双毁髓技术及蟾蜍各器官观察课题实验
一、实验目的
①、双毁髓技术意义
②、软骨组织观察
③、蟾蜍泌尿、生殖系统观察
二、实验原理
蟾蜍属于低等动物，当用探针毁坏它的脑神经与脊髓时蟾蜍会失去知觉。使蟾蜍心脏跳动，但是不对我们的实验做出反抗。
三、动物与器材
①、实验动物：蟾蜍（1~2只，每人）
②、器材与试剂：光学显微镜（每人1台）
（每人1套）解剖盘；
手术器械（手术剪与手术镊、眼科剪与眼科镊、骨剪）；
探针；
蛙钉（4~6只）；
吸水纸；
（废物）大烧杯；
载玻片（每人1张）；
苏木精试剂。
四、方法与步骤
①、老师讲解蟾蜍的各部位的特征及实验所要研究的部位。
②、双毁髓
（1）左手握蛙，背部向上，用食指下压其头部前端，使其前俯，中指抵住其胸部，拇指按其背部，使头与脊柱相连处凸起。右手持探针自两眼之间沿中间线向后端触划，当触到一凹陷处即枕骨后凹。
（2）将探针有凹陷处垂直刺入，再将针尖从枕骨大孔向前刺入颅腔，并在颅腔内搅动，捣毁脑组织。如过探针确在颅腔内，则可感到针触及颅骨。
（3）将针退回至枕骨大孔，然后针尖转向后方与脊柱插入椎管，一边伸入，一边旋转探针以毁髓。当蛙四肢僵直而后又松软下垂时，即表明脑和脊髓完全破坏。如动物仍表现四肢肌肉紧张或活动自如，则必须重新毁髓。
（4）拔出探针，毁髓完成。
③、将双毁髓的蟾蜍放在解剖盘上，将其平着展开腹面向上用四个蛙钉将蟾蜍的四肢钉在解剖盘上。然后用手术镊夹起腹面后腿基部之间泄殖腔稍前方的皮肤，再用手术剪由此沿腹部中线向前剪开皮肤，直至下颌前端，将这部分的皮肤剥离，再用手术剪将其胸前的软骨剪下一块放在载玻片上，用苏木精染液染色，再用吸水纸将多余的染液吸干。将此载玻片放在显微镜载物台上，用X10倍的物镜再正确地显微镜操作方法下观察软骨组织细胞，并绘图。
④、继续对蟾蜍进行解剖，左手持镊，夹住后肢基部之间的腹肌，用手术剪沿腹壁中线稍偏左侧剪开腹壁向前剪至胸骨剑突，用骨剪剪断胸骨，将剪开的肌肉壁翻向两侧，用蛙钉把肌肉壁与皮肤一同固定在解剖盘上。
⑤、将体腔完全打开，内脏器官暴露出来，依次观察蟾蜍的泌尿系统和生殖系统等。将蟾蜍的器官脂肪体，毕氏器、精巢、肾脏、米氏管拿出，对其功能等进行了解。并对其进行拍照。
⑥、实验结束后，将蛙钉拔出，将蟾蜍放入垃圾箱中，将实验台擦干净，将解剖盘、蛙钉、手术剪、骨剪、眼科剪、手术镊、眼科镊等清洗干净，放入器材柜中，清洗自己的手，离开实验室。
五、实验结果
观察到的软骨细胞
解剖所得的蛙的各种器官
六、实验结论
各种器官的观察：
脂肪体：1对，在生殖器的前端，黄色，指状，在所有器官中所占的体积较大。
肾脏：为1对暗红色扁平的器官，位于体腔后部，贴近脊柱两侧肾的腹面镶嵌着一排橙黄色的肾上腺，为内分泌腺体。
毕氏器：紫红色小圆粒，在肾脏与精巢的交汇处，是雄性个体中退化的卵巢。
精巢：1对，位于肾脏的腹面内侧，近淡黄色，卵圆形，其大小常因个体与季节的不同而有差异。自精巢发出的输精小管与输尿管相通。
输尿管：由肾的外缘近后端发出，开口于泄殖腔的背部，此管兼充输精管之用。
膀胱：位于体腔后端腹面中央，连附于泄殖腔腹壁的1个两叶状薄壁囊。膀胱被尿液充盈时，其开头明显可见，当膀胱空虚时，用镊子将它放平展开，也可看到其形状。
泄殖腔：为粪便尿和生殖细胞共同排出的通道，以单一的泄殖腔孔开口于体外。沿腹中线剪开不怀好意骨，进一步暴露泄殖腔。剪开泄殖腔的侧壁并展开腔壁，用放大镜观察腔壁上输尿管，膀胱通入泄殖腔的位置。
输精小管和输精管：用镊子轻轻提起精巢，可见由精巢内侧发出的许多细管即输精小管，它们通入肾脏前端，所以雄蟾蜍的输尿管兼输精。
七、问题解答
1.保持皮肤的湿润对蟾蜍有什么影响?
