1.0检验目的：生化室室内质控标准操作程序

2.0检验原理：无

3.0性能参数：无

4.0原始样品要求：无

5.0容器和添加剂：无

6.0设备和试剂：仪器: 7060全自动生化分析仪，康立AFT-500D电解质分析仪

试剂:室内质控各项目配套试剂

7.0校准程序：无

8.0检验程序：

8.1血清质量控制品

a)质控品的来源：广东省临床检验中心

b)质控品与病人样本同时处理

c)质控品的处理及分析判断。

d)质控结果的判断：质控结果合格，即发报告；质控结果不合格，报告生长组组长，必要时上报科主任，会同有关人员，查找原因，妥善解决。

e)每次检测质控结果须有记录。

f)失控原因及纠正措施须有记录。

附：室内质控品的制备及操作

质控品制备：使用省临检中心的质控品，质控品用蒸馏水充分溶解后，用2.0ml或0.5ml的离心管分装放

入-20℃的冰格进行保存。

操作：每次检测过程中将室内质控品与标本同时检测，记录此质控品的检测结果；计算前20次检测结果的平均值作为本批质控品的靶值（X），计算标准差（SD）和变异系数（CV），并在室内质控图上描点、连线。

8.2室内质控图的使用方法--Levey-Jennings质控图方法

8.2.1  描点

a）图中X线为靶线，X±2s为警告线，X±3s为失控线。

对于同一批号的质控血清不论使用几个月，其空图均不变化。只要将图纸上方“起止日期”项填入每个月的实际起止日期即可。

b）每次将该批号质控血清按有关规定程序复融随同病人的标本同时检测。将日期、检测结果和操作者如实记录在质控结果记录表上，并把质控结果画出图上的对应点，用直线将该点与前一次的点连接。

c）月底计算当月全部质控血清检测结果的X、SD和CV，并进行图形分析和小结，将质量控制图存入室内质控资料档案。

8.2.2  图形分析

a） 如果在X±3s线以外，则为失控，应立即报告生化组组长，迅速查找原因。必要时复测标本，然后方可发出报告，并将失控情况、查找过程及处理结果等详细记录。

b）如果在X±2s线以外，或出现连续6点以上在一侧等规律变化，均应即时向生化组组长反映，并积极查找原因。但当天的检验结果一般可以发出。

9.0室内质控：无

10.0干扰和交叉反应：无

11.0结果计算程序原理：无

12.0生物参考区间：无

13.0患者检验结果的可报告区间：无

14.0实验室解释（临床意义）：

14．1  通过观察图形的规律性变化进行误差分析，消除误差来源

a）曲线漂移：提示有系统误差，准确度发生了一次性的向上或向下改变。这种变化往往是由于一个新的情况引起的。如更换不同批号试剂，启用新批号的质控血清、操作人员的变换等。在找原因时，应重点注意“漂移”前后发生了那些变动的因素。

b）趋势性变化：向下或向上的趋势性变化表明检测的准确度发生了渐渐地变化。这种变化往往是由于一个逐渐改变的因素造成的。如质控血清的降解，试剂效价的降低等。

c）连续多点分布在靶值一侧：目前，一般认为质控血清的检测结果连续6天以上出现在靶值同一侧，则应迅速查找原因，争取尽快使之回复围绕在靶值随机分布的状态。因为按照统计学原理，由纯随机误差造成的这种情况的可能性很小。连续6次以上出现在靶值同一侧可能性小于1.5%。因此凡出现连续6次以上出现在靶值同一侧者均有可能存在非随机误差因素。如结果与靶值偏离并不太大，不会给临床使用带来太大影响时，一般化验报告可以照常填发。

d）其他规律变化：（周期性等）

14．2通过图形的资料对比进行误差分析，消除误差来源

a）每个月的月底将该月的全部质控血清检测结果的X和SD与该批测定的X和SD进行比较。如果X发生了变化，说明准确度发生了变化提示有非随机误差存在。如果当月SD不同则表明检测的精密度发生了变化。

b）将使用同一批号质控血清的X和SD按月份列出。如果X在逐月上升，应考虑保存不当造成的试剂效价降低或质控血清本身出现降解。如果各月份X基本一致而SD逐月加大，则主要提示常规工作的精密度下降，应重点从操作、管理上找原因。

c）在数年中，把每个月的CV和失控规律列成表，可用作检测质量的历史性回顾及趋势分析

15.0注意事项：

 16.0备注：

第二篇：临床生化标准操作程序文件(SOP)[1]

临床生化标准操作程序文件

（临床生化检验SOP文件）

大同滨河肝胆病医院检验科

CS600B全自动生化分析仪

标准化操作程序文件

单位：大同滨河肝胆病医院

科室: 检验科生化室

文件编号：

版本：

批准施日期：

有校期: 一年

复审计划：每年复审，测定系统变化时需进行修订 发放部门：检验科生化室

编写者：

审批者:

保管者:

修订者：

CS-600B全自动生化分析仪

标准化操作程序文件

【仪器运行条件】

为保证仪器的正常运行，仪器必须满足下列条件：

1.灰尘少、通风良好的环境，避免阳光直接照射。

2.地面水平良好(斜度<1/200)，地面强度要能够承受仪器的重量（850kg）。

3.室内温度保持在15~32℃，温度变化不超过±3℃/小时。

4.室内相对湿度应保持在45~85℃，且不结露。

5.纯水供应：反渗水或离子交换水。出水量：40升/小时，水压：0.5~3.5kg/cm2。

6.电源供应：220V±10%，50~60Hz，最大功率4KVA。有保护性接地(接地电阻<10Ω下)。7.放置本仪器的房间请不要带入以下电器：手机、对讲机等发出特定电磁波的小功率电器。

【开机程序】

１）开机前检查

1.供电系统（包括UPS）是否正常。

2.供水系统是否正常。

3.检查样品针、试剂针、搅拌针、清洗针是否有弯曲、堵塞、污物、漏水等，如有上述情况发生，参照仪器维护、保养说明书处理。

4.检查清洗液（迪瑞原厂供应），包括样品针、搅拌针、去污剂箱及试剂位45（抗菌无磷）和45位（碱性）各种清洗液，必要时补足。

5.检查打印机是否正常、打印纸是否安装好及是否联机（打印机上Online灯亮）。

6.仪器及操作台面表面干净、无污物，机房空调正常开启。

2）开机

为保证试剂舱的冷藏作用，位于仪器右后下方的总电源（ON）可长期处于开启状态，同时UPS长期处于工作状态。

1.打开仪器右侧电源（ON）开关，记录开机时间。

2.待仪器自检及程序装载（15分钟）结束，仪器至备用（Ready）状态，如有错误（Trouble）,根据错误代码查找维护保养说明书检查原因，及时处理。

3.自动开机在自动开机程序中设置开机时间：

MAIN MENU F5：DEFINE F6：DEFINE OPTIONAL PARAMETERS F2：FOR AUTOMATIC STARTUP CONDITION

3） 执行开机程序Startup1 或Startup2

开机程序设置：

MAIN MENU F5：DEFINE F6：DEFINE OPTIONAL PARAMETERS

F3：FOR STARTUP1 或F4：FOR STARTUP2

开机程序至少应包括：

1.更换仪器内水箱纯水一次。

2.更换孵育槽内纯水一次。

3.清洗管道3次。

4.清洗液清洗探针3次。

5.纯水清洗探针3次。

6.清洗比色杯（酸、碱、水）。

7.测定水空白。

8.根据具体试剂空白变化情况设定试剂空白检查周期。

9.检查剩余试剂体积。

四、根据检查剩余试剂体积及当日工作量，及时补足当日工作所需试剂量。

五、自动开机在自动开机程序中设置每日开机条件（同上）：

MAIN MENU F5：DEFINE F6：DEFINE OPTIONAL PARAMETERS

F2：FOR AUTOMATIC STARTUP CONDITION

【校准程序】

1.校准物的准备

将校准物从冰箱取出，冻干校准物按说明书加入蒸馏水复溶，轻轻颠倒混匀3次，不可用力震摇，室温放置30分钟至完全溶解；液体校准物从冰箱取出，室温放置15分钟以平衡至室温。校准物的选择尽可能选择配套仪器厂家校准品。

2.上机校准程序

[1] MAIN MENU F1：WORKLIST F1：ENTER+右空格键 F4：DEFINE CALIBRATION F1：WORKLIST1

[2] 用光标键选欲校准项目，用“SELECT”键选择“1”（试剂空白）及“2”（校准）， F5：ENTER 。

[3] 将校准品按屏幕显示放入绿色校准架相应位置，将校准架置入进样轨道，打开进样架（FEED）。

【质控程序】

1.质控物的准备

将质控物从冰箱取出，冻干质控物按说明书加入蒸馏水复溶，轻轻颠倒混匀3次，不可用力震摇，室温放置30分钟至完全溶解；液体校准物从冰箱取出，室温放置15分钟以平衡至室温。至少有两水平质控品，8小时一次。质控物的选择尽可能选择配套仪器厂家及人血清基质质控材料。

2.上机质控程序

[1] MAIN MENU F1：WORKLIST F1：ENTER+右空格键 F4：DEFINE CONTROL F1：WORKLIST1

[2] 用光标键及SELECT键选择质控项目，F5：ENTER 。

[3]将质控品按屏幕显示放入黄色质控架相应位置，将质控架置入进样轨道，打开进 样架（FEED）。质控在控方可进行标本检测。

【标本检测程序】

1.输入标本编号及测定项目：

MAIN MENU F 1：WORKLIST F1：ENTER F1：TESTS

[1]输入顺序号（REQUEST NO）及样本编号（PATIENT ID NO）。

[2]输入检测项目通道号或组合分析（PROFILE）代码

[3]F5：ENTER。

2.编辑标本架号（COMPILE）：

[1] MAIN MENU F 1：WORKLIST F2：COMPILE F1：BY PATIENTS

[2] 输入起始顺序号（REQUEST NO，FROM），终止顺序号（REQUEST NO，TO）， ROUTINE（1），开始架号（STARTING RACK NO）。

