篇一 :HPV病毒的常用通用引物检测

HPV病毒的常用通用引物检测

摘要 研究表明,HPV病毒感染与人体多种肿瘤的发生相关。对感染个体的病毒检测具有重要的疾病诊断、治疗、预防意义。但目前缺乏可以兼顾敏感性、特异性、操作简单,可以大规模推广使用的可靠检测方法。对待测样本进行PCR检测仍是目前实验室最多采用的检测方法。PCR具有高敏感、易操作的优点,但其反应的灵活性和极高的敏感性,也带来了假阳性和假阴性的问题。针对HPV病毒L1序列保守区域设计的通用引物检测,最常被应用于大样本检测。通用引物可以在一次PCR反应中同时检测多种型别的HPV病毒感染,与序列特异PCR检测相比,可以大大减少检测的工作量。但其缺点在于,通用引物仅与某个或少数HPV型序列匹配,而对于多数型别HPV,引物结合区都存在或多或少的碱基错配。这使得通用引物对不同型别的HPV扩增效率不同。因此,使用通用引物检测HPV感染时,对于某些与引物匹配较差的HPV型别,其感染情况往往可能被低估。目前常用的通用引物根据设计原则不同分为三类:1)单一引物如:GP5+/6+。2)简并引物如:、MY09/11。3)混合引物如:SPF1/2。个型通用引物都有其各自的优缺点,需要根据特定试验的目的、条件选用合适的通用引物进行检测。

【关键词】 HPV病毒;通用引物;单一引物;简并引物;混合引物

HPV病毒是一种亲上皮细胞的双链DNA病毒,其基因组长约7900bp。目前约共发现约200多型HPV病毒。该病毒主要感染皮肤和粘膜的上皮细胞,造成上皮增生甚至恶性转化[1] [2] [3]。人们已经在生殖道检测到超过40型的HPV,其中许多与宫颈内皮增生及宫颈癌密切相关,如:16、18、31、33、35等,这部分HPV病毒被称为高危型[4][5]。而HPV6、11等型别主要存在于良性病变中,

[6][7]多造成生殖道疣等疾病,被称为低危型。但人为区分的高危型和低危型并不

[8]是绝对的,因为在一些癌变中确实也存在所谓的低危型HPV 。

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篇二 :hpv病毒怎么检查

hpv病毒怎么检查

提起性病,应该很多人都熟悉,而且很多人都会害怕。特别是对于得过性病的患者来说,他们就深知性病给自己带来了多大的影响,所以治好后很多人心里仍然存在阴影。目前,危害人类最大的性病有尖锐湿疣、生殖器疱疹,引起尖锐湿疣的病毒为人乳头瘤病毒(hpv)。现在好多医院都在做关于hpv的检测,那么hpv病毒到底怎么检查呢?下面,就由我院专家介绍一下hpv的检测方法:

1、dna检测

hpv的检查可以取病变组织或者局部组织粘液、分泌物进行dna检测。pcr技术具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时,对待检原始材料质量要求低等特点。该项技术已在医学领域以及在皮肤病检查中广泛应用。目前认为pcr技术是检测dna及分型的最好方法,是当今用于尖锐湿疣以及hpv感染诊断最常用的。

2、hpv抗体的检测

有学者研究发现,在hpv感染的早期,由于感染时间短,hpv还未诱导出抗hpv抗体的产生,故在血清中可能检测不到抗hpv抗体。随着hpv感染时间的延长,hpv诱导产生了抗hpv抗体,故可检测到血清中抗hpv抗体。这表明抗体的出现发生在尖锐湿疣病期的晚些时候,同时抗体阳性也反映曾感染过这种病毒。到目前为此,尚不能用血清学方法对hpv感染进行确诊,因此血清中hpv抗体阳性的临床意义有待正确评价。

3、hpv抗原的检测

hpv感染人体表皮细胞后,在细胞内增殖合成衣壳蛋白而成为hpv抗原成分.免疫酶染色可检测感染组织细胞内的hpv抗原成分,以了解有无hpv感染。hpv抗原阳性对诊断hpv感染或尖锐湿疣具有重要意义。但由于hpv抗原免疫组化方法只能确认细胞核的衣壳蛋白,而此衣壳蛋白仅出现在hpv生活周期中的一个阶段(在后期病毒颗粒中产生),病变程度不同抗原量表达也不同,同时,这种方法需要大量病毒颗粒才出现阳性反应,此外,在制片过程中的处理也会使一些抗原丧失,故此法检出率较低,目前已很少应用。

