药物有效期的测定实验报告

一、实验目的：

1. 了解药物水解反应的特征：
2. 掌握硫酸链霉素水解反应速度常数测定方法，并求出硫酸链霉素水溶液的有效期。

二、实验原理

链霉素是由放线菌属的灰色链丝菌产生的抗菌素，硫酸链霉素分子中的三个
碱性中心与硫酸成的盐，分子式为：（C₂₁H₃₉N₇O₁₂）₂.3H₂SO₄,它在临床上用于治疗各种结核病，本实验是通过比色分析方法测定硫酸链霉素水溶液的有效期。
    硫酸链霉素水溶液在PH4.0——4.5时最为稳定，在过碱性条件下易水解失
效，在碱性条件下水解生成麦芽酚（α-甲基-β-羟基-γ-吡喃酮），反应如下：

（C₂₁H₃₉N₇O₁₂）₂.3H₂SO₄+H₂O------ 麦芽酚 + 硫酸链霉素其他降解物
该反应为假一级反应，其反应速度服从以及反应的动力学方程
      lg(C₀-x)=k/-2.303t+ lgC₀
式中C₀——硫酸链霉素水溶液的初浓度
X——t时刻链霉素水解掉的浓度
t——时间，以分为单位
k ——水解反应速度常数

  若以lg(C₀-x)对t作图应为直线，由直线的斜率可求出反应速度常数k。
硫酸链霉素在碱性条件下水解得麦芽酚，而麦芽酚在酸性条件下与三价铁离
子作用生成稳定的紫红色鳌合物，故可用比色分析的方法进行测定。
    由于硫酸链霉素水溶液的初始C₀正比于全部水解后产生的麦芽酚的浓度，
也正比于全部水解测得的消光值E∞,即C₀∝E∞;在任意时刻t，硫酸链霉菌素水
解掉的浓度X应于该时刻测得的消光值Et成正比，即X∝ Et，将上述关系代入
到速度方程中得：
           lg(E∞—Et)=（-k/2.303）t+ lgE∞
可见通过测定不同时刻t的消光值Et，可以研究硫酸链霉素水溶液的水解反应规律，以lg(E∞—Et)对t作图得一直线，由直线斜率求出反应的速度常数k。
   药物的有效期一般是指当药物分解掉原含量的10%时所需要的时间t0.9。
         t0.9=ln(100/90)/k=1/k·ln(100/90)=0.105/k

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巢湖职业技术学院

ChaoHu vocational and Technical College

药理学实验报告

（供药学专业使用）

班级＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿

姓名＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿

组别＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿

指导教师＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿

巢湖职业技术学院药学教研室

目     录

实验一    药物的基本作用………………………………………………………3

                 

实验二    剂量对药物作用的影响………………………………………………5

实验三    不同给药途径对药物作用的影响……………………………………7

     

实验四    药物血浆半衰期的测定………………………………………………9   

实验五    传出神经系统药对动物腺体分泌的影响……………………………11

                          

实验六    传出神经系统药对兔眼瞳孔的作用…………………………………13

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药物半衰期的测定

目的：学习测定药物血浓度半衰期的基本方法

原理：半衰期为血药浓度下降一半所需要的时间。大多数药物按一级动力学规律消除，符合恒比规律

即㏒C/C0= —kt/2.303

公式中的C0、C的含义分别为t=0 的血药浓度及经过时间 t 后的血药浓度，因为C0 很难准确测定，又因药物消除的全过程皆符合公式（1），因此，从t1 时刻，血药浓度为C1，经过t 时间后的t2时刻，血药浓度C2，符合公式（1），

即得：㏒C2/C1= — kt/2.303 (2)

又根据半衰期的定义，从（2）式又可得：

㏒1/2= —kt1/2 /2.303 (3)

(3)÷(2)式得： —㏒2 t1/2

㏒C2/C1 t

该公式中为时刻血药浓度，为时刻血药浓度，为从时刻至时刻的时间间隔，所采用的单位即的单位，如 等。

因此在相同的条件下，只要测出时刻血浆中磺胺嘧啶的光密度，即可求得之值

（一）磺胺嘧啶的测定方法

现以磺胺嘧啶为例，学习药浓半衰期的测定方法。血浆中游离磺胺的测

定，是根据显色原理设计的。游离磺胺在酸性溶液中可与亚硝酸纳（）起重氮反应，产生重氮化合物，后者在碱性溶液中再与显色剂麝香草酚反应，生成橙红色偶氮染料。反应过程如下：

