中医医师职称晋升论文分析
一、论文内容：
中医执业医师论文所写的重点都是关于中医方面的病例、病理分析、临床经验等。
包括：论著、病例报告、综述、综合报道、急诊经验、讲座、经验教训、会议（座谈）纪要、临床病理（病例）讨论， 国内外学术动态及基础医学、预防医学、药学、护理、医技、管理等学术类
二、论文用途：
一般发表论文也都是用来晋升职称的。
三、期刊要求：
对杂志的要求除过符合本专业以外就是符合本省晋升政策的要求。 各省政策的要求一般有以下几点：1、杂志或者期刊被知网或者万方数据库收录；2、要求是科技核心期刊、中文核心期刊、国家及杂质、省级杂志、统计源期刊。3、本省的杂志目录之内的杂志（在杂志目录内找，或者咨询一下创新医学网的工作人员就知道了）。4、根据论文质量评定，这个一般来说发表在正规的期刊上，期刊或者杂志的质量稍微高一点，论文的质量也就高了，对于晋升来说不是问题。也可以咨询一下创新医学网的工作人员，让他们帮忙推荐一些正规的合法期刊。
三、论文要求：
1、版面要求：大部分省份会要求论文保留一个版面或者2个版面。
2、字数要求：要求版面的省份也会要求字数，一般要求字数1000、
1500、2500字数的比较多，各省不一样。具体登陆创新医学网查看各省要求，或者资讯网站工作人员。
四、投稿论文具体要求
1、 投稿需附第一作者的单位介绍信、作者单位应保证稿件的真实性，确保不一稿两投或多投、不涉及保密、无署名争议、不采用已经在其他刊物公开发表的文稿。
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3、 论著和临床研究文稿，在正文前加150~250字中英文内容摘要（经验交流、药物与临床文稿仅需中文摘要）及关键词3~8个。内容摘要按目的、方法、结果、结论结构格式撰写。英文摘要内容同中文摘要一致，用打印机打印，不要用手写。
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5、 文题：应力求简明、醒目，反映出文章的主题。一般中文文题以20字以内为宜，不用标点符号。最好不夹用英文缩略语。尽量不用副标题。
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优秀论文赏析
胺碘酮对兔急性心肌梗死左室心外膜细胞瞬间外向钾电流影响
的研究
作者：xxx xxx 作者单位：河北省科技攻关项目(No.0727615xx),国家中医药管理局浊毒证重点研究室专项课题(No.ZD2008xx
050011 石家庄市，河北医科大学中医院心内科(xxx); 050017 白求恩国际和平医院心内科(xxx)
【摘要】 目的 探讨胺碘酮对急性心肌梗死(AMI)后心外膜梗死边缘区及非梗死区心肌细胞瞬间外向钾电流(Ito)的影响。方法 30只兔随机分为3组：正常对照组(CON组)，建立AMI动物模型后分为梗死边缘区组(AMI组)及非梗死区组(AMI组)。1周后用膜片钳技术研究左心室梗死边缘区及非梗死区心外膜心肌细胞(Epi)Ito密度的改变，并记录胺碘酮对Ito密度的影响。结果 CON组左室Epi细胞Ito在+70 mV时的电流密度明显大于AMI
( P<0.01);AMI组与AMI组及AMI组组Epi细胞的Ito密度有明显差异
组与AMI组Ito密度显著降低，(P<0.05);胺碘酮灌流后AMI
Ito失活及灭活后再恢复均变得缓慢。结论 AMI后梗死边缘区、非梗死区Epi细胞Ito密度存在差异性;胺碘酮可降低心肌梗区Ito密度。
【关键词】 胺碘酮,心肌梗死,瞬间外向钾电流,兔
The effect of amiodarone on the transient outward potassium current of left ventricular epicardium myocytes in rabbit myocardial infarction model ZHANG TieLI Dian
al.Department of Cardiology,the Traditional Chinese Medical
Hospital,Hebei Medical University,Shijiazhuang 050011,China
【Abstract】 Objective To explore the effects of amiodarone on the transient outward current (Ito) of myocardium in infarcted zone and non infarcted zone in rabbit acute myocardial infarction model.Methods Thirty rabbits were randomly separated into 3 groups, control group (CON),AMI model group with remote from infarcted myocardium (AMI
(AMI
detected in remote zone from infarcted myocardium and non infracted myocardium,with patch clamp technology.The effect of amiodarone was recorded and analyzed.Results In CON group,the peak Ito density of
epicardium (Epi) cells was higher than AMIwith non infarcted myocardium density.Conclusion It demonstrated that the Ito density had variety between infarcted zone and non infarcted zone in rabbit AMI
model,furthermore,the amiodarone could decrease the density of Ito.
