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分子生物学常用溶液配方：
? 抗生素 储备液浓度 储存温度 工作浓度 工作浓度 (严紧型质粒) (松弛型质粒) 氨苄青霉素 500mg/ml（溶于水） -20℃ 20μg/ml 60μg/ml
氯霉素 34mg/ml（溶于乙醇） -20℃ 25μg/ml 170μg/ml 卡那霉素 10mg/ml（溶于水） -20℃ 10μg/ml 50μg/ml
链霉素 10mg/ml（溶于水） -20℃ 10μg/ml 50μg/ml
四环素 5mg/ml（溶于水） -20℃ 10μg/ml 50μg/ml
? BCIP 0.5g 5-溴-4氯-3-吲哚磷酸二氢钠(BCIP)加到10ml 100%二甲基甲酰胺中, 4℃保
存
? NBT 0.5g氯化氮蓝四唑加4ml 70%二甲基甲酰胺中, 保存于4℃中
? 0.5mol/L EDTA(pH 8.0) 800ml水中加186.1g二水乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na.H2O),
剧烈搅拌, NaOH调pH 至8.0(约需20g), 定容至1L, 份装高压灭菌备用.
? 10mg/ml EB (溴化乙锭) 100ml水中加入1g溴化乙锭, 搅拌数小时, 铝箔包裹或转移
到棕色瓶中室温保存
? IPTG IPTG为异丙基硫代-β-D半乳糖苷(分子量为238.3D), 8ml蒸馏水溶解2g
IPTG后定容至10ml, 用22μm滤器过滤除菌, 分装成1ml, -20℃储存.
? 10mml/L PMSF(苯甲基磺酰氟) 用异丙醇溶解PNSF成1.74mg/ml(10mml/L)分装成小份
储存
? PBS(磷酸缓冲盐溶液) 800ml蒸馏水溶8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4、0.24g
KH2PO4，
HCl调pH至8.0, 加水定容至1L, 高压灭菌20分钟, 室温保存
? I液
50mM 葡萄糖(无菌过滤后使用)
25mM Tris.Cl(pH8.0)
10mM EDTA(pH8.0) 高压灭菌后存于4℃。
? II液 0.2M NaOH 0.1% SDS
? Ⅲ液(乙酸钾溶液) 60 ml 5mol/L乙酸钾溶液中加入11.5ml冰乙酸和28.5ml水
? 10%SDS (十二烷基硫酸钠) 900ml水中加入100g电泳级SDS, 加热至68℃. 加入
几滴浓盐酸调pH至7.2, 定容1L, 分装备用
? 1M Tris 800ml水溶121.1gTris碱, 加入浓HCl调pH至所需值
pH HCl
7.4
7.6
8.0 70ml 60ml 42ml 室温时调pH定容至1L,分装后灭菌
? X-gal X-gal 为5-溴-4氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷, 用二甲基酰胺溶解X-gal配制成
20mg/ml的储备液. 保存于玻璃管或聚丙烯管中, 铝箔包裹-20℃保存
? 溶菌酶 用水配制成50mg/ml,分装成小份, -20℃保存, 一经使用后便丢弃
? 蛋白酶K 储存液:20mg/ml(溶于水); 保存: -20℃; 反应浓度: 50μg/ml;
反应缓冲液:0.01mol/LTris(pH8.0), 5 mmol/L EDTA, 0.5%SDS; 反应温度:37-56℃
? RNA酶 将胰RNA酶(RNA酶A)溶于10mmol/L Tris.Cl(pH7.5)、15mmol/LNaCl中，
配成10mg/ml，于100℃加热15分钟，缓慢冷却至室温，分装成小份，保存于-20℃。 ? STE(亦称TEN)
0.1mol/L NaCl; 10mmol/L Tris.Cl(pH 8.0); 1mmol/L EDTA(pH 8.0)。
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? TE
pH 7.4
10mmol/L Tris.Cl(pH 7.4) 1mmol/L EDTA(pH 8.0)
pH 7.6
10mmol/L Tris.Cl(pH 7.6) 1mmol/L EDTA(pH 8.0)
pH 8.0
10mmol/L Tris.Cl(pH 8.0) 1mmol/L EDTA(pH 8.0)
? TNT(WB专用)
50mmol/L Tris.Cl(pH 7.5)
150mmol/L NaCl
0.05% Tween 20
? 碱性磷酸酶缓冲液
100 mmol/L NaCl
5mM MgCl2
100 mmol/L Tris.Cl(pH9.5)
? 2XSDS蛋白凝胶加样缓冲液
100mmol/L Tris.Cl(pH6.8)
200mmol/L二硫苏糖醇(DTT)
4%SDS(电泳级)
0.2%溴酚蓝
20% 甘油
?Tris-甘氨酸
使用液:1X :25mmol/L Tris 浓储备液(每升):5X: 15.1g Tris碱
250mmol/L甘氨酸 94g甘氨酸(电泳级)(pH8.0)
0.1%SDS 50ml 10%SDS(电泳级) ? 6X DNA Loading buffer
25%溴酚蓝
40%(W/V)蔗糖水溶液 4℃储存
? 脱脂奶封闭液
5% 脱脂奶粉
0.02% 叠氮钠
? 转移缓冲液
配制1L 转移缓冲液，需称取2.9g甘氨酸、5.8gTris碱、0.37g SDS, 并加入200ml甲醇，加水至总量为1L。
? 细胞及细菌裂解缓冲液
50 mmol/LTris.Cl(pH8.0)
1 mmol/L EDTA(pH8.0)
100 mmol/L NaCl
? 水 丙烯酰胺 Tris.Cl 10%SDS 10%过硫酸铵 TEMED 10ml 12%分离胶3.3ml 4ml 2.5ml(1.5M ,pH8.8) 0.1ml 0.1ml 0.004ml
10ml 5% 积层胶6.8ml 1.7ml 1.25ml(1M,pH6.8) 0.1ml 0.1ml 0.01ml
核苷酸序列资料：
GenBank ---美国(GenBank Submissions)
EMBL（欧洲分子生物学实验室核苷酸序列资料库）--德国（Data Submissions）