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篇三 :HPV检测及临床应用

HPV检测及临床应用

人乳头瘤病毒概述

人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)属于乳头多瘤空泡病毒科(papovaviridae)乳头瘤病毒属,是一种可引起人类黏膜组织良性及恶性肿瘤的病毒。它于19xx年由Strauss在电镜下发现,是由DNA核心和蛋白衣壳组成的无包膜双链环状DNA病毒,其核心是由7800~7900个碱基对以共价键组成,含有遗传信息的密环状双链DNA,外为72个壳粒包绕,构成对称型的20面体。病毒无包膜,直径为55nm,分子量为54000道尔顿。其感染主要是上皮组织,具有高度的宿主特异性,对人体特异部位的上皮细胞具有亲和力。HPV在人体的温润条件中最易生长增殖,性接触为主要的传染途径,病期在3个月左右者传染性最强。少数情况下,有可能通过接触污染物品感染,如内裤、浴盆、毛巾等传播。分娩过程中,胎儿经过母亲HPV的感染产道或出生后与患母密切接触均可感染。

HPV在人群中极易传播扩散,可通过直接或间接接触交叉传染,其感染部位隐蔽,发病隐匿,不易早期发现,可致多种增生性病变,在女性生殖系统所引起的最常见的恶性肿瘤为宫颈癌。全世界每年约有50万妇女宫颈癌新发病例,其中亚洲约占38万;每年约有23万女性死于子宫颈癌。在不同地区、不同经济状况的国家宫颈癌的发病率和死亡率有着显著的差别,其中80%的病例发生在发展中国家。我国每年约有15万宫颈癌新发病例,每年约有8万人死于子宫颈癌,其死亡率居妇科肿瘤的第二位。近年来,宫颈癌病人数目在逐渐上升,并呈年轻化的趋势。

对宫颈癌的病因学研究可知,HPV感染是子宫颈癌的主要致病因素,99.7%宫颈癌患者存在HPV感染。目前,宫颈癌是人类所有癌症中唯一原因明确、早发现可治疗的癌症,其早期治疗的5年生存率接近100%,晚期治疗5年生存率为20-50%。筛查是目前预防和早期诊断宫颈癌的主要手段。世界各国的妇产科学会均推荐将HPV检测用于宫颈癌的早期筛查,以浓缩高风险人群,便于进行有效的监控、早期发现宫颈癌。

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篇四 :HPV病毒检测1

HPV病毒检测

一、病毒简介:

HPV病毒(人乳头瘤病毒缩写)是一种属于乳多空病毒科的乳头瘤空泡病毒A属,是球形DNA病毒,能引起人体皮肤黏膜的鳞状上皮增殖.目前已分离出130多种,该病毒只侵犯人类,对其它动物无致病性,人体一旦感染会终生携带。不同的型别引起不同的临床表现,根据侵犯的组织部位不同可分为:

(1)黏膜低危型如HPV-6、11、13、32、34、40、42、43、44、53、54等与感染生殖器、肛门、口咽部、食道黏膜;

(2)黏膜高危型HPV-16、18、30、31、33、35、39与宫颈癌、直肠癌、口腔癌、扁桃体癌等。 生物学活性:HPV抵抗力强,能耐受干燥并长期保存,加热或经福尔马林处理可灭活,所以高温消毒和2%戊二醛消毒可灭活。

二、HPV感染途径

1、性传播途径;

2、密切接触;

3、间接接触:通过接触感染者的衣物、生活用品、用具等;

4、医源性感染:医务人员在治疗护理时防护不好,造成自身感染或通过医务人员传给患者;

5、母婴传播:是由婴儿通过孕妇产道的密切接触。

三、HPV基因分型检测的临床意义

1、不同基因型的HPV具有不同的致病危险性。

2、对个体HPV基因分型检测的意义:宫颈病变风险提示,明确受检者是相同亚型的持续感染还是不同亚型的反复感染,有利于了解感染者的免疫情况和持续感染原因,从而给予正确的防治处理意见。

3、 由于在接种疫苗前进行HPV基因分型检测,可避免疫苗无效接种。

4、 给大规模人群HPV分型普查的流行病学研究提供依据;通过普查了解掌握不同型别HPV感染区域性分布特征。

四、宫颈癌筛查对象

21岁以上有性生活史或有三年以上性生活史的任何妇女。

五、样本采集

?

? 尿道分泌物:在无菌条件下,用棉拭子伸入尿道内,旋转数周并停留片刻后取出; 宫颈脱落细胞:在无菌条件下,用宫颈刷伸入宫颈管内2cm,旋转数周并停留片刻后取出;

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篇五 :DNA定量和HPV检测区别

如何看DNA定量和HPV检测区别

谈谈HPV与宫颈癌检测的关系!

