室内质控标准操作规程

1.目的

2.适用范围

3.职责

4.原理

5.所需设备和试剂

6.检测环境条件

7.步骤与方法

7.1人员的培训和职责

做好质控的关键在人员，通过培训，使其掌握质控的基础知识、一般方法，明确各自的职责。

7.2实验设备的维护及校准

仪器要求定期维护、校准；强检的仪器要定期送计量检定部门检定；非常检的设备可以自检，自检的方法采取比对试验，包括室间质控、生产厂家的定期校准。常用设备质量控制的质控标准、质控方法及质控频率见下表

设备的质量控制

设备 质控标准 质控方法 冰箱 温度范围：2～6℃ 在冰箱中放置一盛有水的容器，其水量与

所贮存的血液成分量相当，至恒温后测定 1次/月 液体的温度

报警功能：高于6℃或低于 用高于6℃或低于2℃的水浸泡警报器上的

2℃或切断电源应发出警报 温差电偶，将会发出警报，切断电源时也 1次/月 应发出警报

低温冰箱 温度范围：低于-20℃ 在低温冰箱中放置一盛有40%异丙醇或酒精

的容器，其量与所贮存的血液成分量相当， 1次/月 至恒温后测定液体的温度

报警功能：切断电源应发出警报 切断电源时应发出警报

温度波动性：℃ 恒温后用计量检定合格的温度计，在同一 1次/月 测试点分别测定0和15min时的温度

温度均匀性：℃ 恒温后用计量检定合格的温度计，在东、 1次/月 南、西、北中位置均匀选取5点，测定温度

离心机 离心时间：+10% 用标准计时器连续测量5次，每次测试20s 1次/季度 ，取其平均值与离心机上的定时器比较

离心速度：+50转/分 用标准转速仪，按说明书测定

7.3标本的控制

标本要求有唯一性标识。标本在采集、运送、交接、处理、贮存、销毁和记录等环节上都要控制，并有追溯性。

7.4试剂的质量控制

选用质量可靠、通过质量评价的试剂盒。日常工作应进行两个水平的质量控制。

7.4.1常规使用方法的每日质量控制，对每一新批次试剂要进行全面的质量控制，包括外观、标签、批号、有效期是否符合使用要求。

7.4.2对每日连续使用的试剂，工作前应做试验，保证试剂的有效性；非连续性使用的试剂，

每次使用前都要进行质量控制，并填写《常用试剂质控记录》。

（1）单克隆抗-A/B试剂和反定型试剂红细胞：通过不同批次试剂的相互对照检测来控制质量，操作步骤执行《试管法鉴定ABO和RhD血型标准操作规程》，抗体效价合格的抗体试剂其反应强度试管法应为4+，如出现任何弱反应，必须查找原因或停用该试剂。ABO和RhD定型试剂质量控制及最低标准分别见下表。

ABO和RhD定型试剂质量控制

检验项目 质量要求 质控频率 外观 没有溶血、沉淀、颗粒或凝胶状物质 每天

反应性和特异性 没有免疫性溶血、红细胞缗钱状凝集。与含有相应抗原的 每批使用前 红细胞反应结果明显，没有假阳性

效价 室温时，未稀释的血清与含有相应抗原的红细胞反应凝集 每批使用前 强度达“3+～4+”。与A1、A2、A2B细胞反应效价应符合

最低标准

亲和力 抗体的亲和力是指在免疫反应中，抗体和抗原之间相作用 每批使用前 的结合能力或强度。血清学中亲和力大小通常以出现凝集

的时间来评判。与A1、A2、A2B、R1r细胞反应亲和力应

符合最低标准

ABO和RhD定型试剂的最低标准 定型试剂 试验细胞 效价 亲和力（s） 抗-A A1 128 15 A2B 64 45 抗-B B 128 15 （R1r细胞是指基因型为CcDee的Rh阳性细胞）。（2）单克隆抗-D试剂：须采用Dce/dce或Dce/dce细胞对照（阳性对照）和dCe/dce细胞（阴性对照）进行试验。具体操作执行《试管法鉴定ABO和RhD血型标准操作规程》。

（3）抗球蛋白试剂微柱凝胶卡：选用IgG型抗-D致敏的红细胞做阳性对照，红细胞不规则抗体筛选阴性AB型血清做阴性对照，正常献血者O型红细胞做空白对照。具体执行《抗球蛋白试验标准操作规程》和《微柱凝胶试验标准操作规程》。多特异性抗球蛋白试剂质量控制的检验项目、质量要求及质控频率见下表。

检验项目 质量要求 质控频率 外观 没有沉淀、颗粒或凝胶状物质 每天 反应性 和特异性 无溶血活性；在交叉配血试验中，未致敏的红细胞与相容的血清充分 每周 反应，洗涤后加入抗球蛋白试剂不发生凝集