答：保持皮肤的湿润可防止脱水，体表粘液还有助于呼吸作用。因为皮肤干燥不利于气体交换，所以不利于呼吸作用。还可以起润滑作用，减小游动时的阻力。
2.在进行双毁髓是需注意什么？
答：在操作时注意不能近距离注视，不要挤压其耳后腺，防止耳后腺分泌物射入眼内。如被射入，则应立即用大量生理盐水冲洗。
3.剪开腹壁时为什么要沿腹中线稍偏左侧剪？
答：因为沿腹中线稍偏左侧剪不会损坏腹静脉，同时要注意手术剪向上挑，以免损伤内脏，其次注意，将右侧腹壁翻开前可先将腹静脉从腹壁上剥离下来。
4.输尿管和膀胱是否直接相通？尿液如何流入膀胱和排出体外？
答：输尿管与膀胱不直接相连，它们通过泄殖腔相连接。两根输尿管分别与泄殖腔上两个开口相连，使尿液通过输尿管与泄殖腔，泄殖腔孔括约肌的收缩平时为关闭状态，尿液由泄殖腔倒流入膀胱，当膀胱内充满乃哦也时 ，由于膀胱肌的突然收缩，同时伴着泄殖腔孔的张开，将尿液排出体外。巨大的膀胱一方面为储存尿液之用，一方面执行重吸收水分的功能。
5.蟾蜍体内那些器官对渗透压调节有作用？
答：肾脏除了有泌尿的功能之外，还有调节体内水分，维持渗透压平衡的作用。蟾蜍皮肤裸露，当处在水中时体内渗透压高于体外，大量水分渗入体内；肾脏中的肾小球滤过效率很高，具有很强的泌尿功能，可排出多余水分，每天排出的尿液约等于蟾蜍体重的三分之一，使体内的水分得以维持恒定。
但是，当蟾蜍在陆地上时，由于肾小管较短而不能很好解决失水问题。 肾小管中相当于亨氏袢(Henles loop)的一段较短，对水的重吸收能力不强，在这种情况下，膀胱重吸收水分的功能，对于蟾蜍体内水分的保持具有十分重要的意义。
蟾蜍与鱼类一样肾脏是其排泄器官，排尿管道在雄性兼输精，并具有由泄殖腔壁突出形成的泄殖腔膀胱。泄殖腔膀胱有一定的重吸收水分的功能，但不能补偿体表水分蒸发造成的失水，因而蟾蜍虽然上陆但不能长时间离开水源。
八、实验小结
通过这个实验，我更加深刻的了解了蟾蜍的各个系统以及其功能。在实验过程中，我对解剖蟾蜍还有些畏惧，我相信下次我能做得更好。
2012/10/21星期日
第二篇：蟾蜍实验报告
生命科学院 张茜 111070094
蟾蜍的解剖与观察
生命科学院
张茜 111070094
一、实验目的意义
两栖动物绝大多数都是对人类有益的，例如消灭害虫、作药用资源等等。蟾蜍作为医学、生理学重要的实验动物则使用更为广泛。通过观察两栖类外形、皮肤、消化、呼吸、泄殖和循环等系统，了解两栖动物z 在生理学、药理学、毒理学等实验中常用组的准确取材。
重点：了解在摄食方式、营养、呼吸、排泄、生殖及血液循环器官系统的形态特征。 难点：理解两栖动物了解两栖动物由水生发展到陆地生活的各个器官结构与功能的适应性。
二、实验对象的获得与麻醉
获得途径主要是由野外捕获或从特种养殖场购买(如牛蛙养殖场)。
抓取方法: 抓住其后腿，有经验者也可抓住其身体或借助一块布来抓，因蛙体表粘滑且蟾蜍体表有毒液分泌。
麻醉：两栖类皮肤有渗透性，放入含麻醉剂的溶液中就很容易麻醉。0.1％的甲磺酸—三卡因(MS—222)水溶液在几分钟内即可麻醉动物，所需时间因身体大小而异。也可用呼吸性麻醉剂，将蛙或蟾蜍放进玻璃罩或标本瓶内，同时放人浸有乙醚的棉花，几分钟后，即可发生作用。
三、实验操作与观察
(一)外形观察
将活蛙(或蟾蜍)静伏于解剖盘内，观察蛙(蟾蜍)的身体，可区分为头部、躯干和四肢三部分。
1．头部
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头：呈扁等腰三角形。
眼睛：在头两侧，稍向背部突出，有上下眼睑。
瞬膜：在下眼睑的内侧，为一半透明的薄膜，该膜向上延展可覆盖眼球。
外鼻孔：两眼的前方，近于头的前端的一对小孔
内鼻孔：拉开下颌，在口腔顶壁的前端有一小孔
鼻膜：在外鼻孔外缘的一对瓣状膜
口：头端腹面有一很大的横裂
