篇一 :实验6血红蛋白含量测定

实验6 血红蛋白含量的测定(必修)

酸化血红蛋白稀释测定法(改良沙利氏法)

[目的与原理]

掌握测定鱼类血红蛋白含量的原理和方法,应用改良沙利氏法测定不同鱼类血红蛋白含量。

本实验是应用比色法测定鱼的血红蛋白量。血红蛋白本身的色泽,常随所结合的氧量多

少而改变,不便比色。但是加入稀盐酸于血液中可使血红蛋白变成不易变色的高铁血红蛋白,这就可以与标准色相比,从而测出其含量。通常以每100ml血液中含血红蛋白克数来表示,正常鱼血红蛋白含量为7—8g。

[实验对象]

鲤、鲫或草鱼。

[试剂与器材]

血红蛋白比色计,搪瓷盘,注射器,凹瓷盘,小试管,试管架,蒸馏水,75%酒精,棉球,0.1mol/L盐酸(配置盐酸用具),蒸馏水,滴管,纱布,烧杯,抗凝剂(1%肝素钠溶液或10%草酸钾溶液)。

[实验步骤]

1、了解血红蛋白比色计的构成 血红蛋白计主要包括吸血管、比色计和比色管等部件。

吸血管为一厚壁毛细玻璃管,其上有10μl、20μl的刻度,尾端连有橡皮头,供吸血用。比色计的两侧,装有标准浓度的高铁血红蛋白溶液,也有用比色玻璃柱(或片)来代替的。比色管可插在比色计中,与两侧的标准比色柱进行比色。比色管的两侧通常刻有两行刻度。一行为血红蛋白的绝对值,以g计数(每100毫升血液中所含血红蛋白的克数)来表示,刻度范围为2~22。另一行为血红蛋白相对值,以%(即相当于正常平均值的百分数)来表示,

刻度范围为10%~160%。目前测定常用绝对值来表示。

2、用蒸馏水将比色管洗净,吸血管则依次用蒸馏水,95%酒精和乙醚洗净干燥备用。

3、用滴管加0.1mol/L盐酸4—6滴到刻度比色管内,约加到管下端刻度“2”或“10%”

处为止。

4、采血:采血方法见实验49,用吸血管吸血至20μl刻度(要准确)。用绵球仔细将管

尖端外面的血拭去。

5、将吸血管中血液轻轻地滴到比色管中盐酸底部,并用上层较清的盐酸溶液反复清洗

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篇二 :实训四 血红蛋白的测定

红河卫生职业学院《临床检验基础》实训教案

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篇三 :20xx-20xx年中国血红蛋白测定仪行业市场发展现状及投资前景深度研究报告

