生化实验总结

随着实验的顺利完成，意味着生化大实验实习也将结束。虽然只有短短五天的时间，我觉得我们学到了很多很多知识，也认识到自己的问题存在。每个人都应该好好的深思。生化实验我们做的是酵母蔗糖酶的提取、分离和纯化。蔗糖酶又称转化酶。19xx年Dumas等首先指出酵母菌发酵蔗糖时必须有这种酶的存在。蔗糖在蔗糖酶的作用下，水解为葡萄糖和果糖，还原力增加，又由于生成果糖，甜度增加。按水解蔗糖的方式，蔗糖酶可分为从果糖末端切开蔗糖的β—D—呋喃果糖苷酶和从葡萄糖末端切开蔗糖的α—D—葡萄糖苷酶。前者存在于酵母中，后者存在于霉菌中。工业上多从酵母中提取。蔗糖酶在工业上用以转化蔗糖，增加甜味，制造人造蜂蜜，防止高浓度糖浆中的蔗糖析出，还用来制造含果糖和巧克力的软心糖等。

在老师和学长、学姐的的关心领导下，通过我们每个成员的齐心协力、共同努力顺利完成！取得了让人满意的结果。现就本次实验实习作以简单的总结。实验的流程大致是：蔗糖酶的提取—分离—纯化以及最后的定性、定量测定。我们每天都有着不同的任务。

实验第一天崔老师给我们讲了一些实验的基本操作要求和注意事项。然后进行仪器和用具的清。药品配制。清洗听起来大家都觉得很简单，其实不然。一个实验结果的好坏很大程度与你的仪器有很大的关系，一定要按要求认真的完成。接下来是我们配制药品和粗酶提取：药品配制一定要清楚你所要配制的药品种类和浓度，并准确称量、量取。因为药品的好坏是整个实验成功的关键因素。我们组在配制0.2%的葡萄糖溶液时就出现问题：陈晓花看错数据配成2%的溶度。在后来做标准曲线的时候我们才发现。二组配制的考马斯亮蓝也出现问题，原因有可能是大家去药品是被污染也有可能是配制过程就出错了。不管怎样我们都要重新做，这就浪费了时间。所以每一步每个人都要认真对待，即便是添加蒸馏水也要做到有始有终。粗酶提取我们采用甲苯法进行，有姜丽丽和李海民完成。由于甲苯有毒在使用过程中要戴口罩，在提取过程要采用蔗糖酶的最适温度35℃。使其充分的混匀水浴30min，隔夜，第二天进去离心。离心过程为保证酶活性必须采用低温离心机，完事后得到粗酶液25ml4℃保存，样品进行乙醇分级处理。离心过程要明确我们所要的是沉淀还是上清液。

第二天我们进行乙醇分级处理，这个还是很简单的。陈晓花和洪宇他们俩个合作完成的。在进行乙醇分级处理时事先计算好每次所需要的乙醇体积。由于乙醇溶解时会产生热，为保证酶活性再添加过程要缓慢加入并不定的搅拌。写到这我就想说实验过程合作真的很重要，并不是其他人都没事情做的。我们同事进行葡糖糖标准曲线和蛋白质标准曲线的绘制。这是一个要有耐心和细心的人去做。我选择了高琳和李荣华去做。绘制曲线过程我们每个都做了四次，结果都不是很理想。后来才知道是使用的考马斯亮蓝有问题。下午进行装柱子，胶液由老师统一给制备的。装柱子过程用滴管慢慢的加入并且不能间断以防止出现断层。众人皆看荣仔一个人操作。最后的时刻又出现问题了，胶面呈现凹凸不平，正好老师过来给我们指正错误。如果不进行处理对后面的分离会造成很大的影响。

实验做到第二天其实都不怎么累，我们还都挺欢乐的。第三天的到来让我们彻底改变了，我可以叫它黑色星期三。这一天我们在实验室连续11个小时。早上由老师统一指导进行上样。上样结束后进行分离，这是一个很漫长的时间我们大概做了9个小时。在等待出现结果的时刻每个人都很着急，出现结果那一刻我们都很兴奋。感觉自己的努力没有白费……每隔2min记录核酸蛋白仪上的数据同时检测是否有蔗糖酶流出。洗脱柱子采用0.15molNacl pbs溶液。并要测定每收集的蛋白液的蔗糖酶。我觉得这是很繁琐的工程，每收集一管都要进行测量。还好我们组员高琳姜丽丽同学很有耐心的完成，在这里真心感谢他们。其实今天的实验并不是很忙，只不过需要大家一直在等时间。我们组员都坚持到最后，即便那些没有进行操作的人也等在最后走，很高兴大家团结一致。最后庆祝我们的成果和犒劳自己的辛苦我们组的在一起吃饭。真的感谢他们的支持。

