尿白细胞测定(干化学法)
1. 实验原理
采用白细胞脂酶法。粒细胞中存在脂酶,它能作用于膜块中的吲哚酚脂,使其产生吲哚酚,吲哚酚与重氮盐发生反应形成紫色化合物,试剂膜块区发生由黄色到紫色的颜色变化,颜色的深浅与白细胞的含量成正比。
2. 标本采集
2.1 标本采集前病人准备:以清晨第一次尿为宜,急诊患者可随时留取。
2.2 标本种类:新鲜尿液
2.3 标本要求:采集患者尿液标本时,盛尿液的容器必须清洁干燥,要求留取中段尿。
3. 标本储存:从排出到检测应在2小时内完成。如不能及时送检或分析,应置4℃下冷藏保存,但冷藏时间不得超过6小时。
4. 标本运输:室温运输。
5. 标本拒收标准:细菌,经血,白带,精液,粪便污染标本不能作测定。
6. 试剂
6.1 试剂名称 MT-R11尿11项分析试纸
6.2 试剂厂家 长春瑞克医疗科技有限公司
6.3 包装规格:100Test/kit
6.4 试剂盒组成:试纸条:100条
6.5 试剂储存条件及有效期:试剂盒贮存于2-30℃条件下,可使用至试剂盒所标示有效期。
7. 仪器设备
7.1 仪器名称:迈特尿液分析仪
7.2 仪器厂家:长春迈特医疗仪器有限公司
7.3 仪器型号:MT-300
7.4 仪器校准程序:在主屏幕下按下“MENU”键,选择“质控测试”,按“ENTER”键确认,进入质控测试界面。可选择“校准条测试”和“质控液测试”两个选项。
7.4.1 选择“校准条测试”,将校准条放在仪器工作台面检条区内,按下“ENTER”键,推进器将纸条推至测试区,屏幕显示“系统正在测试校准条?”测试结束后,如果通过校准,测量结果为“Calibration OK”。校准通过,尿液分析仪可正常使用;校准未通过,仪器运行异常,及时与供应商或厂家联系。如果校准条有污渍或损坏,不能继续使用,及时与供应商或厂家联系。校准周期为每周一次。
7.4.2 选择“质控液测试”,将粘有尿液分析质控液的试纸条放在仪器工作台面检条区内,按下“ENTER”键,推进器将纸条推至测试区,屏幕显示“系统正在测试质控液?”测试结束后输出测试结果。质控测试周期为每天一次测试周期为每天一次。同时在更换一筒新试纸、变换操作者及检测结果有疑问时也应复查质控。
8. 操作步骤:
8.1 打开电源,仪器开始自检。自检通过后,推进器处于初始位置。
8.2将试条的试剂区完全浸入新鲜的、充分混匀的、未离心尿样中立即取出,将试纸条的侧边沿尿液容器的管壁刮去多余的尿液。
8.3 将试纸平放在工作台面上,确保试纸前端同工作台的前壁接触。仪器检测试纸存在后,推进器将试纸推至测试区。
8.4 当推进器回到初始位时,放另一条试纸?这样实现连续测试。
8.5 每一个测量完成后将自动打印出结果。
9. 结果判断:仪器自动打印结果。
10. 质量控制:质控尿液的应用:用人工质控尿液进行空内质控,低浓度质控液应为(+),高浓度质控液应为(+++)。
11. 参考范围:阴性
12. 临床意义:主要用于肾脏、泌尿道疾病的诊断、治疗等。
13. 操作性能:快速简便,特异性强,灵敏度高,重复性好。
14. 方法局限性
14.1 中性粒细胞胞质中含脂酶,而单核细胞、淋巴细胞胞质中则不含脂酶,因此,干化学白细胞检测方法只对粒细胞敏感。
14.2 尿液标本污染甲醛、或高浓度的胆红素、或使用某些药物如呋喃妥因时,干化学法呈现假阳性结果。
14.3 尿液中含有大剂量先锋霉素、庆大霉素等药物、或尿蛋白大于5g/L时,干化学法呈现假阴性结果。
14.7 15. 当检验系统(仪器)不能工作时,所采取的补救措施
当检验系统(仪器)不能工作时,可联系仪器厂家,进行紧急修理,如一时不能修好,如别的实验室有同类仪器可到别的仪器上先测,如别的实验室无同类仪器,申请厂家送一台能正常工作的仪器代替。
16. 参考文献
16.1 叶应妩 王毓三 主编.全国临床检验操作规程.中华人民共和国卫生部医政司,1997,北京:124
16.2 刘成玉 主编.临床检验基础实验指导.人民卫生出版社,2002,北京:122-123
第二篇:干化学法检查尿中白细胞的原理是什么
干化学法检查尿中白细胞的原理是什么
2009-04-20
[要点]干化学法检查尿中白细胞的原理是尿白细胞试剂带的主要成分是吲哚酚酯、重氮盐,粒细胞胞浆内含有酯酶,此酶可作用于模块中的吲哚酚酯,使其产生吲哚酚,后者发生氧化缩合反应或与重...
通过对尿液中白细胞、红细胞、管型、结晶、肿瘤细胞的检测来说明尿镜检法在尿液检测中的重要性。
干化学法检查尿中白细胞的原理:尿白细胞试剂带的主要成分是吲哚酚酯、重氮盐。粒细胞胞浆内含有酯酶,此酶可作用于模块中的吲哚酚酯,使其产生吲哚酚,后者发生氧化缩合反应或与重氮盐反应形成紫色缩合物,其颜色深浅与细胞的多少呈比例关系,此种方法简便、检测快捷,但下列因素对它的检查结果的准确性都可能造成影响:(1)不同型号的试剂带测定尿白细胞的敏感度不同,使用时必须注意批间差异,以免因试剂带不同而引起同一标本测定结果的差异。然而,镜检法就不存在此问题,它对同一份标本检测只存在检测者之间的技术差异。
(2)尿液标本必须新鲜,留尿后必须立即测定,以免白细胞破坏,导致干化学法 与镜检法的实验误差。
(3)使用某些药物时,可产生假阳性,尿蛋白>5g/L或尿液中含有大剂量头孢氨苄、庆大霉素等药物时,可使结果偏低或出现假阴性,而镜检法受到的影响不大。
(4)由于尿液在膀胱中贮存时间过长或标本放置时间延长,导致白细胞破坏,酯酶释放到尿液中,造成干化学法阳性,镜检阴性的所谓假阳性现象。
(5)干化学法只能测定粒细胞,不与淋巴细胞反应,所以它不像镜检法那样,不论粒细胞、淋巴细胞都能检测得到。
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