酸度对配合物的影响 准确吸取10-4 mol·L-l铁标准溶液10 mL,置于100 mL容量瓶中,加人2 mol·L-1盐酸5 mL和10%盐酸羟胺溶液10 mL,摇匀经2 min后,再加人0.1%邻二氮菲溶液30 mL,以水稀释至刻度,摇匀后备用。
取25 mL容量瓶7个,用吸量管分别准确吸取上述溶液10 mL于各容量瓶中,然后在各个容量瓶中,依次用吸量管准确吸取加人0.4 mol·L-1氢氧化钠溶液l.0,2.0,3.0,4.0,6.0,8.0及10.0 mL,以水稀释至刻度,摇匀,使各溶液的pH从小于等于2开始逐步增加至l2以上,测定各溶液的pH值。先用pH为l~14的广泛试纸确定其粗略pH值,然后进一步用精密pH试纸确定其较准确的pH值(采用pH计测量溶液的pH值,误差较小)。同时在分光光度计上,用适当的波长(510 nm)l cm比色皿,以水为参比测定各溶液的吸光度。最后以pH值为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制A-pH曲线,由曲线上确定最适宜的pH范围。
(4)根据上面条件实验的结果,找出邻二氮菲分光光度法测定铁的测定条件并讨论之。
3.铁含量的测定
(1) 标准曲线的绘制 取25 mL容量瓶6个,分别准确吸取的10μg·mL-l铁标准溶液0.0,1.0,2.0,3.0,4.0和5.0 mL于各容量瓶中,各加10%盐酸羟胺溶l mL,摇匀,经2 min后再各加1mol·L-l醋酸钠溶液5 mL和0.1%邻二氮菲溶液3 mL,以水稀释至刻度,摇匀。在分光光度计上用l cm比色皿,在最大吸收波长(510 nm)处以水为参比测定各溶液的吸光度,以含铁总量为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
(2)吸取未知液5 mL,按上述标准曲线相同条件和步骤测定其吸光度。根据未知液吸光度,在标准曲线上查出未知液相对应铁的量,然后计算试样中微量铁的含量,以每升未知液中含铁多少克表示(g·L-1)。
五、数据记录与处理
1. 记录分光光度计型号,比色皿厚度,绘制吸收曲线和标准曲线;
2.计算未知液中铁的含量,以每升未知液中含铁多少克表示(g·L-1)。
六、问题与讨论
1.三价铁离子溶液在显色前加盐酸羟胺的目的是什么?
2.根据自己的实验结果数据,计算在最适宜波长下邻二氮菲与铁配合物的摩尔吸光系数,计算时注意单位换算(实验中所配制溶液的浓度单位为mg·mL-1)。
3.所绘制曲线图均应有结论(即找出最佳值或最佳区间)。
4.注意工作曲线法定量的方式,未知物的定量应用虚线表示。
第二篇:邻二氮菲分光光度法测定铁的含量
实验二 邻二氮菲分光光度法测定铁的含量
一、实验目的
1.掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的方法;
2.了解分光光度计的构造、性能及使用方法。
二、实验原理
邻二氮菲(又称邻菲罗啉)是测定微量铁的较好试剂,在pH=2~9的条件下,二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。配合物的lgK稳=21.3,摩
尔吸光系数?510=11000 L·mol-1·cm-1。
在显色前,用盐酸羟胺把三价铁离子还原为二价铁离子。
4Fe3++2NH2OH→4Fe2+ + N2O + 4H++ H2O
测定时,控制溶液pH=3较为适宜,酸度高时,反应进行较慢,酸度太低,则二价铁离子水解,影响显色。
用邻二氮菲测定时,有很多元素干扰测定,须预先进行掩蔽或分离,如钴、镍、铜、铅与试剂形成有色配合物;钨、铂、镉、汞与试剂生成沉淀,还有些金属离子如锡、铅、铋则在邻二氮菲铁配合物形成的pH范围内发生水解;因此当这些离子共存时,应注意消除它们的干扰作用。
三、仪器与试剂
1.醋酸 钠:l mol·L-1;
2.氢氧化钠:0.4 mol·L-1;
3.盐 酸:2 mol·L-1;、
4.盐酸羟胺:10%(临时配制);
5.邻二氮菲(0.1%):0.lg邻二氮菲溶解在100mL1:1乙醇溶液中。
6.铁标准溶液
(1)10-4mol·L-1铁标准溶液:准确称取0.1961g(NH4)2 Fe(SO4)2·6H20于烧杯中,用2 mol·L-1盐酸15 mL溶解,移至500 mL容量瓶中,以水稀释至刻度,摇匀;再准确稀释10倍成为含铁10 - 4mol·L-l标准溶液。
