血红蛋白电泳检查(电泳法)
1. 原理
血红蛋白是由两对多肽链组成的复杂分子。每一条链含有血红素和络合铁原子的卜啉。所有血红蛋白的血红素部分都是相同的。所测定的血红蛋白的蛋白部分称之为珠蛋白。正常人血红蛋白多肽链包括α、β、δ和γ。血红蛋白的结构、分子特性取决于形成其肽链的氨基酸顺序和性状。氨基酸不同可形成不同的血红蛋白,其表面电荷不同,在电场中的泳动率不同。本实验在碱性(PH=8.60)条件下,以琼脂糖凝胶电泳的方法进行,对红细胞洗涤后造成溶血,电泳分离血红蛋白后以氨基黑染色。多余的染色液用酸性液体洗去。待琼脂糖凝胶板干燥后,肉眼可直接判别有无电泳条带异常。运用光密度扫描仪检测准确定量分析电泳条带异常情况。血红蛋白异常有二种类型:血红蛋白性质或结构的异常称之为血红蛋白病。血红蛋白中的一条链合成减少引起血红蛋白性质异常,称之为地中海贫血。
2. 标本采集
2.1 标本采集前病人准备:受检者应空腹。
2.2 标本种类:抗凝血
2.3 标本要求:抗凝剂选用EDTA,柠檬酸或肝素均可,避免碘乙酸。常规静脉采血1.8ml,加入含有109mmol/L枸橼酸钠溶液0.2ml的干燥。清洁试管中,充分混匀。
4. 标本储存:储存于2-8℃冰箱中,5天。
5. 标本运输:储存于2-8℃状态下的冰壶或泡沫箱密封运输。
6. 标本拒收标准:细菌污染、溶血或脂血标本不能作测定。
7. 试剂
7.1 试剂名称:血红蛋白电泳检查试剂
7.2 试剂生产厂家:法国Sebia公司
7.3 包装规格:150tests
7.4 试剂盒组成
琼脂糖凝胶 10块 溶血素 1瓶
缓冲液条带 10包×2条 薄滤纸 1×10张
氨基黑(浓缩液)1瓶×100ml 点样模具滤纸 10条×1盒
7.5 试剂储存条件及有效期:贮存于室温(15~30℃)或冰箱(2~8℃),不能冷冻。有效期两年。
…… …… 余下全文