姓名:** 年级专业:20##级生物科学
同组者:**
学号:***
实验六 维生素C的定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)
一、实验目的
掌握2,6-二氯酚靛酚法测定维生素C的原理和方法。
二、实验原理
维生素C又称抗坏血酸(ascorbic acid)。在1928年,从牛的肾上腺皮质中提取出的结晶物质,证明对治疗和预防坏血病有特殊功效,因此称为抗坏血酸。
还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚钠盐。本身则氧化成脱氢抗坏血酸。在酸性溶液中,2,6-二氯酚靛酚呈红色,被还原后变为无色。
因此可用2,6-二氯酚靛酚滴定样品中的还原型抗坏血酸。当抗坏血酸全部被氧化后,稍多加一些染料,使滴定液呈淡红色,即为终点。若无其它杂质干扰,样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含的还原型抗坏血酸量呈正比。
三、实验仪器
1、新鲜水果
2、电子分析天平
3、吸管
4、容量瓶
5、滴定装置
6、锥形瓶
7、研钵
8、漏斗
四、实验试剂
1、2%草酸溶液:草酸2g,溶于100ml蒸馏水。
2、1%草酸溶液:草酸1g,溶于100ml蒸馏水。
3、标准维生素C液:准确称取10.0mg维生素C,溶于1%草酸溶液,并稀释至100ml,贮于棕色瓶中,冷藏,最好临用时配制。此溶液浓度0.1mg/ml.
4、0.1%2,6-二氯酚靛酚溶液:称取500mg2,6-二氯靛酚溶于300ml含有104mg碳酸氢钠的热水中,冷却,加蒸馏水并稀释至500ml,滤去不溶物,贮于棕色瓶中,冷藏。每次临用时,以标准抗坏血酸液标定。
五、实验步骤
(一)样品中抗坏血酸的提取:
1、将水果用水洗干净,用滤纸吸取表面水分。
2、称取5.0g,加2%草酸试剂10ml置研钵中研成浆状。
3、称取浆状物5.0g,倒入50ml容量瓶中,用2%草酸溶液稀释并定容,混匀,静止10分钟,过滤(最初数毫升滤液弃去),滤液备用。
…… …… 余下全文