鼓膜：眼后有一明显的褐色而稍下凹的圆形膜，是中耳腔与外界接触的地方。蟾蜍的鼓膜较小，不明显
耳后腺：蟾蜍鼓膜后上方有一对椭圆形的隆起，是由若干毒腺集合而成的，故又叫毒腺。在受到压挤时，可分泌出一种乳白色的粘稠液，经加工之后即为中药“蟾酥”
舌：在下颌前端内侧着生一柔软粘滑的舌，折向口腔内部，用镊子轻轻将舌拉出展平，可以看到蟾蜍的舌尖钝圆状。舌底有淋巴间隙，分泌的淋巴液可使舌经常保持粘滑
轻触其眼睑，观察上、下眼睑是否全动，瞬膜怎样活动
2．躯干部
蟾蜍尚无明显的颈部分化，后端腹中央处有一小孔称泄殖腔孔。
3．四肢
前肢： 从近体侧起，依次为上臂、前臂、腕、掌和指。前肢有4指，观察指端形状，是否有爪，是否等长，指间是否有蹼。
婚垫：雄性的第一指(拇指)，内侧的一膨大的突起，是由粘液腺集合形成的，便于交配时拥抱雌体，故生殖季节发达。
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后肢：由近体侧起，依次分为大腿(或股部)、小腿(或胫部)、跗、蹠和趾五部分。后肢具五趾。注意各趾的长度是否相同，趾端的形状
髁状距：在第一趾(拇趾)内侧的一较硬的角质化突起
4．皮肤
蟾蜍背面皮肤呈暗黑色，粗糙，有若干大小不等的圆形瘰疣，但头的背部平滑无瘰疣，腹部及体侧呈浅黄色，间有黑色花纹，分布有较小的疣，故腹面较粗糙。
蟾蜍的皮肤腺有粘液腺和较多的毒腺。粘液腺的内腔中空，毒腺的内腔呈颗粒状。 蟾蜍真皮的致密层上续海绵层，下接淋巴间隙，由于有淋巴间隙存在．皮肤除个别地方外，和肌肉联接的不紧密，很容易剥离下来。
(二)消化系统
蛙的消化系统由消化道及其附属的消化腺组成，消化道包括口腔、食道、胃、肠和泄殖腔等，消化腺包括肝脏和胰脏。
1． 口腔：剪开蛙的口角，使口张大，令口腔全部露出。
内鼻孔： 为口腔顶壁前方外侧的一对椭圆形的孔，通过鼻腔与外鼻孔相通。
耳咽管孔：位于咽腔的后端，颌角附近有1对大孔，与中耳相通。
喉门 位于下颌的后部，为口腔后方的1条纵裂缝。
食道开口 ： 咽的最后部位是食管的开口，与咽腔之间无明显界限。
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打开蟾蜍的体腔
2． 食道 很短，开口于喉的背面，下端与胃相连。
3． 胃
位于体的左侧，形状稍有弯曲，前端略粗，后端较细，并有一明显的紧缩分，此即幽门，为胃与小肠的交界处。
4． 肠 ： 分小肠与大肠。小肠又由十二指肠和回肠组成
起于胃后，弯向前方的一小段为十二指肠
自十二指肠向后折，经过几次回旋而达大肠的部分为回肠。
大肠膨大而陡直，开口于泄殖腔。
5． 泄殖腔 ： 较大肠短小，为汇集肛门，输尿管和输卵管(雌蛙)的管道。
6． 肝脏
位于胸腹腔的前端呈红褐色，由较大的左右二叶和较小的中叶组成。肝脏背面、左右二叶之间有一绿色球形的胆囊，内贮胆汁。
7． 胰脏
为一不规则的淡红色或黄白色的管状腺，在胃与肠之间。把肝、胃和十二指肠翻折过来指向前方，即可看到胰脏的背面。
(三)呼吸系统
成蛙为肺皮呼吸。肺呼吸的器官有鼻腔、口腔、喉气管室和肺。
1. 喉气管室 ： 由喉门向内的一条短粗的管子。
2. 肺 ： 为1对近似椭圆形的薄壁囊状物，内壁为蜂窝状，密布血管并具有弹性。
(四)泄殖系统
1．雄性泄殖系统
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生命科学院 张茜 111070094 包括肾脏，输尿管、精巢、脂肪体各一对以及膀胱。
肾脏 为1对暗红色扁平的器官，位于体腔的后部，贴近脊柱的两侧。肾的腹面镶嵌着一排橙黄色的肾上腺，为内分泌腺体。
输尿管 由肾的外缘近后端发出，开口于泄殖腔的背侧。此管兼充输精管之用。
膀胱 连附于泄殖腔的腹面，生于体腔后端腹面中央，为一薄壁的两叶状囊。
