HPV病毒的常用通用引物检测
摘要 研究表明,HPV病毒感染与人体多种肿瘤的发生相关。对感染个体的病毒检测具有重要的疾病诊断、治疗、预防意义。但目前缺乏可以兼顾敏感性、特异性、操作简单,可以大规模推广使用的可靠检测方法。对待测样本进行PCR检测仍是目前实验室最多采用的检测方法。PCR具有高敏感、易操作的优点,但其反应的灵活性和极高的敏感性,也带来了假阳性和假阴性的问题。针对HPV病毒L1序列保守区域设计的通用引物检测,最常被应用于大样本检测。通用引物可以在一次PCR反应中同时检测多种型别的HPV病毒感染,与序列特异PCR检测相比,可以大大减少检测的工作量。但其缺点在于,通用引物仅与某个或少数HPV型序列匹配,而对于多数型别HPV,引物结合区都存在或多或少的碱基错配。这使得通用引物对不同型别的HPV扩增效率不同。因此,使用通用引物检测HPV感染时,对于某些与引物匹配较差的HPV型别,其感染情况往往可能被低估。目前常用的通用引物根据设计原则不同分为三类:1)单一引物如:GP5+/6+。2)简并引物如:、MY09/11。3)混合引物如:SPF1/2。个型通用引物都有其各自的优缺点,需要根据特定试验的目的、条件选用合适的通用引物进行检测。
【关键词】 HPV病毒;通用引物;单一引物;简并引物;混合引物
HPV病毒是一种亲上皮细胞的双链DNA病毒,其基因组长约7900bp。目前约共发现约200多型HPV病毒。该病毒主要感染皮肤和粘膜的上皮细胞,造成上皮增生甚至恶性转化[1] [2] [3]。人们已经在生殖道检测到超过40型的HPV,其中许多与宫颈内皮增生及宫颈癌密切相关,如:16、18、31、33、35等,这部分HPV病毒被称为高危型[4][5]。而HPV6、11等型别主要存在于良性病变中,
[6][7]多造成生殖道疣等疾病,被称为低危型。但人为区分的高危型和低危型并不
[8]是绝对的,因为在一些癌变中确实也存在所谓的低危型HPV 。
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