[3] F5：ENTER。

3.将分离好的血清或血浆标本置入设置好的灰色样品架上，注意样本不可有凝块，样本量不可少于0.2ml 。

4.打开进样架（FEED）。

5.测试完毕，执行关机程序（SHUT DOWN）或设置自动关机。

【关机程序】

1.作好各种工作记录登记：当日工作量登记表，当日校准登记表，室内质控登记表，仪器维护保养登记表。

2.执行关机程序Shut-down

关机程序设置：

MAIN MENU F5：DEFINE F6：DEFINE OPTIONAL PARAMETERS F5：FOR SHUTDOWN 关机程序至少应包括：

[1] 清洗管道3次。

[2] 清洗液清洗探针3次。

[3] 纯水清洗探针3次。

[4] 清洗比色杯（酸、碱、水）。

[5] 测定水空白。

[6] 检查剩余试剂体积。

3.自动关机在自动关机程序中设置每日关机条件（同上）：

MAIN MENU F5：DEFINE F6：DEFINE OPTIONAL PARAMETERS

F2：FOR AUTOMATIC STARTUP CONDITION

4.关机后维护

[1]清擦样品针、试剂针、搅拌针、清洗针。

[2]检查清洗液（Shimadzu原厂供应），包括样品针、搅拌针、去污剂箱及试剂位31（ACID）和32位（ALKLI）各种清洗液，必要时补足。

[3]关闭水处理电源。

[4]记录关机时间。

[5]及时补足次日工作所需试剂量。

[6]清洁仪器及操作台面。

[7]关闭机房空调。

【维护保养程序】

1.日保养

[1]检查去污剂箱清洗液（NEW CLEAN，8%）液面，及时更换。

[2]更换样品针清洗液（NEW ALKLI，5%）。

[3]更换搅拌针清洗液（NEW ALKLI，5%）。

[4]更换去离子水箱纯水。

[5]更换孵育槽纯水。

标本的接收与拒收

标准化操作程序文件

单位：大同滨河肝胆病医院

科室: 检验科生化室

文件编号：

版本：

批准施日期：

有校期: 一年

复审计划：每年复审，测定系统变化时需进行修订 发放部门：检验科生化室

编写者：

审批者:

保管者:

修订者：

标本的接收与拒收

1 病人的准备

做血液检验项目检验的病人，一般要求采血前禁食12~14小时，采血的前一天避免吃高脂肪、高蛋白类食物，避免饮酒。否则，会引 起血脂及某些血清酶结果升高，甚至血清出现混浊，影响整个检验结果；进行葡萄糖耐量试验的病人，在试验前3天给予适量的碳水化学 物饮食，有利于取得正确的结果；做碘131吸收试验者，在试验前一个月停服一切含碘的药物和含碘丰富的食物，如海产品类。

2 采血时间

血液生化检验一般要求早晨空腹安静时采血。因为体内的各种化学成份受许多因素调节：如饮食后大量葡萄糖及脂类物质吸收入血，使血 糖和血脂上升，游离脂肪酸及无机磷降低；运动后会使乳酸、丙酮酸、乳酸脱氢酶、转氨酶、肌酸激酶等升高，血糖降低；昼夜变化大的 成份有皮质醇、血清铁、胆红素等；日间变化大的主要是代谢废物成份如尿素、尿酸等；大量饮水可致血液稀释等等。所以，做血液生化 检验时应掌握好采血时间。但是，对重症昏迷或急症病例，可随时采血送检糖、钾、钠、钙、血气分析、淀粉酶等项目。但在输液时采血 应避免送检项目受输液成份的影响，如输液中补钾、补糖、补硷时送检，对血钾、血糖、二氧化碳结合力等项目均有影响。

3 采血部位

成人一般取肘部静脉，肥胖者可用腕背静脉；婴儿常用颈部静脉、股动脉或前囟静脉窦；刚出生的婴儿可收集脐带血；尸体解剖者取心脏 血；血气分析一般采动脉血；检验只需微量全血时，成人从耳垂或指尖取血，婴儿从大脚趾或脚跟取血；输液病人采血应避免在输液的同 一侧上肢或下肢采血，烧伤患者采血应避免穿剌炎症或水肿部，以免影响结果。 4 采血操作及送检的注意事项

4．1 采血器械：采血用的注射器、试管必须干燥清洁。注射器及针头不宜用酒精消毒。目前多用一次性注射器及试管。

4．2 采血操作：必须按无菌操作，采血部位皮肤必须干燥，止血带不可缚扎过久，抽血时速度不可过快，以免血细胞破裂，采血后应卸下针头 再将血液沿管壁徐徐注入试管内。

4．3 防止气体逸散：采集血气分析样本，抽血时注射器内不能有空泡，抽出后立即用小橡皮密封针头，隔绝空气。因空气中的氧分压高于动脉 血，二氧化碳分压低于动脉血；作二氧化碳结力测定时，盛血标本的容器亦应加塞盖紧，避免血液与空气接触过久，影响检验结果。

4．4 防止分解及自身变化：采血后应尽快送检。因血液中有些化学成份于离体后极易分解，使其含量改变，如血糖及酶类测定，时间过久，血 细胞酵解可使血糖下降，酶活力变化等。有些化学成份在细胞内外相差悬株，离体时间过长，细胞内外浓度会发生变化，影响测定结果。 如肌酸激酶、乳酸脱氢酶、电解质等。

4．5 防止污染：有些检查项目要求极严格，其采血器具及标本容器必须经过化学清洁。如血氨、铜、锌、铁等项目，因其含量极低，稍有污染 即影响结果。作淀粉酶测定时，要防止唾液污染，因唾液中含有大量的淀粉酶，污染后会引起假性淀粉酶升高。

4．6 防止溶血：作各类生化检验，要防止血细胞破裂溶血，因溶血引起细胞内外浓度改变，可使钾、胆红素、氯化物、无机磷、ALT、AS T、LDH等升高，钠、钙、AKP等降低，溶血对某些实验的反应过程干扰：如血红蛋白可直接抑制脂肪酶的活性，使脂肪酶降低。溶 血可影响呈色反应终点为红色的实验，如酶法测定血糖、胆固醇、甘油三酯、胆红素的

重氮反应、尿素的二乙酰肟法等。

5 抗凝剂的选择

生化检验大部份项目都采用血清，但有些项目需用血浆或全血，采集的血液必须加入抗凝剂。抗凝剂的种类较多，如选择不当，亦会影响 检验结果的准确性。下面介绍几种生化检验常用的抗凝剂及其用途：

5．1 草酸钾：常用于尿素、肌酐、纤维蛋白原等测定，不能用钾、钙等测定，对LDH、丙酮酸激酶、AKP和淀粉酶有抑制作用。

5．2 肝素：常用于电解质、血气分析、血氨等测定。其钠盐可使淀粉酶升高。

5．3 氟化钠：常用氟化钠—草酸钠混合抗凝剂作血糖测定的抗凝剂，它可抑制血细胞葡萄糖酵解酶的作用，延长标本的保存时间。

5．4 二乙胺四乙酸钠盐（EDTA-Na2）：生化常用的抗凝剂，但不能用于钙、钠、及含氮物质的测定，对淀粉酶、肌酸激酶、AKP、 ACP、5’-核苷酸酶等可抑制，对丙酮酸激酶有明显升高的作用。

正确的血液收集方法

采集步骤：

查看检验单，询问病史，查对检验单上病人姓名、性别、年龄等项目与病人是否吻合，耐心检查需要空腹血检验项目要询问病人是否8小 时以内没有能量摄入，询问病人在检验前是否有足够的休息；需要增添项目时先与出具检验申请单的医生联系。

请患者准备。（“请将左手衣袖挽起，手伸直平放，拳头握紧。”）对孩子应多哄劝，避免剧烈躁动、哭闹。对于紧张或有晕血史的病人 要进行安慰（“您可以侧过身去，不看很快会好”）。 采血器材准备，选择相应的真空采血管；并记录采集时间。

选择穿刺血管：扎好压脉带，观察血管走向，选择穿刺点，松开压脉带（压脉带压迫时间不能超过1分钟），正在输液的病人绝对不可同 侧采血，更不可以利用原有的输液针头采血。 消毒：以穿刺点为圆心，用蘸有碘伏的棉签由内到外螺旋型涂抹，消毒范围为直径大约3厘米，注意消毒过的地方不能重复涂抹，在涂 抹的过程中棉签必须也要同时旋转。

采样及混匀：等待碘伏干了以后（必须等到干了以后，否则达不到消毒效果），再次扎好压脉带，将针头平面朝上与手臂成15°穿刺， 最好一针见血。拔出采血管后立即进行颠倒8次混匀。在抽血时要询问病人感受（如有无心慌，头晕等情况），当出现异常时如：?病人 出汗、面色苍白、晕倒时立即拔出针并急救?操作失败，取得病人谅解，再次进行操作（“对不起，由于??的原因需要再取一次血，请 原谅”）。采样尽量在1分钟内完成。

止血：采血结束后，解开压脉带，退针后请病人“手指压住棉球，手伸直抬高于心脏，保持两分钟”（如果是有出血倾向患者如紫癜，ITP，血液病等要压迫5～10分钟直到无血渗出）。 标本前处理：将采血管与相应的检验单裹好，分类，尽快送检验项目所对应的采血管：

1.生化检验 黄头管

2.凝血试验 蓝头管

3.血常规 紫头管

采血顺序：红头管→蓝头管→紫头管→黄头管，注：除红头管外，其他各种采血管均须颠倒混匀8次。

以下检验项目须特别注意

1.所有生化项目、微量元素、血沉必须用空腹血；乙肝三对最好用空腹血。

2.糖耐量试验：（方法一）空腹抽血→吃饭（3分钟内进食75克葡萄糖或二两馒头一个）→饭后30分钟抽血→饭后60分钟抽血→饭后 120分钟抽血

（方法二）空腹抽血→吃饭（3分钟内进食50克葡萄糖）→饭后60分钟抽血注：血糖正常的人吃葡萄糖，高血糖的人吃馒头.

3. 激素检查：病人必须空腹且在抽血前要静坐30分钟，激素全套要抽血5ml。

临床化学检验血液标本的采集和处理

临床检验的目的是为临床提供准确可靠的实验诊断依据。为了保证实验数据的可靠性，在检验医学中必须坚持全面质量控制 （total quality control,TQC。即指对影响临床检验结果可靠性的各方面因素及各个环节进行质量控制）和全过程质量控制（即指对实验工作 的全过程进行质量控制和质量管理）。全过程质量控制包括实验前（分析前）、实验中（分析中）和实验后（分析后）三个阶段的质量控 制。在实验误差中实验前误差占70%，因而实验前质量保证对减少实验误差显得尤其重要。

实验前质量保证包括病人准备、 标本收集、处理、贮存和运输等， 因而能否正确地、规范化地采集和处理标本，是能否做到实验前质量保证的重要内容。在临床化学检验中，血液标本是最多应用的生物体液，血液标本因素是影响临床化学分析准确性和可靠性的最重要、最直接的因素。我国从我们的国情出发，参考了美国临床实验室标准化 委员会（NCCLS）的有关规定，对临床化学检验血液标本的有关问题也提出了相应的要求。 我国卫生标准技术委员会临床检验标准专业委员会（CCCLS）已对“临床化学检验血液标本的收集与处理”提出了“中华人民共和国卫生行业标准”，旨在通过标本方面的质量控制达到临床化学分析的质量保证。目前该“标准”文件正在待批中。