20xx20xx年中国血红蛋白测定仪行业市场发展现状及投资前景深度研究报告

中金企信(北京)国际信息咨询有限公司—国统调查报告网

2013-20xx年中国血红蛋白测定仪行业市场发展现状及投资前景深度研究报告

报告目录

第一部分 行业发展现状

第一章 血红蛋白测定仪行业发展概述

第一节 血红蛋白测定仪的相关知识

一、血红蛋白测定仪的定义

二、血红蛋白测定仪的特点

第二节 血红蛋白测定仪行业发展成熟度

一、行业发展周期分析

二、行业中外市场成熟度对比

三、行业及其主要子行业成熟度分析

第三节 血红蛋白测定仪市场特征分析

一、市场规模

二、产业关联度

三、影响需求的关键因素

四、国内和国际市场

五、主要竞争因素

六、生命周期

第二章 全球血红蛋白测定仪市场发展分析

第一节 2008-20xx年世界血红蛋白测定仪产业发展综述

一、世界血红蛋白测定仪产业特点分析

二、世界血红蛋白测定仪主要厂家分析

三、世界血红蛋白测定仪产业市场分析

第二节 2007-20xx年世界血红蛋白测定仪行业发展分析

一、2007-20xx年世界血红蛋白测定仪行业发展分析

二、20xx年世界血红蛋白测定仪行业发展分析

第三节 全球血红蛋白测定仪市场分析

一、2011-20xx年全球血红蛋白测定仪需求分析

二、2011-20xx年欧美血红蛋白测定仪需求分析

三、2011-20xx年中外血红蛋白测定仪市场对比

第三章 我国血红蛋白测定仪行业发展现状

第一节 中国血红蛋白测定仪行业发展状况

一、2011-20xx年血红蛋白测定仪行业发展状况分析

二、2011-20xx年中国血红蛋白测定仪行业发展动态

三、2011-20xx年血红蛋白测定仪行业经营业绩分析

四、2011-20xx年我国血红蛋白测定仪行业发展热点

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20xx20xx年中国血红蛋白测定仪行业市场发展现状及投资前景深度研究报告

中金企信(北京)国际信息咨询有限公司—国统调查报告网

第二节 中国血红蛋白测定仪市场供需状况

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篇四 :血红蛋白测定

血红蛋白测定

【实验目的】

掌握血红蛋白测定的临床意义

熟悉毛细管采血过程,分光光度计的操作

了解血红蛋白测定的注意事项

【实验原理】

血液在血红蛋白转化液中表面活性剂的作用下溶血后,血红蛋白(除SHb外)被高铁氰

-化钾(K3Fe(CN)6)氧化为高铁血红蛋白(Hi),Hi再与氰化钾(KCN)中的氰离子(CN)

结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白(HiCN)。HiCN最大吸收波峰在540nm,最小吸收谷为504nm。可用分光光度计直接测定或用HiCN 标准液比色法测定。即可求出待测血红蛋白浓度。此法称HiCN法。

【试剂】

血红蛋白转化液(文齐氏液,Van kampen-Zijlstra’液):

-氰化钾50 mg ,提供氰离子(CN)

高铁氰化钾200 mg ,氧化剂

无水磷酸二氢钾140 mg ,缓冲液成分,维持溶液的pH值,

【实验操作】

(1) 取一支试管加入5.0ml HiCN试剂,取全血20μl,加入到5.0ml HiCN试剂中,混匀后静置5 min,使血红蛋白转化完全。

0 (2) 分光光度计,波长540nm ,比色杯光径1.0cm ,杯温20-30C,以蒸馏水或空白

转化液调零,测定样品吸光度值(A)。

【计算】

根据比尔定律,浓度与吸光度成正比,所以实际操作中我们还可以直接用待测液的吸光度A测/标准液的吸光度A标=待测液的浓度C测/标准液的浓度C标来直接计算待测液的浓度。

【参考值】

男性:120 ~160g/L ,女性:110 ~150g/L ,新生儿:170 ~200g/L 。

【临床意义】

照书上写

血红蛋白测定

图1 红细胞和血红蛋白的生理变化曲线

红细胞计数医学决定水平:高于6.8×1012/L,应采取相应治疗措施;低于3.5×1012/L可诊断贫血;低于1.5×1012/L应考虑输血。

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篇五 :血红蛋白测定及注意事项

(2)以上述同样的方法取血,并使血红蛋白转化为氰化高铁血红蛋白。然后以转化液作空白,测定标本吸光度A。

(3)通过标准曲线查出待测样本的血红蛋白浓度或用K值来计算血红蛋白浓度,即

-1Hb(g·L)=K×A (6.2-2)

3.使用沙里氏血红蛋白计测定

沙里氏比色法是用HCl使血红蛋白酸化形成棕色的高铁血红蛋白,然后和标准比色板进行比色。

(1)沙里血红蛋白计 主要具有标准褐色玻璃比色箱和1只方形刻度测定管组成。比色管两侧通常有两行刻度;一侧为血红蛋白量的绝对值,以g·dl-1(每100 ml血液中所含血红蛋白的克数)表示,从2~22 g;另一侧为血红蛋白相对值,以%(即相当于正常平均值的百分数)来表示,从10%~160%。为避免所使用的平均值不一致,因此一般采用绝对值来表示。

(2)具体测定方法如下:

①用滴管加5~6滴,0.1mol·L-1 HCl到刻度管内,(约加到管下方刻度”2”或多或10%处)。 ②用微量采血管吸血至20 μl(方法同上述),仔细揩去吸管外的血液。