【Key words】 Amiodarone;Myocardial infarction;Transient outward potassium current;Rabbit
急性心肌梗死可并发多种心律失常进而引起心源性猝死，其中室性心律失常是主要因素之一。心室跨壁电生理异质性[1]是近年重点研究方向。胺碘酮(amiodarone)作为III类抗心律失常药物，已在多项临床试验中被证明有良好的抗心律失常作用，进而成为治疗心律失常的主要药物之一。然而目前关于其对心室肌梗死后不同部位心肌细胞瞬间外向钾电流(Ito)异质性的研究尚罕见报道。本文拟通过膜片钳全细胞记录方法对兔心肌梗死后左室梗死边缘区和非梗死区单个心外膜(epicardium，Epi)心室肌细胞进行研究，探讨Epi心肌Ito电生理特性变化以及胺碘酮对Ito的影响，进而为合理应用胺碘酮治疗室性心律失常提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料 实验动物：新西兰纯种大耳白兔30只,由河北医科大学实验动物中心提供，雌雄不拘，体质量1.5～2.0 kg，随机分为3组，正常对照组(CON组)、心肌梗死边缘区组(AMI
死非梗死区组(AMI组)和心肌梗组)，每组10 只。CON组不结扎冠状动脉;后2组采用结扎冠状动脉左前降支的方法[2]建立心肌梗死动物模型后分为AMI组和AMI组,单笼饲养1周后备用。实验药物：胺碘酮为美国Sigma公司产品，将胺碘酮灌流液用50%乙醇溶解，配制成10×10-3mol/L母液，冷藏保存，实验时在含有0.04%牛血清白蛋白灌流液中加入胺碘酮，使之达灌流所需浓度：4.4×10-5mol/L[2]。
1.2 实验方法
1.2.1 单个心室肌细胞分离: 梗死模型建立后1周猝击兔头颅枕部致昏，迅速开胸切取心脏，置于4°C的无钙台氏液中，连接在Langendorff心脏灌流装置上，经主动脉根部逆行用无钙台氏液灌流10 min，用含I 型胶原酶0.4 g/L、牛血清蛋白0.2%的无钙台氏液反复灌流8～10 min，剪下距离梗死区边缘2 mm的游离左心室肌和距梗死区边缘4 mm游离心室壁，前者为梗死边缘区，后者为非梗死区
[3]，去掉心内膜面乳头肌。以眼科剪、眼科钳准确将心室壁横剖，紧邻心外膜侧1.0～1.5 mm取外膜层细胞,将之分别剪碎，置于稀释1倍的酶液中搅拌，整个过程保持恒温36℃同时充入氧气，至4～5 min后可于镜下看到大量存活的心肌细胞，最后过滤离心保存在KB液中保存，1 h后细胞膜恢复状态后使用。
1.2.2 细胞封接与全细胞记录模式的建立： 按文献[4]建立全细胞膜片钳记录模式后，分别记录CON组、AMI组和AMI组Epi细胞Ito电流，并在记录Ito后加入胺碘酮溶液，再次记录Ito为消除细胞间误差,电流值以电流密度(pA /pF)表示。
1.2.3 Ito的记录方法： 电流—电压曲线(I曲线)：先将细胞钳制在-50 mV,超极化至-160 mV，使通道充分开放，持续50 ms，去极化至-40 mV，使钠通道失活，50 ms后去极化脉冲从-30 mV到+70 mV，阶跃10 mV，时程250 ms。以不同钳制电压下的Ito强度绘成I曲线。分别记录各组的I
与对照组比较。 曲线及钳制电压为+70 mV时的电流，并
失活曲线的电压诱导方案：先将细胞钳制在-50 mV,超极化至
-100 mV，持续250 ms，阶跃10 mV，至-40 mV，去极化至+70 mV，持续250 ms，阶跃10 mV。将记录的Ito与最大激活时的Ito之比，与相应的条件脉冲膜电位作图得Ito通道失活曲线。分别记录各组失活曲线。
恢复曲线的电压诱导方案：先将细胞钳制在-50 mV,然后去极化至+60 mV，持续250 ms，在第1个脉冲回到HP后不同时间间隔给予第2个脉冲去极化到60 mV,持续时间250 ms，第2个脉冲从30 ms记起，以后重复上述程序，每次阶跃15 ms,逐级递增至240 ms。以第2个脉冲与第1个脉冲的Ito之比与相应的时间间隔作图，得Ito通道灭活后恢复过程曲线。分别测量30、90、165及240 ms时的恢复电流的大小并与最大值作比较，分别记录各组的失活后恢复曲线，并与对照组作比较。
1.3 统计学方法 用SPSS 13.0软件进行统计学分析，计量数据以均数±标准差(±s)表示，组间比较采用方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 Epi细胞Ito I
均达最大值，AMI曲线的变化 Epi细胞Ito密度于+70 mV时组及AMI组Epi细胞的I曲线较CON组Epi细胞下降，电流密度CON组为(111±16 )pA/pF(11个细胞)明显