以不超过10ng/ml的抗-D试剂致敏D阳性红细胞，采用抗球蛋白法 每周 能够检测出来

与以补体结合同种抗体致敏的红细胞的凝集强度较无致敏时高；或与 每批使用前 以C3b和C3d致敏的红细胞发生凝集

（4）筛选红细胞和谱细胞：如果连续使用，用已知的弱抗血清检测（可先稀释已知特异性的单克隆抗体试剂），1周内观察抗原强度的降低情况，如果非连续使用，用已知的弱抗血清检测，同时对试验样品平行检测。Leb、P1和c抗原在贮存期间抗原性减弱仍可使用。具体执行《红细胞不规则抗体筛选及鉴定标准操作规程》。筛选红细胞及谱细胞质量控制见下表。

筛选红细胞及谱细胞质量控制

检验项目 质量要求 质控频率 外观 上清液没有溶血或浑浊 每天

反应性和特异性 与针对已知红细胞抗原的抗血清反应清晰 保质期内第1次使用及最后1次 使用时 （5）凝聚胺试剂：选用IgG型抗-D致敏的红细胞做阳性对照或试剂盒提供的阳性对照品与O型和RhD阳性献血者红细胞做阳性对照。具体执行《凝聚胺试验标准操作规整》。其中以低离子盐溶液质量控制为例，质量要求见下表。

低离子盐溶液质量控制

检验项目 质量要求 质控频率

外观 肉眼观察没有混浊或颗粒 每天

pH 6.7（范围6.5～7.0） 缓冲盐：每批使用前； 非缓冲盐：每天

导电性 3.7ms/cm(23℃)范围（3.44～3.75） 每批使用前

7.5实验操作步骤的质量控制

有阴阳对照品设置的试剂或试剂盒，每次试验操作时必须同时进行阴阳对照试验及自身对照，试验操作步骤严格执行标准操作规程。

7.6室内质控试验结果记录到《输血科（血库）室内质控记录》。

7.7室内质量考核

质量管理人员定期将已知结果的血标本分成若干份，发给不知道血标本检测结果的技术人员进行检测，评定各自结果的可靠程度。

7.7.1定期在工作人员中分配相同的血标本，同步进行检测，比较他们检测的凝集程度（如用已知定型试剂测定相对应的红细胞抗原，定型试剂以选择出现“2+”凝集度为好）。

7.7.2定期或不定期重复熟练技师做过的试验，评价操作的可靠性。必要时，也可以把这些标本模拟为受检标本，插入常规标本之间进行检查。

7.7.3检测项目可参照室间质控的内容，也可根据科室情况自行安排。如：①ABO正反定型不一致血标本（如含抗-A1的A2型血标本）的检验；②免疫抗体（抗-D）致敏红细胞的DAT；③含有冷凝集素的血标本的血型鉴定与交叉配血试验。

7.8室内质控数据的管理

每月末应对当月所有的质控数据进行汇总和统计处理，并做本月室内质控评价。

7.9失控处理

遇到失控，应按失控原因分析步骤进行分析，并采取相应措施予以纠正，可采用如下步骤去寻找原因：

7.9.1立即重新测定同一质控品，主要是用以查明人为误差，每一步都认真仔细操作，以查明失控的原因；另外，还可以查偶然误差，如是偶然误差，则重测的结果应在允许范围内，如果重测结果仍不在允许范围，则可以进行7.9.2。

7.9.2新开质控品，重测失控项目。如果新开的质控血清结果正常，那么原来的质控品可能过期或在室温放置时间过长而变质；如果结果仍不在允许范围，则进行7.9.3。

7.9.3进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，如果结果仍不在允许范围，则进行7.9.4。

7.9.4请专家帮助。如果前五步都未能得到在控结果，那可能是仪器或试剂的原因，只有和仪器或试剂生产厂家联系，请求他们的技术支援。

第二篇：6.2c室内质控标准操作规程

室内质控标准操作规程

1. 目的

为检测、控制实验室测定工作的精密度、准确度，提高常规测定工作的批间、批内的一致性，制定本规程。

2. 适用范围

适用于输血科对血型血清学实验室检测的全过程质控。

3. 职责

输血科所有工作人员负责血型血清学实验室检测的全过程质控。

4. 原理

实验室室内质量控制（以下简称室内质控）的目的是为获得可靠的实验结果。室内质控就是监测过程，以评价检验结果是否可靠，以及排除质量环节中所有导致不满意的原因。广义上室内质控适用于得出检验结果所有步骤的活动，从收集标本开始，直到报告测定结果，是保证高质量操作的必要措施。

