20##年10月28日

【目的与要求】

1.学习家兔颈部手术与分离主动脉神经的方法。

2.学习在体神经冲动引导与记录的方法，理解主动脉神经的生理功能。

3.掌握记录和测量家兔动脉血压的直接测量方法 。

4.观察神经和体液因素改变对家兔动脉血压调节的影响，并分析该些因素的作用机制。

【实验原理】
    主动脉神经是主动脉弓压力感受器的传入神经，又称减压神经。神经传入冲动的频率，在一定范围内随主动脉血压的升高或降低而相应增加或减少，从而使压力感受性反射增强或减弱，以维持动脉血压的相对稳定。由于家兔主动脉神经独成一束，易于分离，故常用家兔为实验动物，进行主动脉神经冲动的引导与血压实验。

在正常的生理情况下，人和高等动物的动脉血压是相对稳定的。这种相对稳定性是通过神经和体液因素的调节而实现的，其中以颈动脉窦-主动脉弓压力感受器反射尤为重要。此反射即可使升高的血压下降，又可使降低的血压升高，故有血压缓冲反射之称谓。家兔的主动脉神经在解剖上独成一支，易于分离与观察其作用。

【实验动物及器材】

  家兔、兔手术台，常用手术器械，止血钳、眼科剪、支架、气管插管、Pc-Lab生物信号采集系统、保护电极、纱布、棉球、丝线、 20ml注射器、20%-25%氨基甲酸乙酯，肝素，去甲肾上腺素，生理盐水；RM6240生物信号采集系统，手术剪1把，眼科剪1把，止血钳，镊子，电刺激连线，兔手术台，注射器及针头，血管插管，动脉夹，血压换能器，铁架台，婴儿秤，输液装置，照明灯，有色丝线；

【实验步骤】

1、实验动物准备

 1）麻醉：取家兔一只称重，按4-5ml/Kg(1g/Kg)耳缘静脉注射20%-25%氨基甲酸乙酯进行麻醉。

 2）固定剪毛：背位固定在兔手术台上，剪去颈部手术视野中的被毛。

 3）手术分离血管与神经

  A、颈部皮肤切口5-7cm，分离皮下组织

  B、分离肌肉层：钝性分离

  C、行气管插管：倒“T”切口，插管固定

  D、分离血管与神经：一侧：迷走神经(1)、主动脉神经（2）、颈动脉（1）

另一侧：迷走神经(1)、颈动脉(3)（插管用）

2、连接仪器引导减压神经放电活动

   打开Pc-Lab生物信号采集系统，连接引导电极在第一通道中，设置通道功能为神经放电，输入实验相关信息，采样观察减压神经放电活动。

3、实验装置与连接：① 将压力换能器固定于铁支架上，使换能器的位置尽量与实验动物的心脏在同一水平面上。然后将换能器输入至RM6240生物信号采集系统一通道。②压力换能器的另一端与三通管相连。三通管的一个接头将与动脉插管相连。在将动脉插管插入左颈总动脉前，先用盛有肝素的注射器与三通管另一接头相连，旋动三通管上的开关，使动脉插管与注射器相通，推动注射器，排空动脉插管中的气体，使动脉插管内充满肝素溶液，然后关闭三通管。

4、仪器调试：在“实验”菜单中选择“循环——兔动脉血压调节”。 双击一通道，调节增益、采样参数，使基线归零，令图形位于屏幕中央，便于观察。

5、动脉插管：在左颈总动脉的近心端夹一动脉夹，然后结扎其远心端(保留此结扎线头)，在动脉夹与结扎之间一般应相距2cm以上。 在结扎端的下方用眼科剪作一斜口，向心脏方向插入动脉插管，用已穿好的丝线扎紧插入管尖嘴部分稍后处(注意此处务必扎紧)，并以远心端丝线将插管缚紧固定，以防插管从插入处滑出。

6、静脉插管：用一丝线将右侧颈外静脉远心端提起，用眼科剪在其下方做一斜口，向心脏方向插入静脉插管，用已穿好的丝线扎紧插入管尖嘴部分稍后处，并以远心端丝线将插管缚紧固定，结扎血管同时防插管从插入处滑出，静脉插管成功后立即开始输液，并将输液速度调慢。