大于AMI组的(53±10)pA/pF(12个细胞)及AMI组的
组及(72±9)pA/pF (15个细胞)，差异有统计学意义(P<0.01)，AMI
AMI
2。
胺碘酮灌流后AMI组及AMI组电流密度之间比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。见图1、组在+70 mV的Ito密度明显下降，分别为(25±10) pA/pF (12个细胞)和 (32±8) pA/pF (13个细胞),差异无统计学意义(P>0.05)。见图3。
2.2 Ito失活曲线的比较 CON组、AMI组及AMI组半数失活电压(V0.5)分别为(-68±8)mV (12个细胞) 、(-60±7)mV (11个细胞)和(-56±9)mV (13个细胞)，CON组在-30 mV完全失活，
AMI
及AMI组Epi细胞的失活曲线与CON组比较形态无明显变化，
组比较差异有统计学意均在-20 mV完全失活， CON组与AMI
义(P<0.05)，AMI
4。
AMI组灌流胺碘酮后AMI及AMI组差异无统计学意义(P>0.05)。见图组与AMI组失活曲线均在-30 mV完全失活，两者细胞V0.5分别为(-54±9)mV (12个细胞)和(-50±9)mV (11个细胞)，差异无统计学意义(P>0.05)。
2.3 Ito灭活后再恢复曲线 AMI组较CON组灭活后再恢复减
组及慢,差异有统计学意义(P<0.05);经灌流胺碘酮后AMI
AMI组较CON组灭活后再恢复减慢，差异有统计学意义
(P<0.05)，AMI组及AMI组比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表1、图5。表1 3组灭活后再恢复在不同时点的百分比
3 讨 论
各种心律失常的发生与细胞膜离子通道电流的异常改变密切相关。心肌动作电位是细胞膜上多种离子通道顺序开关综合作用的结果
[5]，其中Ito 是心肌细胞复极化电流的重要成分之一， Ito所介导的2相折返很可能是在心肌缺血及再灌注心律失常的发生机制[6]。Ito有2种成分：(1)可被4氨基吡啶(4阻断的Ito1;(2)钙离子依赖性的Ito2[7]。本研究中电极内外液含阻断Ca2+的成分，所以本文记录的Ito实际为Ito1。
动物实验证实心肌梗死后梗死中心区、边缘区以及非梗死区发生组织重构，同时心肌细胞也发生了电重构，推测与Ito降低相关的动作电位时程延长相关[8]。文献报道[9]心肌梗死3 d后，大鼠左室非梗死区Ito明显下降，与本结果显示：兔心肌梗死后1周左室梗死边缘区及非梗死区心外膜细胞Ito密度下降一致，其中以AMI组Epi下降最明显，与Lukas等[6]报道的外膜层细胞对缺血敏感是一致的。梗死边缘区及非梗死区Epi细胞Ito的失活曲线右移，失活变的缓慢;梗死边缘区Epi的灭活后再恢复缓慢，以上结果表明：心肌梗死后梗死边缘区、非梗死区Epi细胞中的Ito电生理特性的不均一性,可以导致梗死边缘区和非梗死区Epi心肌细胞2相平台期之间显著的电压梯度差异,增加发生2相折返的机会,从而诱发心律失常;心肌梗死后心脏
不同部位的复极差异明显，可能是引起折返性室性心律失常的离子基础。
本研究证实在胺碘酮作用下梗死边缘区、非梗死区细胞Ito密度减低、失活曲线右移并趋向一致，与文献研究显示胺碘酮延长心室的动作电位时程一致[10]。本研究显示胺碘酮通过抑制梗死边缘区及非梗死区细胞复极电流Ito密度，同时减轻左右室之间及左室不同部位心室肌细胞Ito[11]之间的电生理异质性，降低心肌梗死后复极的离散度，消除由于细胞间复极不一致性而产生的折返，从而降低心律失常的发生。
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姜黄素对糖尿病大鼠肾脏保护作用的机制研究
作者：xxx 作者单位：050051 河北省石家庄市第二医院(xxx);河北省石家庄市医保中心(xxx)
【摘要】 目的 探讨姜黄素对实验性糖尿病大鼠肾脏基质金属蛋白酶白酶2(matrix metalloproteinase2，MMP2)及其抑制物金属蛋2，TIMP2组织抑制物(tissue inhibitor of metalloproteinase
