腹腔巨噬细胞吞噬功能检测方法 在机体的免疫过程中，巨噬细胞(MF)承担着噬菌、杀菌、清除机体内被损伤和衰老的细胞，以及传递抗原信息;MF将捕获的抗原进行加工处理后，把降解的抗原信息传递给T、B淋巴细胞。MF又是天然杀伤细胞(NK细胞)的激活剂，且对B淋巴细胞的激活、增殖和分化具有调节作用。 实 验 目 的 掌握巨噬细胞(MF)体外吞噬异物能力的测定方法，观察机体的非特异性免疫现象。 实 验 原 理 巨
在机体的免疫过程中，巨噬细胞(MF)承担着噬菌、杀菌、清除机体内被损伤和衰老的细胞，以及传递抗原信息;MF将捕获的抗原进行加工处理后，把降解的抗原信息传递给T、b淋巴细胞。MF又是天然杀伤细胞(NK细胞)的激活剂，且对B淋巴细胞的激活、增殖和分化具有调节作用。
实 验 目 的
掌握巨噬细胞(MF)体外吞噬异物能力的测定方法，观察机体的非特异性免疫现象。 实 验 原 理
巨噬细胞(MF)在机体的非特异性免疫中具有重要作用，其吞噬异物的能力在一定程度上反映了机体免疫水平的高低。本实验采用测定小鼠腹腔MF吞噬鸡红细胞的吞噬百分率和吞噬指数，来评价免疫抑制剂环磷酰胺(CYP)对机体免疫状态的抑制作用。
实 验 用 品
一、材料
1. 小白鼠6~10只，随机分为二组。
2. 5%鸡红细胞悬液：用已灭菌的注射器，自健康鸡的翼下静脉采血1ml，放置于5倍体积的Alsever"s溶液中。4℃条件下可保存一周。使用时用灭菌的生理盐水洗涤3遍(2000r/min，每次5min)，然后用生理盐水配成5%的浓度。
二、试剂
1. Alsever"s溶液
葡萄糖 2.05g
柠檬酸三钠(Na3C6H5O7·2H2O) 0.89g
氯化钠 0.42g
溶解后加蒸馏水至100ml，用柠檬酸(C6H8O7·H2O)调pH至7.2，超滤除菌或
6.6′104Pa(10磅)灭菌20min，保存4℃冰箱备用。
2. Hank’s液
(1)贮存液(药品全部用AR试剂)，
甲液: ①NaCl 80g, MgSO4·7H2O 1g, MgCl2·6H2O 1g，用双蒸馏水定容至450ml。 ②CaCl2 1.4g双蒸馏水定容至50ml。
将①、②液混合，加氯仿1ml。
乙液: Na2HPO4·l2H2O 1.52g，KH2PO4 0.6g, 酚红0.2g, 葡萄糖l0g, 用双蒸馏水定容至500ml, 加氯仿lml。
(2)应用液:
贮存液甲:贮存液乙:双蒸馏水=1:1:18。6.6′104Pa (10磅)灭菌20min。4℃保存可使用1个月。临用前，用3.5%的NaHCO3调pH至7.2。
3. 0.9%生理盐水(灭菌)
4. Giemsa染液
(1)贮存液:
称取Giemsa粉0.5g研细，再将33ml甘油逐滴加入，继续研磨至无颗粒。80℃水浴过夜，然后加入33ml甲醇。置棕色瓶中，于56℃放置24h后即可使用。
(2)应用液:
临用时取贮存液lml加l0ml pH7.4磷酸缓冲液，混匀后过滤。
5. 甲醇
6. 肝素钠溶液: 用灭菌生理盐水配制。每20IU 0.1ml可抗凝1ml全血。
7. 0.6%环磷酰胺溶液: 用灭菌生理盐水配制。
三、设备
保温箱、显微镜、带盖解剖盘.医用剪刀、镊子、刻度离心管及试管架、载玻片、滴管、酒精及碘酒棉球、擦镜纸、称量纸及滤纸。
实 验 方 法
实验前二天，给实验组小鼠腹腔注射0.6%的环磷酰胺(0.2ml/只)
对照组小鼠注射灭菌生理盐水
↓
每只小鼠注射pH7.2 的Hank液 2m1
(腹腔注射时进针切忌过深，针头方向最好向后，以免伤其内脏，使血管破损出
血，影响实验取材)
↓
实验当天给小鼠腹腔注射5%鸡红细胞0.5ml/只
