微生物实验知识总结与实践应用

经过这学期学习和实验操作，我对《微生物实验》有了一些初步的认识，也从中学习到了有用的知识。《微生物学实验》是要求我们掌握实验知识的基本操作和技能训练，初步了解和掌握先进的技术和方法，与迅速发展的科学前沿接轨。微生物：包括细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生动物、显微藻类等在内的一大类生物群体，它个体微小，却与人类生活关系密切。涵盖了有益有害的众多种类，广泛涉及健康、食品、医药、工农业、环保等诸多领域。我将我这学期学到的微生物学知识，结合生活和工业当中的一些应用，归纳如下：

在吾尔恩老师的带领下，我们先从最基本的知识学起。

（1）无菌操作技术：高温对微生物具有致死效应，因此微生物在转接过程中，一般再火焰旁进行，并用火焰直接灼烧接种环，已达到灭菌的目的。在做实验时要保持严谨的态度，以后的实验中多数操作都必须再火焰旁进行。

（2）培养基的制备：培养基是人工配置的生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质，用以培养、分离、鉴别微生物或积累代谢产物。自然界中培养基的种类很多，但是不同的培养基中，一般含有水分、碳源、氮源、无机盐和生长因子等，不同类别的微生物对PH值的要求一般不同。

（3）消毒与灭菌：灭菌是用理化方法杀死一定物质中的微生物的微生物学基本技术。灭菌的彻底程度受灭菌时间与灭菌剂强度的制约。微生物对灭菌剂的抵抗力取决于原始存在的群体密度、菌种或环境赋予菌种的抵抗力。灭菌是获得纯培养的必要条件，也是食品工业和医药领域中必需的技术。是指用物理或化学的方法杀灭全部微生物，包括致病和非致病微生物以及芽孢，使之达到无菌保障水平。经过灭菌处理后，未被污染的物品，称无菌物品。经过灭菌处理后，未被污染的区域，称为无菌区域。

（4）平板分离与活菌计数：平板分离计数法是将待测菌液经适当稀释，涂布在平板上。经培养后在平板上形成肉眼可见的菌落。根据稀释倍数和取样量计算出样品中细胞密度。平板分离法主要有：1.平板划线分离法。2.稀释涂布平板法。

（5）革兰氏染色法：革兰氏染色法可将细菌分为革兰氏阳性细菌（G+）和革兰氏阴性细菌（G-）两种类型。这是两种细菌细胞壁结构和组成的差异决定的。大肠杆菌是革兰氏阴性杆状细菌，金黄色葡萄球菌是革兰氏阳性细菌，经过革兰氏染色后两者呈现不同的颜色，在显微镜下便于进行观察……

我们学习微生物实验技术，就是要把微生物的实验技能应用于实践生产，培养繁育细菌收集细菌代谢产物，应用于药业、工业，产生经济利益。制备培养基是微生物实验技术操作的重要环节，按照培养基的功能分类培养基的类型有：1.选择培养基。2.鉴别培养基。在工业生产中常常应用于培养微生物的主要是-发酵罐。我将微生物在生产生活中的应用总结如下：

微生物技术的应用在当今社会中已取得了很大的作用，在工业、农业、医药业、畜牧业等各个行业中都取得了长足的进展，但相对于微生物技术广阔的前景来看，这些应用是微不足道的，现代的微生物技术主要的发展趋势是：

（1）将微生物应用在基因组的研究上，微生物的结构简单、代谢途径和产物多样，是人类解开生命之谜的最好的研究材料。

（2）新微生物类群的发现及应用，一些新发现的在极端高温、高压、低温、酸碱、高盐、强辐射等情况下存活的微生物，其体内可能含有在极端条件下催化反应的酶，极有可能开辟研究的新天地。

（3）生物质资源导向性新经济体制的建立，解决环境、资源、粮食问题的最根本途径是开发利用可再生的生物质资源，因此，随着人们对可持续发展意识的增强，社会经济发展模式将由石油导向型向生物导向型转化，而且微生物技术在实现此目标的过程中将起到关键的核心作用：使用生物质资源的生物综合利用工艺不造成或少造成环境污染，使用生物质资源没有二氧化碳净产生，产品都是生物可降解的，废弃物可通过生物技术再转化为资源等。