2)表达的影响。方法 大鼠随机分为正常对照组(A组)、糖尿病组(B组)及姜黄素治疗组(C组),采用腹腔单剂量注射链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)65 mg/kg建立糖尿病大鼠模型。治疗组给予姜黄素30 mg·kg1·d1腹腔注射。实验第3、6周各组分别宰杀6只大鼠，并检测24 h尿白蛋白排泄率(urinary albumin excretion rate，
UAER)、肌酐清除率(creatinine clearance rate，Ccr)及肾重/体重。采用免疫组织化学染色法检测肾小球MMP2、TIMP2、纤维连接蛋白(fibronectin，FN)和Ⅳ型胶原表达。结果 治疗组大鼠UAER(P<0.05或<0.01)、Ccr(P<0.05)、肾重/体重(P<0.05)均明显低于糖尿病组大鼠。免疫组织化学染色可见糖尿病大鼠肾小球TIMP2、 FN和Ⅳ型胶原表达均明显增加(P<0.05或<0.01)，治疗组上述指标的表达均受到明显抑制(P<0.05)。MMP2在糖尿病大鼠肾小球的表达明显被抑制(P<0.01)，治疗组其表达明显增加(P<0.05)。结论 姜黄素通过上调糖尿病大鼠肾小球MMP2表达、下调TIMP2表达，对糖尿病大鼠肾脏病变具有保护作用。
【关键词】 糖尿病肾病,姜黄素,基质金属蛋白酶
2组织抑制物
【Abstract】 Objective To investigate the action mechanism of protective effects of curcumin on kidney of experimental diabetic rats,by observing the effects of curcumin on the expression of matrix metalloproteinase
metalloproteinase2 (MMP2 (TIMP2) and tissue inhibitor of 2,金属蛋白酶2) in kidney of experimental diabetic rats.Methods The rats were randomly divided into normal control group( group A),diabetes group(group B) and curcumin treatment group (group C),The rat models of diabetes were established by intraperitoneal
injection with curcumin 60mg/kg.The rats in curcumin treatment group were given curcumin 30mg·kg1·d1 intraperitoneally.The UAER,Ccr and the ratio of kidney weight/body weight were detected after 32,TIMPweek and 6
week treatment,and the expressions of MMP2,FN and collagen Ⅳ were measured by immunohistological staining.Results The UAER,Ccr and the ratio of kidney weight/body in group C were significantly lower than those in group B (P<0.05 or P<0.01).As composed with those in group C,the protein expressions of TIMP2,FN and collagen Ⅳ were significantly increased in glomeruli
2 of the rats in group B(P<0.05 or P<0.01).The expression of MMP
was significantly decreased in group B,however,which was obviously increased in group C(P<0.05).Conclusion The curcumin has protective effects on the kidney of experimental diabetic rats by up
expression of MMP2 and downregulating the regulating the expression of TIMP
2 in glomeruli of diabetic rats.