重氮化反应：

显色反应： 重氮+麝香草酚偶氮

偶氮颜料的深浅与磺胺的浓度有关，可用光电比色法测出其光密度。通过与标准品光密度的比较及运算，可推算出磺胺药的血药浓度。

计算公式如下：

器材：兔手术台，手术器械，72-2型分光光度计，离心机及试管，吸管，滴管

药品：4%磺胺嘧啶钠，5%三氯醋酸，0.5%，0.5%麝香草酚（用20%新鲜配制），肝素 动物：家兔

方法：

1、取家兔一只，由耳缘静脉注射4%磺胺嘧啶钠2.5，记录给药时间。

2、静脉注射肝素750抗凝，于给药磺胺嘧啶钠后30分钟及1小时，从对侧耳缘静脉各抽血

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酚红血药浓度的测定

摘要 目的：观察静脉血注射酚红后，不同时间血液中酚红浓度的变化；学习血药浓度测定的基本方法；掌握药物在体内的半衰期、表观分布容积等参数。方法：兔子耳缘静脉注射酚红后，分别在5、10、20、30min钟后取血1.5ml，离心，稀释后，通过测量其吸光度劲儿测出各时间血液中的酚红浓度，据此作时间-浓度曲线，得酚红在体内的半衰期、表观分布容积等值。结果：数据经分析后得到酚红的半衰期为 3.9907min，表观分布容积为0.0217L。

关键词 酚红；药物半衰期

前言

前已了解到药物在体内的代谢过程中的一些基本概念，如清除半衰期、药物表观分布容积等。药物清除半衰期是血浆药物浓度下降一半所需要的时间。药物表观分布容积为党血浆和组织内药物分布达平衡后，体内药物按此时的血浆药物浓度在体内分布时所需体液容积。但并不清楚实际情况中药物在体内的代谢情况，故以酚红为例，更深入了解药物在体内的代谢过程以及药物清除半衰期、药物表观分布容积等概念。

方法

实验原理：酚红为一种常用的化学指试剂，静脉注射后因其在体内不被代谢，不易通过毛细血管进入组织，故可用比色法测定静脉注射后不同时间点的血浆酚红的吸光度，然后通过统计软件可计算出药物清除半衰期及表观分布容积。

实验对象：家兔，体重2~2.5kg，雌雄不拘。

实验药瓶与器材：新鲜配制的0.6%酚红溶液，5ml注射器，兔盒，试管，手术刀片，肝素溶液，1ml加样器，2ml移液管，洗耳球，台式离心机，721型分光光度计，华中科技大学酚红血浆清除半衰期分析软件，及实验室常用器材。

实验步骤：⑴将兔子至于兔盒后，兔耳采血1.5ml，于兔子耳缘静脉注射一定量的酚红。⑵分别于5、10、20、30min后采集兔血1.5ml，记录采集的开始时间以及结束时间。⑶对已采集的5份兔血进行离心，取上层血浆测其吸光度。⑷将各个血样采集的时间以及对应的吸光度输入分析软件，得到酚红的清除半衰期以及表观分布容积。

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机能实验学指导

药理学实验部分

          西藏民族学院医学系

           2004年7月

目录

实验一、药理实验的基本知识和基本技能（综合实验）

实验三、不同给药途径和不同给药剂量对药物作用的影响实验

实验四、药物对家兔离体肠平滑肌的作用

实验五 血浆药物半衰期（t1/2）的测定

实验六、有机磷药物的中毒及其解救（综合）

实验七、药物的镇痛作用

实验八、药物的抗心律失常作用

实验九、录象及病案讨论

实验十、烟的急性毒性试验（综合实验）

实验一、药理实验的基本知识和基本技能

一、    药理学实验须知

二、    ㈠、目的

药理学实验课的目的在于通过实验，使学生1、掌握药理学实验的基本方法，2、了解获得药理学知识的科学途径，3、验证药理学中的重要理论，更牢固地掌握药理学的基本概念和基本知识。药理学实验课更高层次的目的是4、在于培养学生的能力，实验课是培养学生发现问题、分析问题和解决问题的重要课程。几乎所有药理学知识都是通过实验—有目的的科学实验而得到的。我们上实验课，就是要了解我们的前辈科学家们是怎样提出问题、分析问题并最终设计出科学的实验来验证或解决问题。也就是说，我们上实验课的目的是教会学生一种方法，一种科学的方法，一种获取知识的新手段。能否通过实验课培养学生的发现问题、分析问题和解决问题的能力，是我们实验课成败的关键，对学生来说，能否通过实验课培养自已严肃认真和实事求是的科学态度，使自已具有初步的科研能力，是医学生能否成才的关键问题。