（4）微生物技术应用是可持续发展的基石，在将来的社会发展中，微生物技术将继续在发酵工业、生物医药产业中开拓广阔的发展空间，并将在未来的资源循环型化学产业和环境生物产业中发挥越来越大的作用。

通过对微生物进行分离、接种与培养特征观察，对微生物的染色、鉴定与显微个体观察，应用微生物检验饮用水及空气的卫生，我们逐步了解微生物的特性和形态，逐步学会利用微生物对各种样品进行检测的方法。

我们懂得做实验需要有严谨和细心的精神。在实验的绝大部分过程中，都需要无菌操作，即对与实验有关的——实验人的手，实验工具器具仪器，溶液等都需要进行严格的消毒灭菌。如果因为不慎，便会造成其它细菌的感染，直接导致试验的失败。

微生物的实验除了让我们进一步深刻的了解微生物这一广泛分布在天地间的“清洁工”，初步了解微生物在环境工程领域的应用。还培养了我们严谨认真的科学精神，只有拥有这些精神的人，才能在试验中获得正确的结果，才能学会在试验中不断探索，不断进取。

    

第二篇：微生物学实验总结

1.抗“O”试验（ASO test）：链球菌侵入体内产生SLO，刺激机体产生相应抗体ASO，当两者中和后，再加入SLO 乳胶试剂，因病人血清中ASO量很多，未被中和掉的抗体与乳胶试剂反应，产生清晰凝集，为阳性；无凝集，为阴性。

原理：中和试验

方法：间接凝集

结果：效价大于400单位为阳性

意义：链球菌感染指标或风湿热及其活动性的辅助诊断

2.肥达试验Widal test

原理：用已知伤寒沙门菌O、H抗原，以及引起副伤寒的甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌和希氏沙门菌H抗原的诊断菌液与受检血清作定量凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。

用途：辅助诊断伤寒，副伤寒

结果：考虑正常人群抗体水平

动态观察：恢复期效价增加≥4倍

O IgM,出现早，维持时间短，特异性差

H IgG,出现迟，维持时间长，特异性强

O高 H高 肠热症可能性大

O低 H低 排除

O高 H低 早期或有交叉反应的其它沙门菌感染

O低 H高 预防接种或曾患过伤寒

3.抗酸染色法(acid-fast stain) ：以5％石炭酸复红加温染色，再用3％盐酸酒精脱色，然后用美蓝复染，则分枝杆菌呈红色(+)，其他细菌和背景物质为蓝色(-)。

4.结核菌素试验定义：是应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核分枝杆菌是否能引起迟发型超敏反应（Ⅳ型变态反应）的一种试验

材料：旧结核菌素、纯蛋白衍生物( PPD )

方法：前臂皮内注射PPD5单位

结果：注射后72h，红肿硬节≤5mm 阴性→未感染；＞ 5mm 阳性→已感染（接种BCG等） ≥ 15mm 强阳性→活动性感染

假阴性：感染初期、严重结核病患者、细胞免疫功能降低（麻疹、AIDS、肿瘤、免疫抑制剂) 应用：①选择卡介苗接种对象和测定卡介苗接种后的免疫效果。结核菌素试验阴性者应接种或补种卡介苗

②作为婴幼儿(尚未接种过卡介苗者)结核病的辅助诊断

③在未接种卡介苗的人群中作结核杆菌感染的流行病学调查,了解人群自然感染率 ④测定肿瘤患者的细胞免疫功能

5.外斐反应：变形杆菌代替相应的立克次体抗原进行非特异性凝集反应，检测人类或动物血清中有无相应的抗体

本质：交叉凝集试验，立克次体病的辅助诊断

6.革兰染色法：制片→涂片→干燥→固定→染色

初染（结晶紫1min）→媒染（碘液1min）→（95%酒精 30sec）→复染（稀释复红30sec）→印干→油镜镜检