【Key words】 diabetic nephropathy; curcumin; matrix metalloproteinase
肾组织内的肾素(reninangiotension system，2; tissue inhibitor of metalloproteinase2 RAS)在糖尿病肾病的发生及病情进展中起重要作用，高糖可在肾组织局部激活该系统，导致血管紧张素Ⅱ(angiotension Ⅱ，AngⅡ)产生
增加，AngⅡ通过与肾组织内存在的受体AT1R结合，刺激肾组织表达基质金属蛋白酶2(MMP2)与其抑制物TIMP2的比例失衡，导致细胞外基质降解减少[1，2]。本研究通过观察糖尿病大鼠肾小球内MMP2和TIMP2的表达及姜黄素对其表达的影响，探讨姜黄素的肾脏保护机制，为临床防治糖尿病肾病提供实验性理论依据。
1 材料与方法
1.1 动物模型制备
雄性SD大鼠36只，体重180～220 g(购自河北医科大学实验动物部)，大鼠腹腔单剂量注射STZ(购自Sigma公司)65 mg/kg，对照组仅注射等量柠檬酸缓冲液。72 h后尾静脉采血，使用OneTouchⅡ血糖仪(强生公司生产)测全血血糖，血糖≥16.7 mmol/L确定为糖尿病大鼠。
1.2 动物分组及给药
大鼠随机分为3组，即正常对照组(A组)、糖尿病组(B组)及糖尿病姜黄素治疗组(C组)，每组12只。姜黄素溶于6%乙醇和6%聚乙二醇混合液中，自造模当天起腹腔注射30 mg·kg-1·d-1，A组与B组分别给予等量6%乙醇和6%聚乙二醇混合液腹腔注射。大鼠自由
饮水、进食，不使用胰岛素及其他降糖药物。于实验第3、6周各组分别取6只大鼠宰杀。
1.3 标本收集
宰杀前1 d用代谢笼收集24 h尿液，计量后分别取6 ml，3 000 r/min离心5 min，去除沉渣，保存于-20℃冰箱待测24 h尿白蛋白排泄率(UAER)、尿肌酐。大鼠称重，断头取血5 ml，3 000 r/min离心5 min，分离血清，测定血糖、尿素氮及血肌酐。取双肾，去掉包膜称重，取部分右肾皮质置于10%中性福尔马林溶液浸泡固定，待HE、PAS及免疫组织化学染色检查。
1.4 生化指标检测
尿白蛋白检测用放射免疫法(药盒购自中国原子能科学研究所)。生化指标检测采用日立7150全自动生化分析仪，并计算肌酐清除率(Ccr)，结果用体重校正。
1.5 免疫组织化学染色
采用SP法。石蜡切片厚4 μm。阴性对照用1%BSA代替一抗，检测MMP
2、TIMP2、FN和Ⅳ型胶原的表达。结果采用HPIAS
1000病理图像分析系统进行半定量分析，每张标本随机选5个视野，计算每个视野内染色区域的平均吸光度，以均值计算每个标本的吸光度，最后以每组的均值进行比较。
1.6 统计学分析
应用SPSS 11.0统计软件进行单因素方差分析，计量资料以±s表示，采用t检验，两两比较用SNK法，P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 3组大鼠体重、肾重、肾重/体重及血糖的比较
注射STZ后大鼠血糖上升，72 h后血糖≥16.7 mmol/L，说明糖尿病模型成功。同期各组相比，B组大鼠体重均低于A组(P<0.05或<0.01)，并呈进行性下降，肾重、肾重/体重均逐渐增加，与A组比较差异有统计学意义(P<0.05)。C组体重均高于B组(P<0.05)，肾重、肾重/体重均低于B组(P<0.05)。见表1。表1 3组大鼠体重、肾重、肾重/体重及血糖比较