第四天的任务相比较很简单了，就是电泳纯化蛋白。李萍、荣李文彬、李华、李佳男、姜丽丽他们五个人完成。我和高琳进行定量测定。每人都很认真的负责自己的任务。实验终于在我们的辛苦下顺利的完成。看到自己的结果我们都露出微笑，功夫不负有心人。

作为组长我想说说自己在这次实习的感受：首先感谢老师和同学对我的信任和肯定，没有他们的支持我现在也不会心情愉快。刚开始我挺担心自己能不能做好，后来我发现其实很好带领的。作为组长我要根据对每个组员的了解进行任务划分，让他们做自己最拿手的实验。我觉得在这次试验中我分配的还是相当好的。

作为一个团队，我认识到团结的重要性。每个组员都要认真对待以最饱满的热情投入到实验中。我们组员很有爱心工作忙的时候有人给我们送饭这是很令人感动的。也是在这四天里我学到了如何在一个团队里工作，如何融合到一个团队里。还有就是要善于交流：交流是最好的老师，做实验遇到问题是很常见的事，而最好的解决办法就是交流。做实验最重要的还是需要有坚忍不拔的毅力，不能因为一时的没有结果就想放弃。我想这对我以后的工作和生活都有很大的帮助。

最后感谢我们所有的组员。感谢我们和蔼和亲、幽默的崔老师给我们班这一实习的精彩授课！真诚希望以后有机会还能跟老师学习！

第二篇：生化实验总结

生化实验总结 姓名：李梦华 系年级：20xx级生科三班 组别：55 科目：生物化学实验 题目：生化试验总结 学号：20xx00140051

指缝很宽,时间太瘦,悄悄从指缝间溜走。转眼间，一学期就过去了，时间真的只是稍纵即逝。这学期，和往年一样，作为一个生物专业的学生，实验课自然是必不可少的。这学期，主要开设了三门实验课程，让我收获颇丰的当然要数生化实验了，因为它不但丰富了我们的知识，还锻炼了我们实验操作的基本技能。 先从第一节课说起吧，记得第一节课刚进实验室的时候，我们并没有做任何实验，只是简单地打扫了一下卫生，随后老师对我们进行了生化实验注意事项的讲解，也就是安全教育，顿时让我肃然起敬。当时就觉得生化实验真是既有趣有危险。有趣的是可以学到很多常用的基本实验方法和原理，见识到很多昂贵的仪器，危险的自然就是一个不留神就会带来很严重的伤害。从第一节课起，我就学到了一件事，那就是认真仔细，谨慎莫急…… 从第二节课起，我们就开始认认真真的做实验了。说实话，我也记不太清我们总共做了几个实验，我只大概记得我们做了哪几类实验，大概可分为测蛋白质含量的，测糖含量的，测RNA等等的定量实验，和测酶性质，肌糖原酵解等定性试验。让我印象颇深的当属以下几个实验了。 关于蛋白质的测定，我们学习了三种方法，但我记得比较详细的应该算是folin-酚试剂法和经典的凯氏定氮法。前者利用folin-酚和酪氨酸和色氨酸的结合来测定蛋白质含量，同时我们也是第一次