(2)10 μg·mL-1(即0.01 mg·mL-1)铁标准溶液:准确称取0.3511g(NH4)2 Fe(SO4)2·6H20于烧杯中,用2 mol·L-l盐酸15 mL溶解,移入500 mL容量瓶中,
以水稀释至刻度,摇匀。再准确稀释10倍成为含铁10 ug·mL-1标准溶液。
如以硫酸铁铵NH4Fe(S04)2·12H20配制铁标准浴液,则需标定。
7.仪器 分光光度计及l cm比色皿。
四、实验步骤
1.吸收曲线的绘制 用吸量管准确吸取10-4 mo1·L-l铁标准溶液10 mL,置于50 mL容量瓶中,加人10%盐酸羟胺溶液1 mL,摇匀后加人1mol·L-l醋酸钠溶液5 mL和0.1%邻二氮菲溶液3 mL,以水稀释至刻度,摇匀。在分光光度计上,用l cm比色皿,以水为参比溶液,用不同的波长,从430~570 nm,每隔20 nm测定一次吸光度,在最大吸收波长处附近多测定几点。然后以波长为横坐标,吸光度为纵坐标绘制出吸收曲线,从吸收曲线上确定进行测定铁的适宜波长(即最大吸收波长)。
2.测定条件的选择
(1)邻二氮菲与铁的配合物的稳定性 用上面溶液继续进行测定,在最大吸收波长510 nm处,从加人显色剂后立即测定一次吸光度,经15min,30 min,45 min,60 min后,各测一次吸光度。以时间(t)为横坐标,吸光度(A)为纵坐标,绘制A-t曲线,从曲线上判断配合物稳定的情况。
(2)显色剂浓度的影响 取25 mL容量瓶7个,用吸量管准确吸取10-4 mo1·L-1铁标准溶液5 mL于各容量瓶中,加人10%盐酸羟胺溶液1mL摇匀,再加入l mol·L-1醋酸钠5 mL,然后分别加入0.1%邻二氮菲溶液0.3,0.6,1.0,l.5,2.0,3.0和4.0 mL,以水稀释至刻度,摇匀。在分光光度计上,用适宜波长(510 nm),1 cm比色皿,以水为参比测定不同用量显色剂溶液的吸光度。然后以邻二氮菲试剂加人毫升数为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制A一V曲线,由曲线上确定显色剂最佳加人量。
(3)溶液酸度对配合物的影响 准确吸取10-4 mol·L-l铁标准溶液10 mL,置于100 mL容量瓶中,加人2 mol·L-1盐酸5 mL和10%盐酸羟胺溶液10 mL,摇匀经2 min后,再加人0.1%邻二氮菲溶液30 mL,以水稀释至刻度,摇匀后备用。
取25 mL容量瓶7个,用吸量管分别准确吸取上述溶液10 mL于各容量瓶中,然后在各个容量瓶中,依次用吸量管准确吸取加人0.4 mol·L-1氢氧化钠溶液
l.0,2.0,3.0,4.0,6.0,8.0及10.0 mL,以水稀释至刻度,摇匀,使各溶液的pH从小于等于2开始逐步增加至l2以上,测定各溶液的pH值。先用pH为l~14的广泛试纸确定其粗略pH值,然后进一步用精密pH试纸确定其较准确的pH值(采用pH计测量溶液的pH值,误差较小)。同时在分光光度计上,用适当的波长(510 nm)l cm比色皿,以水为参比测定各溶液的吸光度。最后以pH值为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制A-pH曲线,由曲线上确定最适宜的pH范围。
(4)根据上面条件实验的结果,找出邻二氮菲分光光度法测定铁的测定条件并讨论之。
3.铁含量的测定
(1) 标准曲线的绘制 取25 mL容量瓶6个,分别准确吸取的10μg·mL-l铁标准溶液0.0,1.0,2.0,3.0,4.0和5.0 mL于各容量瓶中,各加10%盐酸羟胺溶l mL,摇匀,经2 min后再各加1mol·L-l醋酸钠溶液5 mL和0.1%邻二氮菲溶液3 mL,以水稀释至刻度,摇匀。在分光光度计上用l cm比色皿,在最大吸收波长(510 nm)处以水为参比测定各溶液的吸光度,以含铁总量为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线。
(2)吸取未知液5 mL,按上述标准曲线相同条件和步骤测定其吸光度。根据未知液吸光度,在标准曲线上查出未知液相对应铁的量,然后计算试样中微量铁的含量,以每升未知液中含铁多少克表示(g·L-1)。
五、数据记录与处理
1.记录分光光度计型号,比色皿厚度,绘制吸收曲线和标准曲线;
2.计算未知液中铁的含量,以每升未知液中含铁多少克表示(g·L-1)。