南昌大学实验报告
学生姓名： 学 号： 专业班级：
实验类型：√ 验证 □ 综合 □ 设计 □ 创新 实验日期： 实验成绩：
实验三 微生物细胞大小的测定
一、实验目的：
1 学习掌握用测微尺测量微生物细胞大小的方法；
2 进一步掌握光学显微镜的使用方法；
二、实验基本原理：
在一定条件下，各种微生物细胞的大小，是微生物形态特征之一，也是分类鉴定的依据之一。由于微生物细胞很小，只能在显微镜下测量，一般采用显微测微尺来测量。
显微测微尺用由镜台测微尺和目镜测微尺组成。镜台测微尺是特制的载玻片，其中央有一全长1mm的刻度标尺，等分成100小格，每格长度为10um，可用它来校正目镜测微尺每小格的长度。目镜测微尺是一块可放在目镜内的圆形薄片，其中央刻有50或100等分的小格，每小格的所代表的实际长度随目镜物镜放大倍数的大小而变动，在测量微生物菌体的大小之前，应预先用镜台测微尺来校正并计算出在某一放大倍数物镜下目镜测微尺每小格所代表的实际长度，再以它作为测量微生物细胞的尺度。
标定 ：目镜测微尺每格所代表的实际长度（mm）=（两条重合线间镜台测微尺的格数／两条重合线间目镜测微尺的格数）×10mm。
测定：微生物的大小（mm）=目镜测微尺的格数×目镜测微尺每格所代表的实际长度（mm）。
实验时应注意几个原则：
1、整数格原则：即标定时应取目测微尺和镜台测微尺的重合线，不能估读。
2、边对齐原则：随着物镜放大倍数的增大，物镜测微尺刻度线变粗，标定时取重合线时应以目测微尺和镜台测微尺刻度线的左边或右边对齐为标准。
3、最远重合线原则：在一个视野下，可能有几对重合线，标定时应取最远重合线。
4、用目测微尺实际测定微生物大小时，应估读一位即小数点后保留一位有效数字。
三、主要仪器设备及耗材：
显微镜；细菌三形涂片、放线菌、曲霉、青霉等教学示范片；目镜测微尺、镜台测微尺；香柏油、二甲苯、擦镜纸等；
四、实验步骤：
1 目镜测微尺的校正
（1）目镜测微尺装入目镜的隔板上，刻度朝下，将镜台测微尺置于载物台上，刻度朝上。（或将带有目镜测微尺的目镜头换上）
（2）从目镜中观察“目尺”的结构后，用低倍镜寻找镜台测微尺（先找黑圈，再稍加移动）。
（3）移动台尺和转动目镜，使两尺平行，并把两测微尺一端的第一条线完全重叠，然后寻找另一端的一条完全重叠的线。
（4）记下两重叠线之间的格数，求出校正值。
（5）用同样的方法 ，求出高倍镜及油镜下目镜微尺的校正值。
2 测量微生物的大小
（6）取下台尺，换上待测示范片。
（7）按要求测量每种微生物细胞的大小。
五、实验数据及处理结果
目镜测微目尺校正结果
杆菌大小测定记录 （格）
六、思考讨论题
P337思考题第三题
七、实验体会及对实验改进的建议