③将吸血管中的血液轻轻吹到比色管的底部,再吸上清液洗吸管3次。操作时勿产生气泡,以免影响比色。用细玻棒轻轻搅动,使血液与盐酸充分混合,静置10 min,使管内的盐酸和血红蛋白完全作用,形成棕色的高铁血红蛋白。

④把比色管插入标准比色箱两色柱中央的空格中。

⑤使无刻度的两面位于空格的前后方向,便于透光和比色。用滴管向比色管内逐滴加入蒸馏水,并不断搅匀,边滴,边观察、边对着自然光进行比色,直到溶液的颜色与标准比色板的颜色一致为止。

⑥读出管内液体面所在的克数,即是每100 ml血中所含的血红蛋白的克数。比色前,应将玻棒抽出来,其上面的液体应沥干净,读数应以溶液凹面最低处相一致的刻度为准。换算成每升血液中含血红蛋白克数(g·L-1)。

[注意事项]

1.取血前要做好充分的消毒。

2.血液要准确吸取20 μl,若有气泡或血液被吸入采血管的乳胶头中都应将吸管洗涤干净,重新吸血。洗涤方法是:先用清水将血迹洗去,然后再依次吸取蒸馏水、95%酒精、乙醚洗涤采血管1~2次,使采血管内干净、干燥。作为学生练习,微量采血管可反复使用。

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篇六 :血红蛋白的测定

实验四 血红蛋白的测定

1.本次实验的目的和要求

了解和练习沙利氏比色法测定血红蛋白含量。

2.实验内容或原理

血液加入稀盐酸后,血红蛋白转化成不易变色的棕色的高铁血红蛋白,可与标准比色板进行比色,从而测得血红蛋白含量。

3.需用的仪器或试剂等

人或动物。沙利氏血红蛋白计、酒精棉球、0.1mol/L盐酸、蒸馏水等。

4.实验步骤

(1) 先检查血红蛋白计的测定管和吸血管是否清洁,如不清洁则依次用自来水、蒸馏水

(3次)、95%酒精(2次)和乙醚(1~2次)清洗。

(2)将0.1mol/L盐酸加入测定管中至刻度“2”或“10%”处。

(3)用酒精棉球消毒采血部位,以采血针采血,用吸血管插入流出的血滴深处,吸血至

刻度20ul处,拭净外壁,将血液立即吹入测定管的盐酸中。反复吸吹,使吸血管中血液全部进入盐酸液中(避免起气泡)。混匀,10min后,逐滴加入蒸馏水使液体颜色变浅,边加边混匀并与标准比色板比较,至二者颜色相同止。

(4)读出测定管内液体凹面最低处的刻度,即为每100mL血液中血红蛋白的克数。

另一方面刻度表示百分率,可参照血红蛋白计的说明换成克数以核对读数。

实验五 红细胞脆性的测定、

1.本次实验的目的和要求

测定红细胞膜对不同低渗溶液的渗透抵抗力.亦即测定正常动物红细胞的渗透脆性。了解红细胞沉降率并掌握其测定方法。了解红细胞凝集现象,并掌握测定血型的方法。

2.实验内容或原理

内容:实验室可完成红细胞脆性实验,血红蛋白含量检测的实验内容。做到改变某些因素时的检测内容,结合实验理解红细胞脆性的概念,分析论证产生的结果。

原理:

(1)通过实验了解正常的红细胞悬于等渗的血浆中,若置于高渗溶液内,则红细胞失去

内部液体而皱缩,反之,置于低渗溶液内则水分进入红细胞,使红细胞两面凹陷的圆盘型变为球型,如继续膨大,即发生破裂溶解,形成溶血。

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篇七 :血红蛋白的测定

血红蛋白的测定 ——沙利氏比色法 测定血红蛋白的方法很多,常见的有直

接比色法,光电比色法,沙利氏(Sahli) 目视比色法(间接比色法)。Sahli氏目视比色法虽然精确度较差,但方法简便快速。

【目的】了解Hb测定方法,练习测定Hb含量的沙利氏比色法,理解Hb测定原理。 【原理】 血液与盐酸作用后,释放出血红蛋白,Hb被酸化后变为褐色的盐酸高铁血红蛋白,与标准色柱相比,便可测出其含量。 【器材与试剂】