接触到了紫外分光光度计，以及标准曲线的绘制。利用标准曲线来测定样本的蛋白质浓度。后者实验原理比较复杂，但总体来说就是将蛋白质中的有机氮转化成无机氮（硫酸铵），然后再与碱液反应，通过测量氨气的释放量来间接测得蛋白质的含氮量，然后再求蛋白质的含量。这次实验我们学会了使用凯氏定氮仪，并且明白了其基本工作原理。本仪器使用方便，效果良好。使用的过程中，由于要长时间做大量的重复测定，由此也锻炼了我们坚忍不拔的实验精神，磨练了意志，同时也经过反复的练习而增强了有关该实验的实验操作技能，如何缓慢加液防止倒吸，如何控制蒸汽发生器防止暴沸，如何按照顺序严格的加入试剂，以及如何进行滴定等，通过该实验，对这些技能都有了进一步的了解。 说完蛋白质的测量，那接下来就该讲还原糖的测定了。对于还原糖含量的测定，我们也学习了很多种方法，但我印象中较深刻的当属水杨酸还原法测还原糖的含量了。在这次实验中，我们更加详细的了解了分光光度计的使用：72型分光光度计是可见光分光光度计，波长范围为420nm～700nm，它由三大部分组 成:磁饱和稳压器、光源、单色光器和测光机构、微电计。它的基本依据是朗伯—比耳定律，它是根据相对测量原理工作的，即先选定某一溶剂作为标准溶液，设定其透光率为100%，被测试样的透光率是相对于标准溶液而言的，即让单色光分别通过被测试样和标准溶液，二者能量的比值就是在一定波长下对于被测试样的透光率。在测量的时候，需要不断的润洗，这着实锻炼了我们的耐心和技法，润洗的时候所倒的液体不能太多也

不能太少，不然会造成浪费或是润洗效果不好的后果。做实验的时候，我和我的搭档同时配合，加快了的做实验的步伐，节省了时间，顿时让我明白了合作的重要性。 再然后，就是比较有代表性的点样操作实验了——醋酸纤维素薄膜电泳的实验。在醋酸纤维素薄膜电泳的实验中，我们主要学习到的是在复杂的实验材料处理的过程中如何保持清醒的头脑，以及完整的思路，这样才能把实验做好，并且做的很快。该实验要配制缓冲液、漂洗液、染色液、透明液，从薄膜的制作，到点样，处理、电泳等要经过一系列复杂的实验操作，每一步都很重要，每一步的处理时间，处理程度都要靠自己去把握，最后还要经过漂洗、冷风吹干，最后的处理是要及其小心的，否则会把薄膜弄破，或者出现皱缩，不平整。如果前期点样不好，或者染色、电泳过程中稍有不慎，便的不好较好的电泳条带，出现拖尾，或断续的现象。因此，这个实验尤其考验我们的操作能力和细心水平。 以上所说的实验除电泳外，基本都是定量试验，但这学期也做了为数不多的定性试验，那就是酶性质实验和肌糖元的酵解。先说，酶性质实验吧，首先第一个难题就是缓冲液的配制，为了准确配置不同pH的缓冲液，配置所需的液体的体积需要精确到小数点后两位，用移液管量取小数点后两位的体积真心是对技术的一大挑战啊，除去这一难题外，还需测定如何确定最佳保温时间，这些都不是那么容易操作的。还记得当初做实验的时候，我们所用的酶是小组另一个成员的，测定的酶的保温时间是7min，挺合适的，于是我们就开始正式

做不同pH下的实验了，这对时间的把握要求很严格，必须严格控制在每步操作相隔一分钟，我们相互合作，终于把各种试剂加完了，最后是通过颜色反应来判断最适宜ph，准确判断颜色深浅是一个方面，更重要的是颜色指示剂的加入量要绝对控制好，如果加的太多，则会使所有的试管颜色偏深，甚至都变成黑色，如果加的太少，那么染色就太浅，变色不明显，所以，太深太浅都不适于颜色梯度变化的观察。由此可知，在以后的类似试验中尤其要控制指示剂的加入量，力求达到一个最佳的颜色梯度。可是，由于3号管跳关了，pH缓冲液的pH过低，我们的实验并没有过关，但所幸我们当时是第一个做完的，虽然没有过关，但我们又足够的时间再来一次，于是，我们重新配置了那瓶不合适的缓冲液，又做了一遍，这回的实验结果则相当准确，我和我的小伙伴都很开心，最终拿到了好成绩。 以上就是我自己对本学期的实验的一个小小的心得概括，通过一学期的实验我真的学到了不少知识，又进一步的锻炼了自己的实验操作技能。不管做任何一种实验，耐心，严谨，认真的科学精神都是必不可少的，我觉得通过这一学期的生化实验的锻炼，我的耐心和严谨都得到了很大的提升。也许，这学期所学到的生化实验相关知识会随着岁月的流逝被逐渐淡忘，但是通过实验所培养出的耐心和严谨会陪伴我一生，为我以后的科研路奠定了良好的基础，感谢生化试验，感谢生化老师。老师，您们也辛苦了！