一、临床化学检验血液标本的定义

临床化学检验血液标本是指为完成某项或多项临床化学检验项目而采集的一定量的血液，包括抗凝及非抗凝血。

二、血液标本的采取

（一） 采取部位

１．静脉采血：应用最多的采血方式。常用的静脉为肘前静脉、腕背静脉，小儿和新生儿有时用颈静脉和前囟静脉。

２．动脉采血：主要用于血气分析时。常用的动脉为股动脉、肱动脉、桡动脉和脐动脉。 ３．毛细血管采血：适用于仅需微量血液的试验或婴幼儿。 常用部位为耳垂、指端，小儿有时为大趾和足跟。采血针刺入皮肤深度应为2mm (<2.5mm), 采血局部应无炎症、水肿等。

（二）标本类型

临床化学检验血液标本分为血清、血浆和全血3种。血清和血浆为临床常用， 除前者不含纤维蛋白原外，其余多数化学成分无差异；全血只有在红细胞内成分与血浆成分相似时才用； 血气分析、血红蛋白电泳等时用全血， 一般临床化学分析多不用全血。

三、全血处理为血清或血浆

血液标本采取后应尽可能早地自然地使血清（浆）从与血细胞接触的全血中分离出来。一般应于采血后2h内分离出血清或血浆。全血处 理为血清或血浆分为离心前、离心中和离心后三个阶段，对各不同阶段均有具体要求。

（一）离心前阶段

即指标本采集到离心处理前的一段时间。

１．血清：标本离心前一般应令其自行凝集，不可用木棍等剥离凝血块。通常于室温（22~25oC）放置30~60 min 血标本可自发完全凝集；冷藏标本凝集缓慢；加促凝剂时凝集加快（标本采集后应轻轻颠倒混合5~10次，以确保促凝剂作用）。

２．血浆：需用血浆标本时，必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，而且采血后必须立即轻轻颠倒采血管混合5~10次（以确保抗凝剂 发挥作用），5~10 min 后即可分离出血浆。 ３．冷藏标本：标本冷藏可抑制细胞代谢，稳定某些温度依赖性成分�煹�全血标本一般不能冷藏；血钾测定标本冷藏不得超过2h。 血液中儿茶酚胺、pH ／血气、氨、乳酸、丙

酮酸、胃泌素、甲状腺激素等检测时需用制冷的标本。

标本需要冷藏（2~8oC）时，标本采取后应立即将标本置于冰屑或冰水混合物（不可用大冰块），并且必须保证标本与制 冷物充分接触，保证制冷物达到标本的高度。

４．代谢抑制剂和防腐剂：某些添加剂加入血液标本中能抑制细胞代谢，可以防止血液标本贮存时分析物浓度的变化。血液葡萄糖测定时 ，如在血液中加入氟化钠，在血细胞未分离的情况下，葡萄糖在22~25oC时可稳定24h，2~8oC 时可以稳定48h；但在新生儿和儿童标本，由于红细胞压积高，用氟化钠难以控制细胞的糖酵解作用；甲醛－草酸钾抗凝保存剂不适合 血糖测定；氟化钠－麝香草酚混合剂因能抑制酶活性，不适用于酶学测定。 ５．标本采集现场：(1)标本采集后应尽快送往实验室，尤其当收集区温度超过22oC时此点更为重要；(2)血液标本 采集后血管必须加塞、管口向上、垂直放置，以减少管中内容物振动，促进凝血完全，防止标本蒸发、污染和外溅等；(3)已收集的血 液标本应温和地处理，要防止标本管振荡所造成的溶血；溶血可影响测定结果。有严重影响（使结果升高）的项目有：乳酸脱氢酶、血清 门冬氨酸氨基转移酶、血清钾和血红蛋白；引起值得注意的影响的项目有：血清铁（↑）、血清丙氨酸氨基转移酶（↑）和血清甲状腺素 （↓）；轻度受影响（增加）的有： 总蛋白、白蛋白、血清磷、血清镁、血清钙和酸性磷酸酶； (4)应避免对光线敏感的分析物暴露在人造光或太阳光（紫外线）照射下。如 VA 、VB6 、β－ 胡萝卜素、卟啉、胆红素等测定时，标本管应该用铝箔或类似物质包裹保护起来。

６．标本运送：全血标本应尽快从采血现场运送至实验室，如果运送距离较远，特别是因分析物稳定性有影响，必要时可于采血现场分离 出血清或血浆后，再送往实验室；标本运送过程中要注意标本的包装、温度要求、处理方法等，要确保分析成分的稳定性；标本管在运送 过程中要保持管口封闭、向上垂直放置。

７． 实验室接受标本及离心标本准备：(1)要有标本收取记录（应认真核对检验中清单，对有关情况要认真记录，标本接收及处理应签字登 记）； (2)对接受的标本要予以分类准备离心；(3)实验室接受标本后应仍保持标本管于密闭封口、 管口向上，垂直位放置。管塞移去后血中CO2丢失，会造成pH增加，离子钙和酸性磷酸酶减少， 尤其ｐＨ变化会影响某些检测结果的准确性；(4)标本凝集时间要充分 ；加抗凝剂的血液标本可以立即离心；加促凝剂的标本可于采血后5~15 min 尽早离心；抗凝的全血标本（锌、锂、原卟啉等测定时）可以不离心；(5)冷藏（2~8oC）标本应保持这个温度直到准 备离心。推荐用温度控制离心机； (6)离心标本前不主张用小木棒或类似器材去剥离附着于试管壁和管塞上的凝块，人为剥离会诱导溶血。如果必须露出试管壁或取下管 塞时，一定要十分注意，动作一定要轻柔。

（二）离心阶段

即指标本处于离心机里的一段时间。

１． 离心时间和相对离心力(RCF)：临床化学分析血液标本离心时，RCF(1000~1200)× ｇ，离心时间为5~10 min。

２． 温度控制离心： 离心时产热不利于分析物稳定，临床化学分析血液标本离心时必须采用温度控制离心机。 一些温度依赖性分析物 （如促肾上腺皮质激素、环腺苷酸、 儿茶酚胺等）应在4oC分离； 无特殊温度要求的分析物，离心温度应设定在20oC ~22oC；温度低于15oC可以人为地使血钾测定值增高；冷藏运送的标本必须在要求的温度下离心。 ３．关于再离心：标本离心最好一次完成，若需再次离心，应距上次离心相隔时间很短；对于含有分离物质的血标本绝不可以再离心。

（三）离心后阶段

指标本离心后和用于检测的血清或血浆被取出一定量之前的一段时间。

１． 血清或血浆与接触的血细胞和凝块的分离应在采血后尽快（2h内）完成。

２． 分离的血清或血浆的贮存：实验室的室温和血清或血浆的贮存温度、时间，是分

析物稳定性和测定结果准确性的重要参数。(1)于22 oC~25oC血清或血浆的保存不超过8h；

(2)实验于8h内不能完成时，血清或血浆应置2o C~8oC保存；(3)48h内不能完成的实验项目，或分离的血清或血浆需贮存48h以上时，应于-20o C保存； (4)标本不可反复冻融（只能冻融一次）， 且不可贮存于无霜冰箱（可造成样品温度变化）；(5)离心后分离凝胶（凝胶屏障）上面的血清可保存2~5天，但必须保证凝胶的完整性；但应用非凝胶分离物质时，离心后必须立即将血清或血浆移出。(6)血清或血浆必须保存于密闭的试管中 。

四、血清或血浆分离物质

是指将血清或血浆从全血中分离出来的物质，包括凝胶物质与非凝胶物质。

（一）凝胶物质

为一类具有特定粘度和特殊比重（介于血清或血浆与凝块之间的比重）的惰性凝胶物质，用（1000~1100）×ｇ RCF离心10 min， 能在血清或血浆与凝块之间形成不可穿透的凝胶屏障，从而将血清或血浆与其接触的血细胞、凝块分开。

（二）非凝胶物质

是由惰性物质（玻璃、塑料、纤维、毛毡等）构成的小珠、盘、滤器、纤维塞等组成。具有介于血清或血浆与凝块之间的比重，将其轻轻 加入血管中，用(1000~ 1100)× ｇ RCF 离心10 min时， 可透过血液移动至血清或血浆与血细胞、凝块之间，形成一个界面，使血清或血浆被分离出来。

（三）完整的凝胶管系统

该系统是由一个真空采血管（硅化塑料管）、内含惰性凝胶物质、促凝剂或抗凝剂组成。使用时要注意该产品必须具有相应性能证书和有 效期，并且必须在其有效期内正确使用。 随着检验方法日益完善，高精档次的自动化仪器的大量应用，以及检验的科学管理和检验工作人员技术水平不断提高，明显 降低检测过程中的影响因素和干扰，而分析检测前的各类影响或干扰因素相对增多。现代检验医学对检测标本的留取与收集提出较高的要 求，而广大就诊患者也必需了解留取标本的基本知识，遵照嘱托，配合检验人员，以使检验结果更准确准确可靠。

门诊检验常见的标本一般包括血液(指血，静脉血)、尿、粪便、脑脊液、胸水、腹水、前列腺液、精液、阴道分泌物等，这些标本收集 的时间、方法和保存都有一定的要求。 标本采集注意事项

一、血液标本

尽量避免生理因素的影响，有些生理因素，如吸烟、进食、运动、情绪波动、妊娠、体位等均可影响血液中某些成分的变化，有些甚至还 有昼夜变化。采集血液标本的条件应尽量 一致为宜，如无法避免，应说明在标本上注明该因素。

1．外周血

一般选取左手无名指内侧采血，该部位应无冻疮，炎症，水肿，破损。如该部位不符合要求，以其他手指部位代替。对烧伤病人，可选择 皮肤完整处采血。由于部分血液常规检测(如白细胞计数、分类等)受生理因素影响波动过大，比较时宜便条件尽量一致。出、凝血功能 的检测项目(如血小板计数，出血时间或凝血时间等)的检测，不宜服用抗凝、促凝药物，以免影响测定结果。

2.静脉血

除涉及各种止血和血栓检测等项目需采用抗凝静脉血血浆外，目前绝大多 数检测项目的分析检测可直接采用静脉血的血清。在血清检测项目中，有些(如 血糖，血脂等)受饮食及昼夜因素影响较大，一般以清晨空腹血标本为宜，有些在血中衰变较快(血清酶活性测定如ACP活性等)，0 ～4℃贮存活性减弱也不一，这些项目的检测必须及时而快速，有些(如肌酸激酶等)受运动等因素影响较大。抽血时避免溶血的发生也 十分重要，尤其涉及血钾，

LDH等的测定。切忌在输液的同侧静脉抽血做各项检验。

二、尿液标本

同血标本一样，尿液标本受饮食、运动、药物量等因素的影响也较大，特别是饮食的影响，故一般来说晨尿优于随机尿。晨尿是指清晨起 床后的第一次尿标本，较浓缩和酸化，有形成分(如血细胞，上皮细胞，管形)相对集中便于观察。随机尿即随意一次尿，留取方便，但 受饮食、运动、药物影响较甚，易于出现假阳性和假阴性结果，如饮食性蛋白尿，饮食性糖尿，维生素C干扰潜血结果等。餐后尿(午餐 后2小时收集的患者尿液)适用于尿糖，尿蛋白和尿胆原的检查，此时的尿标本可增加试验敏感性，检出较轻微的病变。12小时尿细胞 计数，即Addis (前晚8时排空膀胱后留取至次日8时的所有尿液)，因时间较长，细菌易繁殖，须加入防腐剂甲醛。