(1)沙利氏血红蛋白计一套

血红蛋白的测定

吸管为一厚壁毛细玻璃管,其上有10微升和20微升两个刻度,上端接一橡皮吸管。比色架内有标准色柱。测定管上有两种刻

度,从下往上,一侧有2—24的刻度,表示100m1血液中所含血红蛋白克数,以g/dl表示;另一侧有20—160的刻度,表示100ml血液中血红蛋白的百分数。国产的血红蛋白计是以每100ml血液含14.5g血红蛋白为100%而设制。 (2)0.1M盐酸

(3)75%酒精棉球、干棉球、采血针、蒸馏水

【步骤】 (1)将测定管和吸管依次用自来水、95%酒精洗净,干燥备用。

(2)向测定管内加入0.1M盐酸5-6滴,约加到管下端刻度“2”为止。

(3)采血、比色:先消毒无名指尖,再用采血针在无名指尖处采血,用干棉球擦去第一滴血,待第二滴血自然流出一大滴时,用吸管取血液20ul。擦去吸管外血液后,轻轻加入测定管底部,并回吸数次以洗出吸管中的血液。轻轻振动比色管,使血液与盐酸充分混合。

(4)静置10min,待血液变成褐色后,缓缓滴加蒸馏水,每加1滴,用细玻璃棒搅动一次,直到颜色与标准色柱完全相同为止。液柱凹面所指的刻度数,即为每百毫升血液中血红蛋白的克数,用g/dl或g%表示。

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篇八 :血红蛋白测定方法

6.1 血红蛋白测定(氰化高铁法)

消光系数法和标准曲线法任选其一测定血红蛋白。

1.6.1.1 光系数法

1.6.1.1.1 原理

血红蛋白(haemoglobin,Hb)被铁氰化钾氧化后生成高铁血红蛋白,再生氰离子结合形成氰化高铁血红蛋白(红色),氰化高铁血红蛋白(红色)极为稳定,在540nm波长下,毫克分子消光系数为44,据此,用分光光度法测其光密度,运用消光系数作血红蛋白的定量测定。

1.6.1.1.2 仪器

721型或其它型号的分光光度比色计。

10微升量吸管。

1.6.1.1.3 试剂

称取碳酸氢纳( )140毫克\铁氰化钾200毫克、氰化钾50毫克,用水溶解并稀释到1000毫升。贮存於棕色试剂瓶内,在暗处或冰箱(+4℃)保存,至少可稳定数月到一年。

1.6.1.1.4 实验步骤

1.6.1.1.4.1 试剂2.5毫升於5毫升带盖试管中,加入10微升血液,混匀后,放置15分钟。

1.6.1.1.4.2 选用0.5厘米光径比色杯,于540nm波长下,以试剂调零点,将所得样品管之光密度乘以73.6,即为血红蛋白之浓度(克%)。

计算公式如下:

Ct=待测的血红蛋白(克%)浓度。

D 540 = 氰化高铁血红蛋白在540nm波长下测出的光密度。

HICN

251=测 定时血液的稀释倍数(血10微升加入试剂2.5毫升中)

44=氰化高铁血红蛋白的毫克分子消光系数

0.5=比色杯的光径

10000=将(毫克/升)换算成(克%)的数字

1.6.1.1.5 注意事项

1.6.1.1.5.1 试剂不要放在聚乙烯瓶内,以免因氰离子与其反应而使试剂作用降低。 1.6.1.1.5.2 仪器因mM消光系数法完全依靠仪器的吸光度来计算,故此法要求所用的仪器性能要符合要求(如仪器的波长准确与否,以及灵敏度及线性等),否则将直接影响测定的结果。

1.6.1.1.5.3仪器在使用前最好以WHO规定的氰化高铁血红蛋白参考液校正后再使用。参考液最好选用ICSH9国际血液学标准化委员会)确定的由RIV(莅国立公共卫生研究院)制定的氰化高铁血红蛋白参考液或上海医学化验所制血的氰化高铁血红蛋白标准液。

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