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实验二 药物血浆蛋白结合率测定

前 言：药物血浆蛋白结合率是药物与血浆蛋白结合的量占药物总浓度的百分率，是药物代谢动力学的重要参数之一。它影响药物在体内的分布、代谢与排泄，从而影响其作用强度和时间，并往往与药物的相互作用及作用机制等密切相关。研究药物血浆蛋白结合率的方法包括常规的平衡透析法、超滤法、超速离心法、凝胶过滤法、分配平衡法、稳定同位素-GC-MS法、光谱技术等。本实验主要通过采用平衡透析法对药物血浆蛋白结合率进行测定，对于新药研究开发和指导临床合理用药都具有重要意义。

关键词：血浆蛋白结合率 平衡透析法 磺胺嘧啶

【实验原理】平衡透析法的基本原理是将蛋白置于一个隔室内，用半透膜将此隔室与另一隔室隔开。蛋白等大分子不能通过此半透膜，但系统中游离配基可自由通过。当达到平衡时半透膜两侧自由配基的浓度相等。若系统中自由配基的总量已知，测定不含蛋白隔室中自由配基的浓度，即可推算与蛋白结合的配基量。再用重氮化偶合比色测定法对磺胺药的含量进行测定。其测定原理是具有游离氨基的磺胺药在酸性介质中重氮化后，可与N-(1萘基）乙二胺产生偶合反应生成紫红色偶氮染料，再与同样处理的磺胺药标准液比较，即可求得剩余的亚硝酸影响测定，用氨基磺酸胺分解除去。

【材料与试剂】

1. 药物 10%磺胺嘧啶钠注射液

2. 试剂

15%三氯醋酸溶液 0.1%亚硝酸钠溶液 0.5%氨基磺酸胺溶液 0.1%二盐酸N-（1萘基）-乙二胺溶液 磺胺嘧啶钠贮存标准液 磺胺嘧啶钠应用标准液(3.75ug/ml)

3. 透析液

pH7.4的 0.02M 磷酸盐缓冲液，内含0.15M NaCl

4. 鸡、兔各3只

5. 管状半透膜 周长5cm，长约12cm

【试剂的配制】

1. 0.1%二盐酸N-（1萘基）-乙二胺溶液

0.5 g溶于95 %乙醇约400 mL中，再 用乙醇稀释至500ml，棕色瓶于冰箱中保存

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《药理学实验》教学大纲

【课程编号】17315272

【英文名称】Experiments of Pharmacology

【课程学时】16

【适用专业】制药工程

一、本实验课程的教学目的和要求

药理学实验是与药理学理论教学密切的重要实践环节。以药理学实验的基本知识、技术和方法为基础，结合不同作用类别的药物，使学生掌握药理学实验的基本知识，掌握药理学实验的基本技能，验证药理学中的基本理论，牢固掌握药理学的基本概念；了解在药物发现和评价过程中，药理学研究的内容和必要性。通过药理学实验，使学生了解获得药理学知识的科学途径，同时培养学生实践操作、互助协作、独立思考、综合分析和解决问题能力，体验科学研究的基本程序，全面提高学生的综合素质。

二、本实验课程与其它课程的关系

药理学实验是对《药理学》和《生理学》理论课程教学的补充和完善，同时有利于《生物化学》的理论知识中的有关部分的理解。

三、实验课程理论教学内容安排

本实验课程不安排理论教学内容

四、实验内容安排

1、实验项目的类型及性质

2、实验项目说明

实验一、药理学实验的基本知识和基本技术

【目的要求】熟悉药理学实验的基本技术；能掌握药理学实验的基本知识和基本技术

【内容】药理学实验基本知识；实验动物的捉拿和固定方法；实验动物标记方法；实验动物给药方法。实验动物取血方法；实验动物处死方法。

【方法】理论讲授结合实际操作

实验二、不同途径、不同剂型、不同剂量的阿托品对药物作用的影响

【目的要求】学习不同途径、不同剂型、不同剂量对药物作用的影响；了解不同给药途径及同一药物不同剂型对药物吸收的影响及特点。通过实验比较不同途径给予阿托品的药效学有何不同。通过实验比较不同剂型、不同剂量的阿托品的作用。

  实验动物为健康昆明种小鼠（雌雄不拘）。

【内容】1 介绍静脉注射及静脉滴注、肌肉注射、皮下注射、动脉注射、锥管注射、腹腔注射、胃肠道给药、舌下给药及黏膜给药、直肠给药、吸入给药、透皮给药等途径的药物吸收特点。

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