24小时尿(第一天晨8时排空膀胱后留取至次日晨8时的所有尿液)中化学物质的定量，包括蛋白，糖，Ca2十等，检测不同的物质 ，选择不同的防腐剂防腐。清洁中段尿多用于尿细菌培养，要求无菌，冲洗外明后留取标本。所有尿标本的收集都应足量，最少12m1 ，最好50ml，定时尿须全部收集，对女性患者应避免阴道分泌物、经血污染尿标本。

三、粪便标本

粪便标本的检测对判断消化系统疾病有重要参考价值。采集时要求用干净的件签选取含有粘液、脓血等异常病变成分的粪便 ，对外观无异常的粪便须从表面、深处及粪端多处取材。找寄生虫虫体及作虫卵计数应收集24小时粪便。查痢疾阿米巴滋养体应于排便 后立即检查，从有脓血和稀软处取材，保温送检。

查日本血吸虫虫卵时应取粘液、脓血部分，孵化毛蚴时至少留取30g粪便，且需尽快处理。检查蛲虫卵须用透明薄膜拭子于晚12时或 清晨排便前自肛门周围皱处处拭取并立即镜检。隐血试验(化学法)，试验前3日禁食肉类及含动物血食物并禁服铁剂，维生素C等。所 有粪便标本采集后1小时内应检查完毕，以防止有形成分受消化酶及pH的破坏。

四、脑脊液标本

脑脊液标本采集后立即送检，放置过久将影响检验结果：如细胞变性，破坏，导致计数和分类不被：有些化学物质如葡萄糖等将分解含量 减少：细菌发生自溶影响细菌的检出率。脑脊液抽取后一般分装三个无菌管，第一管作细菌培养，第二管作化学分析和免疫学检查，第

三 管作一般性状及显微镜检查，三管顺序不宜颠倒。因标本采集较难，全部送检和检测过程应注意安全。

五、胸腹水标本

与脑脊液标本一样，采集后的标本注意安全，及时送检。一般也分装三管，一管作常规细胞学检查，一管生化检查，一管细菌培养，顺序 以与脑脊液相同为宜。

六、前列腺液标本

前列腺液标本由前列腺按摩后采集，液量少时直接滴在载玻片上及时送检，须注意防止标本蒸干，量多时收集在洁净干燥的 试管中。若按摩不出前列腺液，可检查按摩后的尿液沉渣。

七、阴道分秘物标本

阴道标本采集前24小时应禁止房事、盆浴、明道检查、明道灌洗及局部上药等．取材所用器械需要清洁。一般用盐水浸湿棉拭子自阴道 或阴道弯后部、宫颈管口取材，制生理盐水涂片后观察分泌物标本，经期的女性患者不宜检查阴道分泌物标本。

天冬氨酸氨基转移酶（速率法）

标准化操作程序文件

单位：大同滨河肝胆病医院

科室: 检验科生化室

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批准施日期：

有校期: 一年

复审计划：每年复审，测定系统变化时需进行修订 发放部门：检验科生化室

编写者：

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天冬氨酸氨基转移酶（速率法）

1 概述

AST广泛分布于人体，在心，肝，骨骼肌，肾和红细胞内有较高的浓度，这些组织的损伤或疾病，如心肌梗死，病毒性肝炎，肝坏死，肝硬化，和肌营养不良等症均会引起血清或血浆AST水平的升高。

2 样本收集

新鲜无溶血标本，血清或血浆样本均不溶血。血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。样本在4摄氏度可稳定7天。采血前病人应禁食12小时，采集静脉3ml,待凝固后（最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟）通常为加抗凝剂的血液在30-60分钟凝血析出血清。3000r/min离心5-10分钟，分离出血清备用。不建议采用血浆标本。

3 方法原理

L-天冬氨酸+a-酮戊二酸------------草酰乙酸+L-古氨酸

草酰乙酸+NADH+H+-----------L-苹果酸+NAD+

4剂来源，配置及储存

试剂来源：迪瑞

试剂配置：试剂一和试剂二均为液体试剂，可直接使用。启用后在2-8度可稳定30天。若试剂混浊，或以蒸馏水为空白在340nm处的光吸收值低于1.1A,应予丢弃。

试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。 5分析仪器

CS-600B全自动生化分析仪

分析参数：样品量15 u/l 试剂量：第一试剂240 u/l（R1）；第二试剂60 u/l 测光点23—38 测定模式：速率法 负反应

分析波长：340nm/405nm(主波长/副波长)

6计算方法

样本浓度（U/L）=U/L）

校正管吸光度的变化

7线性范围 3----1000U/L

8 参考范围：0—40u/

新生儿和婴儿的AST大约是成人的二倍，六个月以后降至成人水平。 9 失控控理

1：立即重测同一质控品，如重测后结果仍不再允许范围，请进行下一步。 2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常，那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。

3：进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，查明光源是否更换，比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂，此时可更换试剂已查明原因。如果结果仍不再允许范围内，则进行下一步。

4：重新校准。重测失控项目。用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。 5：请专家帮助。如果前五步都为能得到在控结果，那可能是仪器或试剂已查明

原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。

10 注意事项

1:试剂和样本用量可根据不同仪器要求按比例改变。

2：如测试结果超出线性范围，样本应稀释后测试，调整因子数或将结果乘以稀释倍数。

3：结果的准确性仪器校正和测定温度，时间的控制。

4：高血脂或黄疸样本在340nm处有较高的吸光度值。这类样本的高值AST耗尽底物后，在340nm处仍维持较高的吸光度值，此时样本应稀释后在进行测定。 5：NADH在334nm和365nm处的毫摩尔消光系数分别为6.18和3.4.

6：若试剂混浊，或以水为空白在340nm处吸光度值低于1.1时，则不能使用。 7：由医生根据临床症状和其他实验结果做出临床诊断

8：样本与废液等有潜在生物传染性危险，操作者颖遵守实验室安全操作规定并按当地医疗废弃物，感染性废弃物，产业废弃物等规定处理废液。

11:临床意义

AST在心肌细胞内含量较多，当心肌梗死时，血清中AST活力增高，在发病后6-12小时之内显著升高，在48小时达到高峰，约在3-5天恢复正常。血清中AST也可来源于肝细胞，各种肝病可引起血清AST升高，有时可达1200单位，中毒性肝炎还可更高。肌炎，胸膜炎，肾炎及肺炎等也可引起血清AST升高。临床上还可通过计算AST/ALT对肝病进行诊断和鉴别诊断

酸氨基转移酶(ALT)测定（速率丙氨法）

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单位：大同滨河肝胆病医院

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复审计划：每年复审，测定系统变化时需进行修订 发放部门：检验科生化室

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丙氨酸氨基转移酶(ALT)测定（速率法）

1概述

肝脏内含有丰富的酶系统，以维持机体的正常生理代谢过程。不少酶是由肝脏合成并由肝胆系统排泄，当肝脏有病时，可由于酶生成亢进或释出异常，引起血清内酶的活性改变。这些改变在一定程度内反映了肝脏的功能状况。人体转氨酶的种类甚多，而以血清丙氨酸氨基转移酶，血清天门冬氨酸转换酶活性最强。此两种酶广泛在于机体组织细胞内，以肝脏，心脏，肾脏及骨骼肌中较多。在肝脏中丙氨酸氨基转移酶(ALT)的含量最多，AST以心肌含量最多，此两种转氨酶较多地释放在血液中，使血清中两种酶活性增高。

2 样本收集

新鲜无溶血标本，血清或血浆样本均不溶血。血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。样本在4摄氏度可稳定7天。采血前病人应禁食12小时，采集静脉3ml,待凝固后（最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟）通常为加抗凝剂的血液在30-60分钟凝血析出血清。3000r/min离心5-10分钟，分离出血清备用。不建议采用血浆标本。

3 方法原理

L-丙氨酸+α-酮戊二酸—————→丙酮酸+L-谷氨酸

丙酮酸+NADH—————→L-乳酸+NAD﹢

4剂来源，配置及储存

试剂来源：迪瑞

试剂配置：试剂一和试剂二均为液体试剂，可直接使用。启用后在2-8度可稳定30天。若试剂混浊，或以蒸馏水为空白在340nm处的光吸收值低于1.0A,应予丢弃。

试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。 5分析仪器

CS-600B全自动生化分析仪

分析参数：样品量15 u/l 试剂量：第一试剂240 u/l（R1）；第二试剂60 u/l 测光点23—38 测定模式：速率法 负反应

分析波长：340nm/405nm(主波长/副波长)

6计算方法

样本浓度（U/L）=U/L）

校正管吸光度的变化

7 线性范围：本实验的线性范围：4----1000U/L

8 参考范围：男性；：5—40U/L 女性：5---35 U/L

9 失控控理

1：立即重测同一质控品，如重测后结果仍不再允许范围，请进行下一步。 2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常，那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。

3：进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，查明光源是否更换，比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂，此时可更换试剂已查明原因。如果结果仍不再允许范围内，则进行下一步。

4：重新校准。重测失控项目。用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。 5：请专家帮助。如果前五步都为能得到在控结果，那可能是仪器或试剂已查明原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。

10 注意事项

1:试剂和样本用量可根据不同仪器要求按比例改变。

2：如测试结果超出线性范围，样本应稀释后测试，调整因子数或将结果乘以稀释倍数。

3：结果的准确性仪器校正和测定温度，时间的控制。

4：高血脂或黄疸样本在340nm处有较高的吸光度值。这类样本的高值ALT耗尽底物后，在340nm处仍维持较高的吸光度值，此时样本应稀释后在进行测定。 5：由医生根据临床症状和其他实验结果做出临床诊断。

11 临床意义

ALT活性高

1) 肝胆疾病 传染性肝炎、中毒性肝炎、脂肪肝和胆管炎等。

2) 心血管疾病 心肌梗死、心肌炎、心力衰竭时肝淤血和脑出血等。

3) 药物和毒物 氯丙嗪，异 肼、奎宁、水杨酸制剂及乙醇，铅、

ALT活性降低 磷酸吡多醛缺乏症。

Y-谷氨酰转移酶（速率法）

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单位：大同滨河肝胆病医院

科室: 检验科生化室

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复审计划：每年复审，测定系统变化时需进行修订 发放部门：检验科生化室

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Y-谷氨酰转移酶（速率法） 1：概述

健康人血清γ－GT水平甚低（＜40单位），主要来自肝脏，少许由肾、胰、小肠产生。

γ－GT在反映肝细胞坏死损害方面不及ALT，但在黄疸鉴别方面有一定意义，肝脏内排泄不畅（肝内梗阻）和肝外梗阻（如胆道系统阻塞）以及肝硬化、肝肿瘤中毒性肝病、酒精性肝病、脂肪肝等均可升高。?