7、记录血压：一切准备完毕，移去动脉夹，启动记录按钮，开始记录血压曲线。

8、实验观察：

（1）记录正常血压曲线。 

（2）用血管夹夹闭右侧颈总动脉20s，观察血压变化，待血压曲线显示正常后再进行下一个实验。

（3）静脉注射去甲肾上腺素：从右侧颈外静脉注射0.3ml去甲肾上腺素，观察血压变化，待血压曲线显示正常后再进行下一个实验。

（4）刺激主动脉神经,：以5V，频率25Hz，持续10s的定时刺激刺激右侧主动脉神经，观察血压变化，待血压曲线显示正常后再进行下一个实验。

（5）刺激迷走神经：以1V，频率25Hz，持续10s的定时刺激刺激右侧迷走神经，观察血压变化，待血压曲线显示正常后再进行下一个实验。

【实验结果】

1.夹闭一侧颈总动脉血压变化：

2.按压颈动脉窦是血压变化：

3.刺激迷走神经：

4.刺激迷走神经中枢端：

5.刺激迷走神经外周端：

6.刺激减压神经：

7.刺激减压神经外周端：

8.刺激减压神经中枢端：

9.注射肾上腺素：

10.注射乙酰胆碱：

【分析讨论】

1.夹闭一侧颈总动脉15s后，观察到兔动脉血压升高的现象：
      这是由于颈动脉窦管壁的外膜下分布有丰富的感觉神经末梢，是动脉张力感受器。这个感受器位于兔颈总动脉的远心端，颈内动脉与颈外动脉的分叉交界处。夹闭颈动脉后，远心端的颈动脉窦张力感受器感受到血压下降，传出神经冲动的频率减慢。信息沿窦神经上传至延髓孤束核心血管中枢。使心迷走紧张减弱，心交感和心缩血管紧张加强，作用于心脏，使心率加快，心输出量增加，血管收缩，血管外周阻力增加。从而血压恢复性升高。若血压下降过大，交感缩血管紧张还会扩展到静脉系统，是静脉收缩，促进血液回心，使每博输出量增加。
 2.刺激完整减压神经及其中枢端均可引起血压下降，而刺激该神经外周端基本不变：
       兔减压神经是传入神经，其作用是将主动脉弓感受器发出的冲动传入延髓心血管中枢，反射性引起血压降低。因此，刺激完整的减压神经或其中枢端，使传入中枢的冲动增加，致血压明显下降，而刺激其外周端虽又冲动传向外周，但不会引起血压变化。
 3.刺激迷走神经后观察到，刺激迷走神经和迷走神经外周端都能引起明显的减压反应，而刺

激迷走中枢端则没有减压反应，只是稍有轻微抬升变化：
    迷走神经中含从延髓下行的传出纤维，通向心脏。节前纤维末端释放Ach,节后纤维末端释放Ach,属于副交感神经纤维，能使cAMP浓度降低，心率减慢，心房收缩力减弱，传导性减弱。从而使心输出量变小，平均动脉压降低。此外，还有主动脉体化学感受器的上行纤维在迷走神经中并行，化学感受器受刺激的效应是血压升高。所以，刺激迷走中枢不能引起减压反应，却可以使血压轻微抬高。此外，若切断两侧迷走神经，迷走紧张消失，迷走吸气兴奋反射通路也断了，动物的吸气变深，周期变长，二级曲线周期性变得不明显。
4.加入0.2ml0.01%去甲肾上腺素后，观察到平均动脉压抬高。
    这是由于去甲肾上腺素与血管平滑肌上的α和β2甲肾上腺素能受体结合，使血管收缩，管径变小，外周阻力增加，从而使平均动脉压升高。此外，去甲肾上腺素还可以使心率增加，心收缩力变大。只是缩血管效应更明显。
5.加入0.2ml0.01%乙酰胆碱后，观察到一级曲线周期变慢，平均动脉压下降。
    Ach能使cAMP浓度降低，心率减慢，心房收缩力减弱，传导性减弱。心率变慢则流向外周的血量变多，舒张压更低。心房收缩力减弱则收缩压也有下降。平均动脉压降低。但是因为血回心时间变长，因此，回心血量较多，脉压增加。而大多数血管没有Ach受体，Ach对外周阻力影响不大。

【结论】

夹闭一侧颈总动脉——家兔的血压上升。

按压颈动脉窦——血压急速降低。

刺激迷走神经——血压降低迅速且明显。

刺激迷走神经中枢端——血压降低迅速且明显。

刺激迷走神经外周端——血压降低幅度较小。

刺激减压神经——血压有所下降。

刺激减压神经外周端——血压基本没变化。

刺激减压神经中枢端——血压有些许降低。

注射肾上腺素——血压升高。

注射乙酰胆碱——血压没多大变化。

第二篇：14. 减压神经放电