植物叶中色素的提取和柱色谱分离实验报告
一.实验目的
1、学习从植物中提取色素的方法。
2、学习柱色谱(层析)的原理及其操作方法。
3、掌握天然药物化学实验报告的一般写法。
二.实验原理
1、绿色植物叶中含有叶绿素(绿)、胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等多种天然色素。各种色素能溶解在有机溶剂(无水乙醇等)中形成溶液,使色素从生物组织中脱离出来。
2、柱色谱是通过色谱柱来实现分离的。在色谱柱内装有固体吸附剂(固定相)如氧化铝或硅胶。液体样品从柱顶加入,当液体流经吸附剂时,由于吸附剂表面对液体中各组分吸附能力不同而按一定的顺序吸附。然后从柱顶加入洗脱剂(流动相),样品中的各组分随洗脱剂按一定的顺序从色谱柱下端流出,根据不同颜色分段收集。吸附剂,常用吸附剂有氧化铝、硅胶、氧化镁等。吸附剂对化合物的吸附能力与分子的极性有关,极性越强,吸附能力越大,分子中含有极性较大的基团,其吸附能力也越强。溶剂,溶剂分为溶解样品的溶剂和洗脱剂。选择溶剂时还要考虑到被分离物各组分的极性和溶解度。通常是先将要分离的样品溶于非极性溶剂中,从柱顶加入柱中。然后用稍大极性的溶剂使各组分在柱中形成若干谱带。再用极性更大的溶剂洗脱被吸附的物质。为了提高洗脱效果,有时也使用混合溶剂。在本实验中色素成分在不同比例混合洗脱剂的作用下可以分离出来。
三.实验仪器及试剂
仪器:烧杯、量筒、色谱柱、分液漏斗、玻璃棒 、干燥的锥形瓶、滤纸、旋转蒸发仪 、酸式滴定管、布氏漏斗、研钵、胶头滴管、剪刀、天平
试剂:50g新鲜植物叶、中性氧化铝、甲醇 ( 9 5 % ,分 析 纯 ) 、乙醇、石油醚 ( 6 0~ 9 0 % ) 、丙酮 、无水硫酸钠 、正丁醇 、50g新鲜植物叶、
四.实验内容
1. 绿叶色素的提取
把新鲜绿叶洗净晾干或用滤纸吸干,称取5g绿叶,剪碎后放入研钵,再加入10mL乙醇。研磨后用布氏漏斗抽滤,弃去滤渣。
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