γ－谷氨酰转移酶（γ－GT）在人体细胞的微粒体中合成。某些药物和酒精可使其合成增加。它的主要功能是参与体内蛋白质代谢，且广泛存在于人体各组织及器官中，以肾脏最为丰富，其次是胰肝等处。在肝脏主要存在于肝细胞浆和胆管上皮细胞中。正常成年人血清中γ－GT活性很低，主要来源于肝脏。。

2 样本收集

新鲜无溶血标本，血清或血浆样本均不溶血。血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。样本在4摄氏度可稳定7天。采血前病人应禁食12小时，采集静脉3ml,待凝固后（最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟）通常为加抗凝剂的血液在30-60分钟凝血析出血清。3000r/min离心5-10分钟，分离出血清备用。不建议采用血浆标本。

3 方法原理

试剂中L-γ-谷氨酰-3羟基-4硝基苯胺和甘氨酸在样品中γ－谷氨酰转移酶的催化作用下，生成色产物5-氨基-2硝基苯甲酸盐，引起405nm处的吸光值升高，通过监测405nm处光吸收值上升的速率，可以测定γ－谷氨酰转移酶的活力。

4剂来源，配置及储存

试剂来源：迪瑞

试剂配置：试剂一和试剂二均为液体试剂，可直接使用。启用后在2-8度可稳定30天。若试剂混浊，或以蒸馏水为空白在405nm处的光吸收值低于0.8A,应予丢弃。

试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。 5分析仪器

CS-600B全自动生化分析仪

分析参数：样品量50 u/l 试剂量：第一试剂200 u/l（R1）；第二试剂50 u/l

测光点23—38 测定模式：速率法 正反应

分析波长：405nm/505nm(主波长/副波长)

6计算方法

γ－GT (U/L)=( A/min*Tv*1000)(9.5*Sv*P)

式中

Tv=总反应体积

Sv=样本体积

9.5=NADH在340nm处的毫摩尔消光系数

P=比色杯光径（cm）

7线性范围 0—450U/L

8 参考范围：0—40u/L

新生儿和婴儿的AST大约是成人的二倍，六个月以后降至成人水平。 9 失控控理

1：立即重测同一质控品，如重测后结果仍不再允许范围，请进行下一步。 2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常，那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。

3：进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，查明光源是否更换，比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂，此时可更换试剂已查明原因。如果结果仍不再允许范围内，则进行下一步。

4：重新校准。重测失控项目。用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。 5：请专家帮助。如果前五步都为能得到在控结果，那可能是仪器或试剂已查明原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。

10 注意事项

1:试剂和样本用量可根据不同仪器要求按比例改变。

2：如测试结果超出线性范围，样本应稀释后测试，调整因子数或将结果乘以稀释倍数。

3：结果的准确性仪器校正和测定温度，时间的控制。

4：若试剂混浊，或以水为空白在405nm处吸光度值低于0.8时，则不能使用。 5：由医生根据临床症状和其他实验结果做出临床诊断

6：样本与废液等有潜在生物传染性危险，操作者颖遵守实验室安全操作规定并按当地医疗废弃物，感染性废弃物，产业废弃物等规定处理废液。

11:临床意义

1、急性病毒性肝炎是否转为慢性。急性肝炎常引起转氨酶(GPT、GOT)升高。随着病情好转，转氨酶逐渐恢复正常，如果γ-GT持续不降，多表示肝炎转为慢性。

2、慢性肝炎和肝硬化病人γ-GT持续升高表示病情不稳定或呈恶化倾向；若逐渐下降提示肝病转向不活动。

3、酒精性肝病转氨酶虽轻度上升，而γ-GT可中度升高。急性酒精肝病γ-GT升高达1000单位。经常饮酒者γ-GT常在80单位左右。

4、原发性肝癌胆内阻塞胆汁淤滞时，γ-GT多明显升高，数倍或数十倍于常量。

5、间断动态检测γ-GT，可查出肝外其他脏器肿瘤是否转移至肝脏。

6、阻塞性黄疸查γ-GT，常发现γ-GT升高程度与黄疸深度呈平行关系：黄疸越深，γ-GT越高。

碱性磷酸酶（ALP）测定（速率法）

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有校期: 一年

复审计划：每年复审，测定系统变化时需进行修订 发放部门：检验科生化室

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碱性磷酸酶（ALP）测定（速率法）

1：概述

碱性磷酸酶英文简称AKP或ALP，是广泛分布于人体各脏器器官中，其中以肝脏为最多其次为肾脏，骨骼、肠、和胎盘等组织,。它不是单一的酶，而是一组同功酶。目前已发现有 AKP1 、AKP2 、AKP3 、AKP4 、AKP5 与 AKP6 六种同功酶。碱性磷酸酶（ALP）：是从牛肠粘膜或大肠杆菌中提取。从大肠杆菌提取的AP分子量为80kD，酶作用的最适pH为8.0；用小牛肠黏膜提取的AP分子量为l00kD，最适pH为9.6.一般采用对硝基苯磷酸酯（p-NPP）作为底物。它可制成片状试剂，使用方便。产物为黄色的对硝基酚，在405nm有吸收峰。用NaOH终止酶反应后，黄色可稳定一段时间。 2标本的收集

新鲜无溶血标本，血清或血浆样本均不溶血。血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。样本在4摄氏度可稳定7天。采血前病人应禁食12小时，采集静脉3ml,待凝固后（最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟）通常为加抗凝剂的血液在30-60分钟凝血析出血清。3000r/min离心5-10分钟，分离出血清备用。不建议采用血浆标本。

3：方法原理

样本中的碱性磷酸酶催化水解磷酸对硝基苯酚，生成游离的对硝基苯酚和磷酸，引起405nm处的光吸收值升高，，通过检测405nm处光吸收值上升的速率，可以测定碱性磷酸酶的活力。

4剂来源，配置及储存

试剂来源：迪瑞

试剂配置：试剂一和试剂二均为液体试剂，可直接使用。启用后在2-8度可稳定30天。若试剂混浊，或以蒸馏水为空白在405nm处的光吸收值低于0.8A,应予丢弃。 试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。

5分析仪器

CS-600B全自动生化分析仪

分析参数：样品量4 u/l 试剂量：第一试剂200 u/l（R1）；第二试剂50 u/l

测光点23—38 测定模式：速率法 正反应

分析波长：405nm/505nm(主波长/副波长)

6计算方法

ALP(U/L)=( A/min*Tv*1000)(18.8*Sv*P)

式中

Tv=总反应体积

Sv=样本体积

18.8=NADH在405nm处的毫摩尔消光系数

P=比色杯光径（cm）

7 线性范围：本实验的线性范围：0----850U/L

8 参考范围：男性：1---12岁 《500 U/L

12—15岁 《750 U/L

》25岁 40--150 U/L

女性：1---12岁 《500 U/L

》15岁 40--150 U/L

9 失控控理

1：立即重测同一质控品，如重测后结果仍不再允许范围，请进行下一步。

2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常，那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。

3：进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，查明光源是否更换，比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂，此时可更换试剂已查明原因。如果结果仍不再允许范围内，则进行下一步。

4：重新校准。重测失控项目。用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。

5：请专家帮助。如果前五步都为能得到在控结果，那可能是仪器或试剂已查明原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。

10 注意事项

1:试剂和样本用量可根据不同仪器要求按比例改变。

2：如测试结果超出线性范围，样本应稀释后测试，调整因子数或将结果乘以稀释倍数。 3：结果的准确性仪器校正和测定温度，时间的控制。

4：由医生根据临床症状和其他实验结果做出临床诊断。

11：临床意义

临床上测定ALP主要用于骨骼、肝胆系统疾病的诊断和鉴别诊断，尤其是黄疸的鉴别诊断。对于不明原因的高ALP血清水平，可测定同工酶以协助明确其器官来源。

1.生理性增高：儿童在生理性的骨骼发育期，碱性磷酸酶活力可比正常人高1～2倍。处于生长期的青少年，以及孕妇和进食脂肪含量高的食物后均可以升高。

2.病理性升高： （1）骨骼疾病如佝偻病、软骨病、骨恶性肿瘤、恶性肿瘤骨转移等；

（2）肝胆疾病如肝外胆道阻塞、肝癌、肝硬化、毛细胆管性肝炎等；

（3）其他疾病如甲状旁腺机能亢进。

3.病理性降低：见于重症慢性肾炎、儿童甲状腺机能不全、贫血等。

总胆红素（重氮盐法）

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单位：大同滨河肝胆病医院

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有校期: 一年

复审计划：每年复审，测定系统变化时需进行修订 发放部门：检验科生化室

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保管者:

修订者

总胆红素（重氮盐法） 1：概述

血清中的[胆红素大部分来源于衰老红细胞被破坏后产生出来的血红蛋白衍化而成，在肝内经过葡萄糖醛酸化的叫做直接胆红素，未在肝内经过葡萄糖醛酸化的叫做间接胆红素，二者的和就是总胆红素。

2标本的收集

新鲜无溶血标本，血清或血浆样本均不溶血。血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。样本在4摄氏度可稳定7天。采血前病人应禁食12小时，采集静脉3ml,待凝固后（最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟）通常为加抗凝剂的血液在30-60分钟凝血析出血清。3000r/min离心5-10分钟，分离出血清备用。不建议采用血浆标本。

3：方法原理

本试剂采用表面活性剂作为增溶剂，样品中结合胆红素和经增溶的未结合胆红素与重氮对氨基苯磺酸反应，生成酸性偶氮胆红素，其在570nm处吸收值的增加与样品中胆红素的浓度成正比，通过测定570nm处吸光度值的变化，即可计算出样品中总胆红素的浓度。

4剂来源，配置及储存

试剂来源：迪瑞

试剂配置：。试剂一和试剂二按100:1的比例。即10ml试剂一加0.1ml试剂二，混合后即成工作液

试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。

5分析仪器

CS-600B全自动生化分析仪

分析参数：样品量25 u/l 试剂量：250 u/l

测光点0--41 测定模式：1点终点法 正反应

分析波长：570nm/660nm(主波长/副波长)

6计算方法

总胆红素浓度（μmol/L）=μmol/L）

校正管吸光度

7 线性范围：本实验的线性范围：0---300μmol/L

8 参考范围成人1.7—21μmol/L

新生儿20—200μmol/L

9 失控控理

1：立即重测同一质控品，如重测后结果仍不再允许范围，请进行下一步。 2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常，那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。

3：进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，查明光源是否更换，比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂，此时可更换试剂已查明原因。如果结果仍不再允许范围内，则进行下一步。

4：重新校准。重测失控项目。用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。 5：请专家帮助。如果前五步都为能得到在控结果，那可能是仪器或试剂已查明原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。