↓2~3h后
脱颈法处死小鼠立即由腹腔注入lml生理盐水
↓轻揉小鼠腹部约lmin，剪开腹部皮肤,肌肉层上开口
滴管伸入腹腔吸出腹腔液，置于滴有肝素钠的离心管中混匀
↓
把腹腔液滴加在洁净的载玻片上
↓
将载玻片置于带盖解剖盘中(盘底部放2~3盒湿沙布)
↓37℃培养箱孵育30min
取出玻片，漂洗去上清液和末粘附在玻片上的细胞
(漂洗标准: 在显微镜下检查无重叠细胞层，且水流不要过急以免将贴附在玻片
上的MF冲掉)
↓室温下晾干或用吹风机吹干载玻片
Giemsa染液染色5~l0min
↓
冲洗去多余染液，晾干
↓
高倍镜或油镜下观察并计数计算出吞噬百分率和吞噬指数
[附]：吞噬百分率 = 吞噬鸡红细胞的MF数/MF总数′l00 吞噬指数 = MF吞噬的鸡红细胞总数/吞噬鸡红细胞的MF总数
第二篇：吞噬细胞和巨噬细胞的区别
吞噬细胞和巨噬细胞的区别
侵入人体的细菌、病霉或异物，及人体产生的衰老、损伤细胞和坏死组织等，均需经吞噬细胞吞噬、消化，予以清除。所以，吞噬细胞又被誉为“人体健康的卫士”。
吞噬细胞从形态上可分为大吞噬细胞和小吞噬细胞两类。大吞噬细胞包括单核细胞和巨噬细胞。单核细胞占自细胞总数的 3～8％，是血液中最大的细胞，直径为14～20微米左右，圆形或卵圆形。细胞内有许多细小的嗜天青颗粒，此即溶酶体，内含过氧化物酶、酸性磷酸酶、非特异性酯酶和溶菌酶等。寿命可长达75天左右。
单核细胞渗出血管，进入组织和器官后，可进一步分化发育成巨噬细胞，成为机体内吞噬能力最强的细胞。巨噬细胞可以是固定不动的，也可以用变形虫样运动的方式移动。固定和游走的巨噬细胞是同一细胞的不同阶段，两者可以互变，其形态也随功能状态和所在的位置而变化。巨噬细胞在不同组织中的名称不同：在肺里称“肺巨噬细胞”；在神经系统里称为“小神经胶质细胞”；在骨里则称为“破骨细胞”。
单核细胞和巨噬细胞都能消灭侵入机体的细菌、吞噬异物颗粒、消除体内衰老、损伤的细胞和变性的细胞间质、杀伤肿瘤细胞，并参与免疫反应。
小吞噬细胞由中性粒细胞和嗜酸性粒细胞组成，以中性粒细胞为主。
中性粒细胞占白细胞的50～70％，细胞呈圆形，直径10～12微米。细胞质中含有大量的细小颗粒，可分为嗜天青颗粒和特异性颗粒两种。前者约占颗粒总数的20％，直径 0.4微米左右。它们也是溶酶体，内含酸性水解酶和过氧化物酶等。特异性颗粒约占颗粒总数的80％，直径为0.3微米，内含碱性磷酸酶、溶菌酶等。
中性粒细胞具有很强的变形运动能力，能吞噬、消化细菌及机体本身的坏死组织和衰老的红细胞，故有防御病菌和清除坏死组织的作用。它是机体发生急性炎症时的主要反应细胞。细菌毒素和坏死组织的产物能引起炎症反应，这些物质可使中性粒细胞发生超化性，能以变形运动穿出毛细血管，集聚到细菌侵犯的部位，大量吞噬细胞，在胞质内形成吞噬体。吞噬体先后与特异性颗粒和溶酶体融合，细菌即被各种水解酶、过氧化物酶、溶菌酶及其它具有杀菌作用的蛋白质、多肽等成分杀死并分解消化。中性粒细胞吞噬细菌后本身也死亡，形成脓球。中性粒细胞还能在无氧环境中生活并发挥作用。这具有重要意义，使它可在坏死组织中能够杀菌和清除组织碎屑。
嗜酸性粒细胞较中性粒细胞略大，直径约10～15微米，占血中白细胞的1～4％。细胞圆形，内中充满较大的嗜酸性颗粒，它们是一种特殊的溶酶体，含过氧化物酶、酸性磷酸酶等。嗜酸性粒细胞能进行变形运动，吞噬物体能力弱但有选择性，对细菌和异物的吞噬不积极主动，却能迅速吞噬抗原一抗体复合物，并通过溶酶体酶的消化降解作用减轻其对组织的有害作用。嗜酸性粒细胞对组织胺和5―羟色胺有解毒作用，具有减轻诸如荨麻疹、哮喘等某些过敏反应的功能。