实验四  旋光法测定淀粉的含量

一、实验内容

    使用圆盘旋光仪测定淀粉的含量。

二、实验目的

    1、了解圆盘旋光仪的结构和工作原理；

    2、掌握使用圆盘旋光仪测定淀粉溶液旋光度的方法及利用旋光度求得其含量的方法；

    3、学会正确使用圆盘旋光仪。

三、实验原理

利用淀粉具有旋光性，在一定条件下，其旋光度的大小与淀粉的浓度成正比，=，测定其旋光度，即可计算出淀粉含量。

四、实验材料  未知浓度的淀粉溶液

五、仪器  WXG-4型圆盘旋光仪

六、实验步骤

    1、旋光仪的校准

   （1）打开电源，关闭空测试筒盖，稳定约10分钟；

（2）转动目镜调焦螺旋，使视场清晰；

（3）旋转度盘3.5度处，可看到暗视场；

（4）旋转度盘到零点，可见到较亮视场；

（5）旋转度盘使中间的条形消失（暗或亮），使整个视场亮度一致并记下读数。反复几次，取平均读数作为仪器零点。

    2、测定待测液旋光度

   （1）旋光管（干燥清洁）装入待测液（应稳定、澄清且无气泡，有气泡时要赶进试管圆球中），擦净水滴；

   （2）黄光稳定后，将旋光管装入旋光仪，此时试管圆球要靠近镜筒；

   （3）转动目镜调焦螺旋，使视场清晰。此时原视场旋转了一个角度，旋转度盘使整个视场亮度向偏暗方向移动，最终至视场亮度一致后，记下读数；

   （4）正角度（右旋）度盘读数值减去仪器零点值即为仪器测量值。负角度（左旋）度盘读数值减去180度即为仪器测量值。

七、结果处理

              （α-α₀）×100

     ω =                    ×100           

              L×203×m

八、说明

   1、三分视野示意图:

   2、WXG-4型圆盘旋光仪主要技术参数：

    （1）旋光度测定范围：±180 度

    （2）度盘格值：1 度

    （3）度盘游标读数值：0.05 度　

    （4）稳定时间：约10分钟

    （5）单色光源：钠灯

    （6）试管长度：100毫米、200毫米各1支　　

   3、仪器保养方法：

    （1）仪器应置于空气流通和温度、湿度适宜的地方以防潮；

（2）钠灯使用时间不能超过4小时，长时间使用必须关机10～15分钟；

（3）镜片不能用硬质的布质、纸擦，宜用擦镜纸；

（4）仪器停用后应罩上仪器罩防灰；

（5）试管使用后应及时用蒸馏水冲洗干净，擦干存放。

第二篇：粗淀粉含量的测定-旋光法

实验七 粗淀粉含量的测定

专业：食品质量与安全    姓名：陈晓燕    学号：16100308    2013/3/13

一、实验目的

1.掌握旋光仪的操作使用。

2.了解旋光法测粗淀粉的基本原理。

二、实验原理

 在加热及稀盐酸的作用下，淀粉水解并转入盐酸溶液中。在一定的水解条件下，不同谷物淀粉的比旋光度是不同的。其[α]_D²⁰在171~195之间，因此可用旋光法测定粗淀粉的含量。

三、实验仪器、试剂

1.1%盐酸溶液:将23.3mL比重为1.19的盐酸用蒸馏水稀释至1000mL，标定后的浓度为0.274±0.001mol/L。

2.30%硫酸锌溶液。

3.15%亚铁氰化钾溶液。

4.旋光仪、水浴锅、容量瓶（100mL）、锥形瓶（100mL）、分析天平（感重0.01g）、烧杯。

四、实验步骤

1.称取粉碎过40目筛的样品2.50g（精确至0.01g）放入200mL烧杯中，沿器壁缓慢加入50mL 1%盐酸溶液，并轻轻摇动使全部样品湿润，然后将烧杯放入沸水浴中。在3分钟内使其沸腾，准确沸腾15分钟，立即取出，迅速冷却至室温。

2.先加入1mL 30%硫酸锌溶液，充分混匀后，再加入1mL亚铁氰化钾溶液，摇匀，并全部转移至100mL容量瓶中，用少量蒸馏水将锥形瓶冲洗几次。若泡沫过多，加几滴无水乙醇消泡，用蒸馏水定容至刻度。混匀后过滤，弃取初始滤液15mL，收集其余滤液充分混匀后进行旋光测定。

五、实验结果

式中: α——测得的旋光度。

[α] _D²⁰ :淀粉的比旋光度（见表4-1）。

L:旋光管长度（dm）。

W:样品重量（g）。

表1   不同粮食淀粉的比旋光度

表2   实验测得的旋光度值α

[α] _D²⁰ =182.7

L=2dm

W=2.5008g

所以

六、实验说明

1.实验中，沸水浴要准备足量的水。用定时钟准确记时。

2.提前打开旋光仪，使其进入稳定工作状态。

七、实验讨论

（一）实验结果分析

     经查资料可知小麦中淀粉含量一般为53%~70%，而经计算我们组测得的值为89.28%，结果偏高，可能原因有：

（1）该面粉是优质面粉，淀粉含量较高；

（2）旋光仪不够精确；

（3）可能是由于测定时水温较低导致旋光度偏高，环境温度也有影响；

（4）样液中可能含有旋光度更高的杂质。

（二）思考题：

1.样品加盐酸处理时，煮沸时间少于或多于15分钟会对测定结果产生什么影响？

答：因为淀粉水解成葡萄糖才有旋光，控制加热时间是为了水解完全保证测定的准确性。若煮沸时间少于15min，淀粉可能水解不完全；如果煮沸时间多于15min，会发生副反应，产生糊精，也会影响实验结果。

2.为什么过滤时要弃取初始滤液15mL？

答：一是因为本小组在用滤纸做漏斗时未用蒸馏水先弄湿滤纸，直接倒需要过滤的浑浊液，因此会有部分未通过滤纸，直接从滤纸与漏斗的缝隙处流入烧杯；二是为了在滤纸表面形成滤饼层，此样液固体含量较高，适合使用滤饼层过滤，通常，过滤开始阶段得到的是浑浊液，对实验结果会有影响，所以要舍弃前15ml。

（三）实验方法

1.本实验采用旋光法测定淀粉含量，本法适用于不同来源的淀粉。

（1）优点：重现性好、操作简便、快速，由于淀粉的比旋光度大，直链淀粉和支链淀粉的比旋光度又很接近，因此本法对于可溶性糖类含量不高的谷物样品具有较高的准确度；

（2）缺点：蛋白质含量较高的样品，还有一些未知或性质不清楚的样品及淀粉已经受热或变性的样品，如高蛋白营养米粉，用旋光法测定时误差较大。

2.淀粉含量测定的其他方法有：

（1）物理法：[1]相对密度法

             [2]折光法

             [3]旋光法

（2）化学法：[1]还原糖法

             [2]碘量法（简便快速、灵敏、准确度高）

             [3]比色法

注：食品中还原糖、蔗糖、淀粉和果胶物质等的测定多采用化学分析法，但所测得的多是糖类物质的总量，不能确定糖的组分及每种糖含量。

（3）色谱法、电泳法：可对各种糖分进行分离和定量。

（4）酶法：灵敏度高、干扰少。可测定葡萄糖、蔗糖和淀粉等。