10 注意事项

1:试剂和样本用量可根据不同仪器要求按比例改变。

2：如测试结果超出线性范围，样本应稀释后测试，调整因子数或将结果乘以稀释倍数。

3：结果的准确性仪器校正和测定温度，时间的控制。

4：由医生根据临床症状和其他实验结果做出临床诊断。

5：胆红素重氮反应对温度敏感，测定时应以恒温。

6：反应形成的色素可稳定1小时。

7国际换算：μmol/L﹡0.585=mg/dl

11临床意义：临床上主要用于诊断肝脏疾病和胆道梗阻，当血清总胆红素有很大增高时，人的皮肤、眼睛巩膜、尿液和血清呈现黄色，故称黄疸。当肝脏发生炎症、坏死、中毒等损害时均可以引起黄疸，胆道疾病及溶血性疾病也可以引起黄疸。以直接胆红素升高为主常见于原发性胆汁型肝硬化、胆道梗阻等。以间接胆红素升高为主常见于溶血性疾病、新生儿黄疸或者输血错误等。肝炎与肝硬化病人的直接胆红素与间接胆红素都可以升高。总胆红素增高，见于中毒性或病毒性肝炎、溶血性黄疸、恶性贫血、阵发性血红蛋白尿症。红细胞增多症、新生儿黄疸、内出血、输血后溶血性黄疸、急性黄色肝萎缩。先天性胆红素代谢异常（Crigler-Najjar综合征、Gilbert综合征、Dubin-Johnson综合征）、果糖不耐受等，以及摄入类、红霉素、利福平、孕激素、安乃近等药物。

直接胆红素（重氮盐法）

标准化操作程序文件

单位：大同滨河肝胆病医院

科室: 检验科生化室

文件编号：

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批准施日期：

有校期: 一年

复审计划：每年复审，测定系统变化时需进行修订 发放部门：检验科生化室

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直接胆红素（重氮盐法） 1概述

直接胆红素[1](英文缩写DBIL)又称结合胆红素。未结合胆红素在肝细胞内转化，与葡糖醛酸结合形成结合胆红素，结合胆红素用凡登伯定性试验呈直接反应，故将这种胆红素称为直接胆红素。测定直接胆红素主要用于鉴别黄疸的类型。结合胆红素的升高，说明经肝细胞处理和处理后胆红素从胆道的排泄发生障碍。 2标本的收集

新鲜无溶血标本，血清或血浆样本均不溶血。血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。样本在4摄氏度可稳定7天。采血前病人应禁食12小时，采集静脉3ml,待凝固后（最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟）通常为加抗凝剂的血液在30-60分钟凝血析出血清。3000r/min离心5-10分钟，分离出血清备用。不建议采用血浆标本。

3：方法原理

样品中直接胆红素与重氮对氨基苯磺酸反应，生成酸性偶氮胆红素，其在570nm处光吸收值增加与杨品中直接胆红素的浓度成正比，通过测定570nm处吸光度的变化，即可计算出样品中直接胆红素的浓度。

4剂来源，配置及储存

试剂来源：迪瑞

试剂配置：试剂一和试剂二按100:1的比例。即10ml试剂一加0.1ml试剂二，混合后即成工作液

试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。 5分析仪器

CS-600B全自动生化分析仪

分析参数：样品量25 u/l 试剂量：250 u/l

测光点0--41 测定模式：1点终点法 正反应

分析波长：570nm/660nm(主波长/副波长)

6计算方法

总胆红素浓度（μmol/L）=样本管吸光度×校准液浓度（μmol/L）

校正管吸光度μmol/L

7 线性范围：本实验的线性范围：0---300μmol/L

8 参考范围成人1.7—6.8μmol/L

9 失控控理

1：立即重测同一质控品，如重测后结果仍不再允许范围，请进行下一步。 2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常，那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。

3：进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，查明光源是否更换，比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂，此时可更换试剂已查明原因。如果结果仍不再允许范围内，则进行下一步。

4：重新校准。重测失控项目。用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。 5：请专家帮助。如果前五步都为能得到在控结果，那可能是仪器或试剂已查明原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。

10 注意事项

1:试剂和样本用量可根据不同仪器要求按比例改变。

2：如测试结果超出线性范围，样本应稀释后测试，调整因子数或将结果乘以稀释倍数。

3：结果的准确性仪器校正和测定温度，时间的控制。

4：由医生根据临床症状和其他实验结果做出临床诊断。

5：胆红素重氮反应对温度敏感，测定时应以恒温。

6：反应形成的色素可稳定1小时。

7国际换算：μmol/L﹡0.585=mg/dl 11：临床意义

直接胆红素增高，属阻塞性黄疸、肝细胞性黄疸。以直接胆红素升高为主常见于原发性胆汁型肝硬化、胆道梗阻等。肝炎与肝硬化病人的直接胆红素都可以升高。胆红素总量增高、直接胆红素增高时，可 疑为肝内及肝外阻塞性黄疸，胰头癌，毛细胆管型肝炎及其他胆汁瘀滞综合征等。

1、梗阻性黄疸 如果肝外的胆道系统发生肿瘤或出现结石，将胆道阻塞，直接胆红素不能全部排入肠道，而逆流入血，会引起总胆红素高，而发生阻塞性黄疸。原发性胆汁型肝硬化、胆道梗阻、淤胆型肝炎等疾病都是引起直接胆红素高的原因。

2、肝细胞性黄疸 如果肝脏不好，肝脏将间接胆红素转化为直接胆红素的能力下降，即肝细胞受损，或者因胆红素不能正常地转化成胆汁，或者因肝细胞肿胀，使肝内的胆管受压，排泄胆汁受阻，这时会引起直接胆红素和间接胆红素同时偏高的现象，发生肝细胞性黄疸。肝脏疾病如乙肝、丙肝、脂肪肝、酒精肝、肝硬化等都是引起直接胆红素高的原因。

引起直接胆红素高的原因虽然很多，但最常见的是由肝脏疾病引起的直接胆红素高。因此，发现直接胆红素高时，首先要考虑是不是得了肝脏疾病，结合患者的病史、症状等进行综合分析，选择合适的检查项目，确定引起直接胆红素高的原因，针对病因进行治疗。

血清直接胆红素超过4.5umol/L有临床意义。正常血清中结合胆红素仅占总胆红素的4%-5%，其浓度一般<1umol/L，上限不超过3umol/L。正常血清内测的直接胆红素基本上不反映与葡萄糖醛酸相结合的胆红素，而在黄疸时，则基本反映后者的水平。

胆汁郁积性黄疸时，由于结合胆红素不能从肝细胞和细毛胆管排出，使血清直接胆红素明显升高，在总胆红素中所占比值升高显著；肝细胞性黄疸时，由于同时有肝细胞摄取、结合、排泄障碍，以致血清直接胆戏素/总胆红素比值也升高，但升高幅度不及胆汁郁积性黄疸。在肝细胞性黄疸时比值>40%，而胆汁郁积性黄疸时常在60%以上，最高的可达90%，有一定鉴别诊断价值。

直接胆红素偏高的原因

总蛋白（双缩脲法）

单位：大同滨河肝胆病医院

科室: 检验科生化室

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复审计划：每年复审，测定系统变化时需进行修订 发放部门：检验科生化室

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总蛋白（双缩脲法）

1：概述

血清蛋白质是各种蛋白的复杂混合物。可利用不同的方法将其分离。血浆中的白蛋白、a1、a2、β球蛋白，纤维蛋白原，凝血酶原和其它凝血因子等均由肝细胞合成。γ球蛋白主要来自浆细胞。当肝脏发生病变时，肝细胞合成蛋白质的功能减退，血浆中蛋白质即会发生质和量的变化。临床上用各种方法检测血浆蛋白的含量来协助诊断肝脏疾患，并作为疗效观察，预后判断的指标。

2标本的收集

新鲜无溶血标本，血清或血浆样本均不溶血。血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。样本在4摄氏度可稳定7天。采血前病人应禁食12小时，采集静脉3ml,待凝固后（最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟）通常为加抗凝剂的血液在30-60分钟凝血析出血清。3000r/min离心5-10分钟，分离出血清备用。不建议采用血浆标本。

3：方法原理

本试剂采用双缩脲反应方法，即在碱性溶液中蛋白质分子中的肽键与两价铜离子反应生成蓝紫色络合物，其中每个铜离子与五六个肽键络合。在试剂中加入碘化物有助于防止碱性铜络合物的自动还原。反应生成蓝紫色络合物与样本中总蛋白浓度成正比，通过测定52-560nm处吸光度值的变化，即可计算出样本中总蛋白的浓度。

4剂来源，配置及储存

试剂来源：迪瑞

试剂配置：试剂一和试剂二均为液体试剂，可直接使用。启用后在2-8度可稳定30天。若试剂混浊，或以蒸馏水为空白在540nm处的光吸收值低于0.15A,应予丢弃。 试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。

5分析仪器

CS-600B全自动生化分析仪

分析参数：样品量5 u/l 试剂量：250 u/l

测光点0--41 测定模式：1点终点法 正反应

分析波长：546nm/700nm(主波长/副波长)

6计算方法

总蛋白浓度（g/L）=g/L）

校正管吸光度 7 线性范围：本实验的线性范围：0---150g/L

8 新生儿 46~70g/L

7月~2周岁 51~73g/L

1~2周岁 56~75g/L

>3周岁 60--83g/L

9 失控控理

1：立即重测同一质控品，如重测后结果仍不再允许范围，请进行下一步。

2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常，那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。

3：进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，查明光源是否更换，比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂，此时可更换试剂已查明原因。如果结果仍不再允许范围内，则进行下一步。

4：重新校准。重测失控项目。用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。

5：请专家帮助。如果前五步都为能得到在控结果，那可能是仪器或试剂已查明原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。

10 注意事项

1:试剂和样本用量可根据不同仪器要求按比例改变。

2：如测试结果超出线性范围，样本应稀释后测试，调整因子数或将结果乘以稀释倍数。 3：结果的准确性仪器校正和测定温度，时间的控制。

4：若试剂混浊或以水为空白在540nm处吸光度值大于0.15A时，则不能使用。 5：由医生根据临床症状和其他实验结果做出临床诊断。

11:临床意义

血清总蛋白增高：

（1）血液浓缩，导致总蛋白浓度相对增高：严重腹泻、呕吐、高热时急剧失水，血清总蛋白浓度可明显升高。休克时，由于毛细血管通透性增加，血液中水分渗出血管。血液可发生浓缩，慢性肾上腺皮质功能减退的患者，由于丢失钠的同时伴随水的丢失，血浆也可出现浓缩现象。