精巢 位于肾脏的腹面内侧，近淡黄色，卵圆形，其大小常因个体与季节的不同而有差异。白精巢发出的输精小管与输尿管相通。
脂肪体 在生殖腺的前端，黄色，指状，其体积大小随季节不同变化很大。
2．雌性泄殖系统
雌蛙的排泄系统与雄蛙相似，但其输尿管只作输送尿液之用。生殖系统包括1对卵巢，1对输卵管和子宫。
卵巢 位于肾脏前端背面，大小形状因季节而变化，生殖季节极度膨大，内有许多黑色球形卵。卵巢外壁有许多皱褶。
输卵管 为粗大而迂回的管子，位于卵巢的外侧。前端开口紧靠着肺底的旁边，状似漏斗；
子宫 输卵管后端膨大成囊状的部分，子宫开口于泄殖腔的背面。
(五)循环系统
包括心脏、动脉、静脉及淋巴系统等。
成体的心脏居锁骨稍前方，由两个心房和一个圆锥形心室组成，外被围心囊，由心室腹面右上角通出的淡色的管为动脉圆锥；心脏背面有一个三角形的腔，称静脉窦，静脉窦开口于右心房。
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三、实验结果
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四、鱼类（鲫鱼），两栖类（蟾蜍），哺乳类（小白鼠）形态结构方面的比较
1、外形
鱼类：终年生活在水中，用鳍辅助身体平衡与运动的变温脊椎动物。要靠按节排列于身体两侧的肌肉交替收缩，使体躯与尾鱼类鳍左右摆动而前进，其他鳍起平衡与转向作用。某些鱼的鳍经变态后还具有攻击、自卫、摄食、生殖、发声、爬行、滑翔、跳跃、攀缘、呼吸等功能。鳔能调节鱼体比重，帮助浮沉。表皮含单细胞粘液腺，粘液润滑身体，减小阻力。衍生物有鳞片色素细胞等。
两栖类：大部分时间生活在陆地上，但它们通常在水中繁殖。它们大部分有可以行走的四肢和可以呼吸空气的肺。但它们不长鳞片，皮肤疏松，潮湿的皮肤可以吸收氧气帮助呼吸。 哺乳类： 原始哺乳动物的适于在地面行走的五趾型四肢随着适应不同的生活方式而衍生出许多特化类型，如营水生生活的鲸类和海牛类的后肢退化，前肢演变为鳍状；适应飞翔生活的翼手类的指骨延长，指和四肢间发展了翼膜；营地下生活的鼹鼠类的前肢呈铲形，在开旷草原奔跑的有蹄类的四肢趾端具蹄，为了减轻四肢的重量，巨大的肌肉位于臀部；树栖的兽类或是具锐爪便于在树干上攀爬，如松鼠类，或是具长指（趾）便于抓握树枝，如灵长类，还有极为特殊的适应树栖运动的兽类，如南美热带森林中的树懒，其趾端具巨大的钩状爪，用以在树上攀爬和悬挂。
2、心脏结构和循环系统
鱼类:心脏由一心房一心室、静脉窦和动脉圆锥构成，单循环
两栖类：心脏由两心房一心室、静脉窦和动脉圆锥构成，为不完全的双循环
哺乳类：两房两室，仅保留左体动脉弓。左心房和左心室间有二尖瓣，右心房和右心室之间有三尖瓣。完全双循环。
3、呼吸系统
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生命科学院 张茜 111070094 鱼类：鳃。
两栖类：幼体鳃呼吸，成体行肺呼吸。注：冬眠的时候，两栖类主要由皮肤呼吸，在平时，主要用肺呼吸。口腔呼吸是在口腔进行气体交换的方式，不在肺中进行。
哺乳类：肺。 肺是由复杂的“支气管树”所构成，支气管分枝的盲端即为肺泡。肺泡数量十分巨大，因而大大增加了呼吸表面积，明显地提高了气体交换的效果。肺泡之间分布有弹性纤维，在呼吸的配合下可使肺被动地回缩。哺乳动物的呼吸系统十分发达，特别在呼吸效率方面有了显著提高。空气经外鼻孔、鼻腔、喉、气管而入肺，在肺中完成气体交换。肺泡是其结构和功能的基本单位。
4、受精方式
鱼类：体外受精，卵生。
两栖类：体外受精，卵生。
哺乳类：体内受精，胎生。
5、唾液腺
鱼类：无唾液腺
两栖类：唾液仅湿润食物
哺乳类：唾液腺含淀粉酶
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