5. 所需设备和试剂

设备 普通离心机，血型血清学专用离心机，电热恒温水浴箱，普通显微镜。

试剂 凝聚胺试剂盒，抗球蛋白试剂，单克隆抗-A，抗-B试剂，A、B、O型试剂红细胞，红细胞不规则抗体筛选细胞，

红细胞不规则抗体筛选阴性AB型血清，IgG-D致敏的红细胞等。

6. 检测环境条件

室温应控制在18～27℃。

7. 步骤与方法

人员的培训和职责 做好质控的关键在人员，通过培训，使其掌握质控的基础知识、一般方法，明确各自的职责。

标本的控制 标本要求有唯一性标识。标本在采集、运送、交接、处理、贮存、销毁和记录等环节上都要控制，并有追溯性。

试剂的质量控制 选用质量可靠、通过质量评价的试剂盒。日常工作应进行两个水平的质量控制。

常规使用方法的每日质量控制，对每一新批次试剂要进行全面的质量控制，包括外观、标签、批号、有效期是否符合使用要求。

对每日连续使用的试剂，工作前应做试验，保证试剂的有效性；非连续使用的试剂，每次使用前都要进行质量控制，并填写《常用试剂质控记录》。

（1） 单克隆抗-A／B试剂和反定型试剂红细胞：通过对不同批次试剂的相互对照检测来控制质量，操作步骤执行《试管法鉴定ABO和RhD血型标准操作规程》，抗体效价合格的抗体试剂其反应强度应为4+，如出现任何弱反应，必须

查找原因或停用该试剂。ABO和RhD定型试剂质量控制及最低标准见表1和表2。

表1 ABO和RhD定型试剂质量控制

检验项目 质量要求 质控频率 外观 没有溶血、沉淀、颗粒或凝胶状物质 每天

反应性和特异性 没有免疫性溶血、红细胞缗钱状凝集。与含有相应抗原的红细胞反应 每批使用前 结果明显，没有假阳性。

效价 室温时，未稀释的血清与含有相应抗原的红细胞反应凝集强度达“3+~4+” 每批使用前 。与A1细胞反应效价应符合最低标准。

亲和力 抗体的亲和力是指在免疫反应中，抗体和抗原之间相互作用的结合能力或 每批使用前 强度。血型血清学中亲和力大小通常以出现凝集的时间来评 与A1细胞反应

亲和力应符合最低标准。

（2）抗球蛋白试剂及微柱凝胶卡：选用IgG型抗-D致敏的红细胞做阳性对照，红细胞不规则抗体筛选阴性AB型血清做阴性对照，正常献血者O型红细胞做空白对照。具体执行《抗球蛋白试验标准操作规程》和《微柱凝胶试验标准操作规程》。多特异性抗球蛋白试剂质量控制的检验项目、质量要求及质控频率见表3

表3 多特异性抗球蛋白试剂质量控制

检验项目 质量要求 质控频率 外观 没有沉淀、颗粒或凝胶状物质 每天 反应性和特异性 无溶血活性、在交叉配血试验中，未致敏的红细胞与相容的血清充分 每周 反应，洗涤后加入抗球蛋白试剂不发生凝集。

抗-D试剂致敏D阳性红细胞，采用抗球蛋白法 每周 能够检测出来

与以补体结合同种抗体致敏的红细胞的凝集强度教无致敏时高 每批使用前

（3）筛选细胞：如果连续使用，用已知的弱抗血清检测可

先稀释已知特异性的单克隆抗体试剂），1周内观察被测抗原强度的降低情况，如果非连续使用，用已知的弱抗血清检测，同时对试验样品进行平行检测。Le、P1和c抗原在贮存期间抗原性减弱仍可使用。具体执行《红细胞不规则抗体筛选及鉴定标准操作规程》。筛选细胞质量控制见表4。

表4筛选细胞质量控制

检验项目 质量要求 质控频率

外观 上清液没有溶血或混浊 每天

反应性和特异性 与针对已知红细胞抗原的抗血清反应清晰 保质期内第1次使用及最后1次使用时 b

凝聚胺试剂：选用IgG型抗-D致敏的红细胞做阳性对照或试剂盒提供的阳性对照品与O型RhD阳性献血者红细胞做阳性对照，红细胞不规则抗体筛选阴性AB型血清加O型RhD阳性献血者红细胞做阴性对照。具体执行《凝聚胺试验标准操作规程》。

试验操作步骤的质量控制 有阴阳对照品设置的试剂或试剂盒。每次试验操作时必须同时进行阴阳性对照试验及自身对照，试验操作步骤严格执行标准操作规程。

室内质控试验结果记录到《输血科室内质控记录》。

失控处理 遇到失控，应按失控原因分析步骤进行分析，并采取相应措施予以纠正，可采取如下步骤去寻找原因：

1． 立即重新测定同一质控品，主要是用以查明认为误差，每一步都认真仔细操作，以查明失控的原因；另外，还可以

查偶然误差，如是偶然误差，则重测的结果应在允许范围内；如果重测结果仍不在允许范围，则可以进行步骤2。

2． 新开质控品，重测失控项目。如果新开的质控血清结果正常，那么原来的质控品可能过期或在室温放置时间过长而变质；如果结果仍不在允许范围，则可以进行步骤3。

3.进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，如果结果仍不在允许范围，则可以进行步骤4。

4.请专家帮助。如果前五步都未能得到在控结果，那可能是仪器或试剂的原因，只有和仪器或试剂生产厂家联系，请求他们的技术支援。