（2）血浆蛋白质合成增加：主要见于球蛋白合成增加，多发性骨髓瘤患者医`学教育网搜集整理。

血清总蛋白降低：

（1）血液稀释，导致总蛋白浓度相对降低：如静脉注射过多低渗溶液或因各种原因引起的钠、水潴留。

（2）摄人不足和消耗增加：食物中长期缺乏蛋白质或慢性胃肠道疾病所引起的消化吸收不良，因患消耗性疾病，如严重结核病，甲状腺功能亢进，恶性肿瘤等，均可造成血清蛋白浓度降低。

（3）蛋白质丢失：严重烧伤时大量血浆渗出，大量失血，肾病综合征时大量蛋白尿，溃疡性结肠炎时肠道长期丢失一定量的蛋白质，这些病理改变均可使血清总蛋白浓度降低。

白蛋白（溴甲酚绿法）

单位：大同滨河肝胆病医院

科室: 检验科生化室

文件编号：

版本：

批准施日期：

有校期: 一年

复审计划：每年复审，测定系统变化时需进行修订 发放部门：检验科生化室

编写者：

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修订者：

白蛋白（溴甲酚绿法）

1概述

白蛋白是肝脏合成的，因此血清白蛋白浓度可以反映肝脏的功能，同时血清白蛋白水平的改变能导致一系列的病理性继发症，因此，测定血清白蛋白常用于病人状态的非特异监视。

病理性降低：

(1) 蛋白质丢失，常见于大量出血或严重烧伤和肾脏疾病。

(2) 合成障碍，肝脏功能异常。

(3) 营养不良或吸收不良。空腹12小时取静脉血[1]。

2标本的收集

新鲜无溶血标本，血清或血浆样本均不溶血。血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。样本在4摄氏度可稳定7天。采血前病人应禁食12小时，采集静脉3ml,待凝固后（最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟）通常为加抗凝剂的血液在30-60分钟凝血析出血清。3000r/min离心5-10分钟，分离出血清备用。不建议采用血浆标本。

3：方法原理

本法以溴甲酚绿染料为最常用，即采用溴甲酚绿染料，在ph为4.0—4.2条件下，白蛋白与溴甲酚绿结合成蓝绿色化合物，反应生成的蓝绿色化合物与样本中白蛋白的浓度成正比，通过测定580-630nm处吸光度值的变化，即可计算出样本中白蛋白的浓度。

4剂来源，配置及储存

试剂来源：迪瑞

试剂配置：试剂一和试剂二均为液体试剂，可直接使用。启用后在2-8度可稳定30天。若试剂混浊，或以蒸馏水为空白在6300nm处的光吸收值低于0.2A,应予丢弃。

试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。 5分析仪器

CS-600B全自动生化分析仪

分析参数：样品量2 u/l 试剂量：300 u/l

测光点15 测定模式：1点终点法 正反应

分析波长：600nm/700nm(主波长/副波长)

6计算方法

白蛋白浓度（g/L）=样本管吸光度×校准液浓度（g/L）

校正管吸光度 7 线性范围：本实验的线性范围：0---60g/L

8 参考范围

成人37—53g/L

9 失控控理

1：立即重测同一质控品，如重测后结果仍不再允许范围，请进行下一步。 2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常，那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。

3：进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，查明光源是否更换，比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂，此时可更换试剂已查明原因。如果结果仍不再允许范围内，则进行下一步。

4：重新校准。重测失控项目。用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。 5：请专家帮助。如果前五步都为能得到在控结果，那可能是仪器或试剂已查明原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。

10 注意事项

1:试剂和样本用量可根据不同仪器要求按比例改变。

2：如测试结果超出线性范围，样本应稀释后测试，调整因子数或将结果乘以稀释倍数。

3：结果的准确性仪器校正和测定温度，时间的控制。

4：若试剂混浊或以水为空白在630nm处吸光度值大于0.2A时，则不能使用。

5：由医生根据临床症状和其他实验结果做出临床诊断。

11:临床意义

肝脏是合成血清蛋白质最重要的器官.血清中的白蛋白,球蛋白,以及其它参与凝血的物质,均由肝细胞合成.当肝脏病变时,合成各种蛋白质的能力降低,体内的蛋白质发生了数量上的改变.其主要的表现,体现在白蛋白的下降,和球蛋白的增多.临床上通过检测血清蛋白质,借以了解肝脏或肾脏的情况.

总蛋白的数量随着白蛋白或球蛋白的增减而变化.

白蛋白减低:见于慢性肝炎,肝硬化,营养不良,肾病综合征,结核病,甲亢,大失血,恶性肿瘤.

白蛋白的增高没有特殊的临床意义.

球蛋白如果增高,并与白蛋白的比值出现倒置的话,属于病理现象.

胆固醇 （2点终点法）

单位：大同滨河肝胆病医院

科室: 检验科生化室

文件编号：

版本：

批准施日期：

有校期: 一年

复审计划：每年复审，测定系统变化时需进行修订 发放部门：检验科生化室

编写者：

审批者:

保管者:

修订者：

胆固醇 （2点终点法）

1概述

本试剂适用于体外定量检测人血清中胆固醇的浓度。

血清胆固醇测定可作为肝脏功能，胆汁功能，肠吸收，冠状动脉疾病，甲状腺功能和肾上腺疾病的诊断指证。胆固醇含量对高脂蛋白血症的诊断和分类非常重要。正常的胆固醇水平应受年龄，性别，激素平衡和妊娠的影响。

2样本要求

新鲜，，不容血血清为最佳胆固醇测定样本。

血清样本在2—8°C可稳定3—4天，—20°C可稳定数月。

3检验原理

胆固醇脂+H2O_______胆固醇+游离脂肪酸

胆固醇+O2__________胆菑—4-3酮+H2O2

H2O2+4氨基安替比林+对-羟基苯甲酸———醌亚胺色素+ H2O2

4剂来源，配置及储存

试剂来源：迪瑞

试剂配置：试剂一和试剂二均为液体试剂，可直接使用。启用后在2-8度可稳定30天。若试剂混浊，或以蒸馏水为空白在500nm处的光吸收值低于1.0A,应予丢弃。 试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。

5分析仪器

CS-600B全自动生化分析仪

分析参数：样品量3u/l 试剂量：第一试剂240 u/l（R1）；第二试剂60 u/l

测光点16---41 测定模式：速率法 正反应

分析波长：505nm/660nm(主波长/副波长)

6计算方法

样本浓度（mmol/L）=mmol/L）

校正管吸光度的变化

7 线性范围：本实验的线性范围：0---20 mmol/L

8 参考范围：2.86～5.98 mmol/L

9 失控控理

1：立即重测同一质控品，如重测后结果仍不再允许范围，请进行下一步。

2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常，那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。

3：进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，查明光源是否更换，比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂，此时可更换试剂已查明原因。如果结果仍不再允许范围内，则进行下一步。

4：重新校准。重测失控项目。用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。

5：请专家帮助。如果前五步都为能得到在控结果，那可能是仪器或试剂已查明原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。

【注意事项】

1.4份试剂1与1份试剂2混合后，可作为单试剂用。混合后的试剂溶液应避光储存于2-8°

C可稳定7天。

2.反应颜色可稳定30分钟。

3.单位换算：胆固醇mm/L****38.7=胆固醇

4.若试剂混浊，或以水为空白在500nm处吸光度值大于0.1时，则不能使用。

5.样本与废液等有潜在生物传染性危险，操作者颖遵守实验室安全操作规定并按当地医疗废弃物，感染性废弃物，产业废弃物等规定处理废液。 11：临床意义

增多：见于高脂血症、动脉粥样硬化、糖尿病、肾病综合征、甲状腺功能减退、胆总管阻塞、高血压（部分），以及摄入维生素A、维生素D、口服避孕药等药物。

减少：见于低脂蛋白血症、贫血、败血症、甲状腺功能亢进、肝病、严重感染、营养不良、肺结核和晚期癌症，以及摄入对氨基水杨酸、卡那霉素、肝素、维生素C等药物

甘油三酯（2点终点法）

单位：大同滨河肝胆病医院

科室: 检验科生化室

文件编号：

版本：

批准施日期：

有校期: 一年

复审计划：每年复审，测定系统变化时需进行修订 发放部门：检验科生化室

编写者：

审批者:

保管者:

修订者：

甘油三酯（2点终点法）

1概述

甘油三酯为脂类物质，可从食物中吸取，或由碳水化合物在体内代谢产生。测定甘油三酯

的重要意义在于体外诊断和治疗高脂血症。这些疾病可能是原发性的，或者继发性其他疾病，如肾病，或糖尿病和内分泌失调。甘油三酯升高已确定动脉粥样硬化的危险因素。

2样本要求

血清或血浆样本应在禁食10或14小时后采取标本，不应溶血。采血管应避免使用甘油成分润滑的物品。

甘油三酯样本应在2——8°C可稳定3天，—20°C可稳定数周。请勿在室温保存样本，以免引起测定值偏高。

3检验原理

甘油三酯+ H2O——甘油+游离脂肪酸

甘油+ATP_______3-磷酸甘油酸+ADP

3-磷酸甘油酸+O2________磷酸二羟丙酮+ H2O2

H2O2+4-氨基安替比林+苯胺类色原物质-------------醌亚胺色素+水

4剂来源，配置及储存

试剂来源：迪瑞

试剂配置：试剂一和试剂二均为液体试剂，可直接使用。启用后在2-8度可稳定30天。若试剂混浊，或以蒸馏水为空白在500nm处的光吸收值低于1.0A,应予丢弃。

试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。 5分析仪器

CS-600B全自动生化分析仪

分析参数：样品量3u/l 试剂量：第一试剂240 u/l（R1）；第二试剂60 u/l 测光点16---41 测定模式：速率法 正反应

分析波长：505nm/660nm(主波长/副波长)

6计算方法

样本浓度（mmol/L）=mmol/L）

校正管吸光度的变化

7 线性范围：本实验的线性范围：0---9mmol/L

8 参考范围：男性：0.45—1.81 mmol/L

女性：0.4—1.53 mmol/L

9 失控控理

1：立即重测同一质控品，如重测后结果仍不再允许范围，请进行下一步。 2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常，那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。

3：进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，查明光源是否更换，比色杯

是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂，此时可更换试剂已查明原因。如果结果仍不再允许范围内，则进行下一步。

4：重新校准。重测失控项目。用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。 5：请专家帮助。如果前五步都为能得到在控结果，那可能是仪器或试剂已查明原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。