1、世界卫生组织,已经明确HPV感染与宫颈癌有密切关系。但公众更要知道这些:持续的高危险HPV感染才容易致宫颈癌,无需“谈毒色变”!

2、HPV的感染与人的免疫力是非常有关系的,很多宫颈癌病人,多表现免疫力低下、或月经不调等;中医认为,正气存,邪不可干!;

3、很多人感染HPV是一过性的,且30岁之前不提倡做HPV检测;

4、目前HPV检测方法种类繁多,不同检测方法会出现不同的结果,究竟相信那一个呢?

5、即使有HPV感染,如果细胞形态没有变化,是不需要做任何治疗的,只能随访!

6、目前对待HPV阳性病人,世界上没有任何特性性药物来治疗。而我们的应用中医益气、补虚、中药、艾灸等多种措施来干预能起到非常好的效果;

7、发病的过程是先感染病毒,后引起细胞形态变化,而目前的宫颈病变治疗规范是依靠病理组织诊断结果来处理的;

8、很多宫颈病人,切除了病变,甚至切除了全子宫,还是出现有问题的细胞,请问下面要切什么呢?

9、如果一个女性知道了感染HPV病毒,非常加重病人的心理负担,且影响夫妻关系,对病人是不是更不利呢?

因此,在DNA倍体技术和HPV两者之间,选择DNA倍体技术要明显优于HPV检测。

并非HPV病毒就会导致宫颈癌

调查发现,HPV病毒其实广泛存在于我们的生活之中,并且凡是有性生活的女性都有可能通过性接触而感染HPV病毒。让人惊讶的是,约有80%的女性在其一生中都感染过这类病毒,但是,她们并非全部都患上了宫颈癌。那么到底什么样的情况才有可能导致宫颈癌的出现呢?

专家指出,虽然持续感染高危HPV病毒是导致宫颈癌及其癌前病变发生的必要因素。然而,感染了HPV并不一定会患宫颈癌,大多数女性的免疫系统可以把进入体内的HPV清除。而对于女性来说,只有持续的HPV感染才会发展成为不同级别的CIN或者是宫颈癌。

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篇六 :★最新★ 检验报告单

姓名: 一些单位

性别: 女 年龄: 38 送检科室: 妇科 检验标本: 白带

检验项目: 白带常规+BV 送检医生: 主任

检验结果:

红细胞: — 白细胞: +++ 脓细胞: — 滴 虫: — 真 菌: — 杂 菌: ++

阴道杆菌: — 上皮细胞: — 线索细胞: + 清 洁 度: III度

B V: + 其 他: — 姓名: 一些单位 性别: 男 送检科室: 检验标本: 检验项目: 送检医生:

检验结果:

颜色: 乳白色 红细胞: 白细胞: 脓细胞: 卵磷脂小体: 上皮细胞:

滴虫: 霉菌: 杂菌: 精子: PH值: 其他:

年龄: 38 外科

前列腺液

前列腺液常规 主任

姓名: 一些单位 性别: 男 送检科室: 检验标本: 检验项目: 送检医生: 送检日期:

年龄: 38 外科 分泌物

分泌物常规 主任

2009-09-

检验结果:

红细胞: 白细胞: 脓细胞: 其他:

滴虫: 霉菌: 杂菌:

姓名: 一些单位 性别: 男 送检科室: 检验标本: 检验项目: 送检医生: 年龄: 38 外科 分泌物 CT、UU 主任

检验结果:

CT-Ab: UU-培养:

正常范围 阴性

阴性

姓名: 一些单位 性别: 男 送检科室: 检验标本: 检验项目: 送检医生: 年龄: 38 外科 血

HPV-Ab、HSV-Ab 主任

检验结果:

HPV-Ab: HSV-Ab:

正常范围 阴性

阴性

姓名: 性别:

年龄:

抗精子抗体(As-Ab) 抗心磷脂抗体(ACA) 弓形虫抗体(Tox-IgM)

检验结果:

正常范围 阴性 阴性 阴性

送检科室: 外科 检验标本: 血 检验项目: 抗体三项 送检医生: 主任 检 验 者: 赵王 送检日期: 2009-09-

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篇七 :人类乳头瘤病毒(HPV)的检测方法

人类乳头瘤病毒(HPV)的检测方法

全网发布:2011-06-23 21:23 发表者:陈继明 (访问人次:10778)

摘要:人类乳头瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生和发展关系密切,HPV的检测已是宫颈癌早期筛查的一个重要方面。HPV的检测和分型对于了解宫颈癌病情变化、指导治疗、判断预后以及疫苗改进均具有十分重要的价值。本文将就HPV的检测方法的进展作一小结。 关键词:人乳头瘤病毒(HPV),宫颈癌,检测,疫苗

Abstract: Human papilloma virus (HPV) is strongly correlated with the pathogenesis and development of cervical cancer, the testing of HPV has been an important aspect of early screening of cervical cancer. The testing and classification of HPV is invaluable for acknowledging the advance of the disease, treatment, prognosis and the improvement of HPV vaccine. A summarization will be made in this article concerning with the advance of the testing methods of HPV.