2.2 3组大鼠肾功能及UAER的变化
同期大鼠相比，B组大鼠血尿素氮、Ccr及UAER明显高于A组(P<0.05或<0.01)。C组血尿素氮、Ccr及UAER均低于同期B组(P<0.05)。见表2。 表2 3组大鼠生化指标及UAER的比较
2.3 3组大鼠肾小球表达MMP
及Ⅳ型胶原蛋白的比较
在A组可见MMP2蛋白主要在肾小球系膜及基底膜表达，于
2蛋白在肾小球的表达与同
2蛋白2、TIMP2、纤维连接蛋白(FN)第3、6周相比无明显变化;B组MMP期A组相比明显被抑制(P<0.01),并呈进行性降低;C组MMP
在肾小球的表达与同期B组相比明显增加(P<0.05)。A组可见肾小球系膜和基底膜少量表达TIMP2、FN和Ⅳ型胶原蛋白，第3周与第6周相比无明显变化;B组上述指标与同期A组相比均逐渐增加(P<0.05或<0.01);C组上述指标与B组相比均受到明显抑制(P<0.05)。见表3。表3 3组大鼠肾小球表达MMP
胶原蛋白的比较
2.4 3组大鼠肾组织病理学改变
光镜结果显示：A组大鼠肾小球血管袢薄而清晰，小管结构正常，未见病理改变;B组大鼠肾小球面积增大，肾小球系膜区增宽、基底 2、TIMP2、FN及Ⅳ型
膜增厚，病变呈进行性，肾小管病变不明显，且未见肾小球硬化;C组大鼠肾小球病理改变较B组明显减轻，但仍重于A组。
3 讨论
本研究采用SD大鼠腹腔注射STZ诱导糖尿病模型成功，72 h后测血糖≥16.7 mmol/L。在第3、6周检测到肾重/体重呈进行性升高，光镜观察可见肾小球面积增大、系膜基质增多及基底膜增厚，说明本模型已出现糖尿病肾病早期的病理改变。肾组织内细胞外基质堆积与高糖环境密切相关。高糖激活肾组织内的RAS系统，使AngⅡ产生增加，其通过与肾组织内广泛存在的AT1R受体结合，导致肾小球系膜细胞和脏层上皮细胞分泌基质金属蛋白酶家族(matrix metalloproteinases，MMPs)活性降低，分泌基质金属蛋白酶家族抑制物(tissue inhibitor of metalloproteinases，TIMPs)活性升高，导致细胞外基质降解减少，引起系膜基质堆积、系膜区扩大及基底膜增厚[3，4]。
MMPs为锌依赖的蛋白酶，以前体的形式被分泌出来，通过蛋白水解作用去掉覆盖活性部位的前体肽片段而被激活。活化的MMPs可被特异抑制物TIMPs以1∶1的方式所抑制。MMP
2是MMPs中的重要一员，可降解系膜及基底膜的Ⅳ型胶原、FN及层粘连蛋白。细胞外出现的TIMP
2以1∶1的方式在低剂量时
促进MMP
2激活，在表达过量时则抑制其激活[3，5，6]。
本实验于第3、6周均发现糖尿病大鼠肾小球MMP
少，TIMP2表达减2增加相应表达，肾小球细胞外基质堆积，与文献报道
2明显增加，并显著抑一致。姜黄素治疗组大鼠肾小球表达MMP
制肾小球表达TIMP2，明显降低FN及Ⅳ型胶原蛋白表达，从而减轻肾小球细胞外基质堆积。
本实验证实，姜黄素通过上调糖尿病大鼠肾小球表达MMP
下调其表达TIMP2，2，促进FN及Ⅳ型胶原蛋白降解，减少细胞外基质堆积，改善肾功能，减轻肾皮质损伤。由于B、C 2组大鼠血糖无差异，所以该药的肾脏保护作用与代谢因素无关
【参考文献】
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