10注意事项

1.4份试剂1与1份试剂2混合后，可作为单试剂用。混合后的试剂溶液应避光储存于2-8°C可稳定7天。

2.反应颜色可稳定1小时

3.单位换算：甘油三酯mmo/L****88.5=甘油三酯mg/dl

4.若试剂混浊，或以水为空白在520nm处吸光度值大于0.1时，则不能使用。

5.样本与废液等有潜在生物传染性危险，操作者颖遵守实验室安全操作规定并按当地医疗废弃物，感染性废弃物，产业废弃物等规定处理废液。

11临床意义

增多：见于冠心病、心肌硬化动脉、粥样硬化、高血压病、糖尿病、肾病综合征等。大于2.26毫摩/升为增高，称高甘油三酯血症。肥胖的人，其甘油三酯往往偏高。

减少：常见于甲状腺功能亢进、肾上腺皮质功能低下、肝实质病变、慢性阻塞性肺病、脑梗死、恶病质、原发性低密度脂蛋白(β脂蛋白)缺乏症及消化不良。

葡萄糖（2终点法）

单位：大同滨河肝胆病医院

科室: 检验科生化室

文件编号：

版本：

批准施日期：

有校期: 一年

复审计划：每年复审，测定系统变化时需进行修订 发放部门：检验科生化室

编写者：

审批者:

保管者:

修订者：

葡萄糖（2终点法）

1概述

本试剂适用于体外定量检测人血清或血浆中葡萄糖的浓度。

葡萄糖的准确测定对于诊断和治疗高血糖和低血糖症是十分重要的。

高血糖症可发生于糖尿病，静脉输入含葡萄糖液体，严重应激状态，脑血管意外。低血糖症可见于胰岛瘤，胰岛素用药，先天性碳水化合物代谢障碍，和禁食。通常在研究这些病症时，还将葡萄糖测定与各种耐量实验和刺激实验一同进行。 2；样本要求

葡萄糖样本应在用含氟化钠的样本管收集，以防止细菌污染和糖酵解。血清和血浆应尽快从样本管中分离，不应溶血。肝素抗凝血样本。

血清和血浆样本在2—8°C可稳定24小时，30°C可稳定4小时。

尿液样本在2---8°C可稳定1天，必要时可采用硫柳汞等化学防腐剂

3；检验原理

葡萄糖+H2O+O2--------葡萄糖酸+ H2O2

H2O2+4-氨基安替比林+苯胺类色原物质-------------醌亚胺色素+水

4剂来源，配置及储存

试剂来源：迪瑞

试剂配置：试剂一和试剂二均为液体试剂，可直接使用。启用后在2-8度可稳定30天。若试剂混浊，或以蒸馏水为空白在500nm处的光吸收值低于1.0A,应予丢弃。 试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。

5分析仪器

CS-600B全自动生化分析仪

分析参数：样品量2u/l 试剂量：第一试剂240 u/l（R1）；第二试剂60 u/l

测光点16---50 测定模式：速率法 正反应

分析波长：505nm/660nm(主波长/副波长)

6计算方法

样本浓度（mmol/L）=mmol/L）

校正管吸光度的变化

7 线性范围：本实验的线性范围：0---30 mmol/L

8 参考范围：血清或血浆：3.89---5.83mm/L

尿液：0.28---0.83mm/L

9 失控控理

1：立即重测同一质控品，如重测后结果仍不再允许范围，请进行下一步。

2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常，那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。

3：进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，查明光源是否更换，比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂，此时可更换试剂已查明原因。如果结果仍不再允许范围内，则进行下一步。

4：重新校准。重测失控项目。用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。

5：请专家帮助。如果前五步都为能得到在控结果，那可能是仪器或试剂已查明原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。

10注意事项

1.4份试剂1与1份试剂2混合后，可作为单试剂用。混合后的试剂溶液应避光储存于2-8°C可稳定7天。

2.反应颜色可稳定2小时

3.单位换算：葡萄糖mm/L****18=葡萄糖mg/dl

4.若试剂混浊，或以水为空白在500nm处吸光度值大于0.1时，则不能使用。

5.样本与废液等有潜在生物传染性危险，操作者颖遵守实验室安全操作规定并按当地医疗废弃物，感染性废弃物，产业废弃物等规定处理废液。

11临床意义

1．生理性血糖升高 饭后1～2小时，摄入高糖食物、紧张训练、剧烈运动和情绪紧张，肾上腺分泌增加。

2．血糖升高 (1) 糖尿病，一般分两型，一是I型，即胰岛素依赖型，可能与遗传因素或自身免疫有关，多发生于青年时期。另一型为Ⅱ型，即非胰岛素依赖型。胰岛素细胞功能低下，胰岛素分泌不足或可能与遗传因素亦有一定关系。此型多见于40岁以上成人，多数见于肥胖患者，胰岛素分泌相对减少，或组织对胰岛素的感应性低下，或胰岛素受体减少。此型临床症状较前者轻。

(2) 慢性胰腺炎，由于炎症胰岛组织被破坏，使胰岛素分泌功能缺陷，而致

血糖升高。

(3) 内分泌腺疾病，例如肢端肥大症或巨人症，由于生长激素分泌亢进，

拮抗胰岛素的作用使血糖升高。肾上腺皮质机能亢进，如柯兴综合征，因皮质醇分泌增多，促进糖原异生，并可对抗胰岛素作用而使血糖升高。又如嗜铬细胞瘤，肾上腺素分泌增多，促使肝糖原转变成葡萄糖，并抑制胰岛素分泌，使血糖增高。长期应用肾上腺糖皮质激素治疗，亦可使血糖升高，甚至发生“药物性”糖尿病。

3．血糖降低 (1) 内分泌腺病变血糖降低见于胰岛素医学教 育网 原创瘤(胰岛β细胞瘤)，因胰岛素分泌过量，使血糖分解加强。亦见于拮抗胰岛素类激素分泌不足，如阿迪生病(慢性肾上腺皮质功能衰竭)、席汉综

(2) 肝脏病变，急性肝炎、肝硬化等严重肝功能损害，使肝糖原分解障碍亦可有发生低糖血症的可能。低血糖亦见于糖原累积症。

(3) 某些肿瘤，如巨大纤维瘤或纤维肉瘤，可能分泌量胰岛素样物质，而致血糖降低。

(4) 胰岛素分泌功能紊乱，如单纯性肥胖症、植物神经功能紊乱，常可发生胰岛素分泌过多，而致血糖降低。

(5) 血糖降低亦见于胰岛素自身免疫性低血糖、胰岛素受体异常症(B型)等，这可能由于胰岛素抗体、受体结合的胰岛素急骤解离，致使血糖分解加强。

(6) 暂时性低血糖亦可见于胃次全切除后所发生的颠倒综合征，这是由于进食后糖迅速吸收，促进胰岛素急速分泌，引起暂时性低血糖。

(7) 营养不良、吸收不良综合征或重症肾性糖尿病等都可出现血糖降低趋势。

(8) 药物，如应用胰岛素、口服降糖药等由于用量不当可引起低血糖。

尿素氮测定（速率法）

标准化操作程序文件

单位：大同滨河肝胆病医院

科室: 检验科生化室

文件编号：

版本：

批准施日期：

有校期: 一年

复审计划：每年复审，测定系统变化时需进行修订 发放部门：检验科生化室

编写者：

审批者:

保管者:

修订者：

尿素氮测定（速率法）

1.概述

尿素是人体内蛋白氮代谢的终产物，它构成了血液中绝大部分的非蛋白氮。尿素产生于肝脏，经过肾脏排泄至尿中，因此尿素的含量取决于蛋白质的摄入量，蛋白质分解代谢和肾功能。

2.标本的手收集

新鲜无溶血标本，血清或血浆样本均不溶血。血浆样本只能采用肝素或EDTA抗凝。样本在4摄氏度可稳定7天。采血前病人应禁食12小时，采集静脉3ml,待凝固后（最好放在37摄氏度水浴箱内45分钟）通常为加抗凝剂的血液在30-60分钟凝血析出血清。3000r/min离心5-10分钟，分离出血清备用。不建议采用血浆标本。

3.方法原理

样品中的尿素在试剂中脲酶的催化下与水反应生成氨和二氧化碳，生成的氨与试剂中的酮戊二酸在谷氨酸脱氢酶的催化下产生谷氨酸，同时NADH被氧化为NAD+，从而使340nm处的光吸收值下降。通过监测340nm处光吸收值下降的速率，可计算出样品中尿素的浓度。

4.剂来源，配置及储存

试剂来源：

试剂配置：试剂一和试剂二均为液体试剂，可直接使用。启用后在2-8度可稳定30天。若试剂混浊，或以蒸馏水为空白在340nm处的光吸收值低于1.0A,应予丢弃。 试剂储存：试剂避光储存2-8摄氏度可稳定至标签所示失效期。

5.分析仪器

CS-600B全自动生化分析仪

分析参数：样品量3u/l 试剂量：第一试剂240 u/l（R1）；第二试剂60 u/l

测光点21—26 测定模式：两点速率法 负反应

分析波长：340nm/405nm(主波长/副波长)

6.计算方法

样本浓度（mmol/L）= mmol/L）

校正管吸光度的变化

7. 线性范围：本实验的线性范围：0----35mmol/L

8. 参考范围：2.82---8.2 mmol/L

9. 失控控理

1：立即重测同一质控品，如重测后结果仍不再允许范围，请进行下一步。

2：新开一瓶质控品，重测失控项目，如新开的质控血清结果正常，那么原来质控血清可能过期或在室温防止时间过长而变质，如结果仍不再允许范围，则进行下一步。

3：进行仪器维护，重测失控项目。检查仪器状态，查明光源是否更换，比色杯是否需要清洗或更换？对仪器进行清洗等维护。另外还要检查试剂，此时可更换试剂已查明原因。如果结果仍不再允许范围内，则进行下一步。

4：重新校准。重测失控项目。用新的校准液校准仪器，排除校准液的原因。

5：请专家帮助。如果前五步都为能得到在控结果，那可能是仪器或试剂已查明原因，只有和仪器或试剂厂家联系请求他们的技术支援。

10. 注意事项

1：试剂和样本用量可根据不同仪器要求按比例改变。

2：如测试结果超出线性范围，样本应稀释后测试，调整因子数或将结果乘以稀释倍数。 3：结果的准确性仪器校正和测定温度，时间的控制。

4：由医生根据临床症状和其他实验结果做出临床诊断。

11.临床意义

血尿素氮增高：

（1）肾性增高见于急性肾炎、慢性肾炎、中毒性肾炎、严重肾盂肾炎、肾结核、肾 血管硬化症、先天性多囊肾和肾肿瘤等引起的肾功能障碍。 血尿素氮高，尤其对尿毒症的诊断有特殊价值，其增高程度与病情严重性成正比，如肾功能不全氮质血症期血尿素氮超过9mmol/L，至尿毒症期B血尿素氮（BUN）可超过20mmol/L，有助于病情的估计。

（2）肾前性增高见于充血性心力衰竭、重度烧伤、休克、消化道大出血、脱水、严重感染、糖尿病酸中毒、肾上腺皮质功能减退、肝肾综合征等。

（3）肾后性增高见于因尿路梗阻增加肾组织压力，使肾小球滤过压降低时，如前列腺肥大、肿瘤压迫所致的尿道梗阻或两侧输尿管结石等。

血尿素氮降低：

血尿素氮低对于临床诊断意义较小，偶见于急性肝萎缩、中毒性肝炎、类脂质肾病等。