Key words: human papilloma virus (HPV), cervical cancer, testing methods, vaccine

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一,占女性生殖器官恶性肿瘤的半数以上,严重威胁着妇女的健康。全世界每年大约有4万人患病,中国新发病例约计13万,占目前已发现的所有女性肿瘤的6%,是仅次于乳腺癌而引起妇女癌症相关死亡的重要原因。宫颈癌的发病机理目前尚不清楚,但已有很多研究证明,99%的宫颈癌组织中可检出人乳头瘤病毒(human papilloma virus, HPV)[1-2]。目前,已经明确HPV感染为宫颈癌前病变和浸润性宫颈癌发生的必要条件[3-4]。大量研究资料表明,HPV与宫颈癌及癌前病变密切相关,高危型HPV(HRHPV)感染与宫颈癌关系最为密切[5]。随着病变程度的加重,HPV的检出率也逐渐增高[6]。所以,许多专家提出将HPV的检测作为宫颈癌的一种筛查手段。目前,针对HPVDNA检测作为宫颈癌原始筛查方法以及与细胞学联合在筛查中的意义的研究报道较多[7-10]。本文将就HPV检测方法的相关内容进行小结,重点介绍目前应用最为广泛的PCR法和杂交捕获试验。 由于HPV至今尚不能在体外培养,又无合适的实验动物,因而对其检测主要依赖于形态学方法和分子生物学技术。目前HPV检测方法主要有细胞学法,斑点印迹法,荧光原位杂交法,Southern杂交法,多聚合酶链反应(PCR)法和杂交捕获法等。细胞学法敏感度和特异度较低;斑点印迹法具有放射性。目前较为公认的敏感度和特异度高的方法是捕获二代法;其它敏感度较高的方法有原位杂交,PCR法。但PCR法特异度很低,假阳性率较高;而核酶印迹原位杂交法复杂,不宜大规模临床使用。

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篇八 :HPV病毒和宫颈癌

HPV与宫颈癌

在20xx年10月6日“开奖”的诺贝尔生理或医学奖上,人乳头瘤病毒成了主角之一。德国海德堡癌症研究中心荣誉教授、前主任和科学主管,哈拉尔德?楚尔?豪森,因发现HPV能导致宫颈癌而获此奖。

什么是HPV?

人类乳头状瘤病毒是一种嗜上皮性病毒,有高度的特异性,HPV病毒就是导致宫颈癌的罪魁祸首

HPV感染的危险因素

① 性行为

② 吸烟

③ 多次妊娠

④ 口服避孕药

⑤ 免疫抑制低

⑥ 其他性传播疾病

⑦ 营养因素,地理环境因素。

⑧ 接触带有HPV的生活用品而感染,如内裤、浴盆或浴巾。

高危、低危HPV病毒型别

依据不同型别HPV与肿瘤发生的危险性高低分为低危险型别和高危险型别HPV,低危险型别HPV包括HPV6、11、42、43、44等型别,常引起外生殖器湿疣等良性病变包括宫颈上皮内低度病变(CIN I),高危险型HPV包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68等型别,与宫颈癌及宫颈上皮内高度病变(CIN II/III)的发生相关,尤其是HPV16和18型。

如何看待HPV检测结果?

HPV检测结果阴性,说明没有感染所检测的21种HPV病毒,在下一次常规检查前患宫颈癌或高度病变的风险极低。

HPV检测结果阳性,有以下情形:

① 单一低危型感染,患宫颈癌或高度病变的风险是非常低的,通常经过积极的治疗,

病毒会清除。

②单一高危型感染;包含高危型在内的两种或两种以上HPV亚型感染。患上宫颈癌或高度病变的风险大增。在这里还要了解几个概念:多重感染、持续感染或新的感染。多重感染是指两种以上的病毒亚型同时感染。持续感染指在几次的检查中,都检测出相同的亚型,表明病毒没有被完全清除。新的感染指两次检查中的病毒亚型并不相同,表明前一次感染的病毒已经消除,但又有新的病毒感染,这种人是病毒的易感人群。并不是所有的HPV感染者都发展为宫颈癌!

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