实验报告：午餐肉中亚硝酸盐含量的测定 一、实验内容

用盐酸萘乙二胺法测定午餐肉中亚硝酸盐的含量。

二、实验目的与要求

（1）熟悉掌握样品制备，提取的基本操作技能；

（2）进一步学习并熟练地掌握分光光度计的使用方法和技能；

（3）学习盐酸萘乙酸二胺比色法测定亚硝酸盐的原理及操作要点。

三、实验原理

样品经沉淀蛋白质，除去脂肪后，在弱酸条件下，亚硝酸盐与对安吉苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料，其最大吸收波长为550nm，可测定吸光度并标准比较定量分析。

四、试剂

1、亚铁氰化钾溶液：称取106克亚铁氰化钾[K4Fe9(CN)5.3H2O]，溶于水后，稀释至1000毫升。

2、乙酸锌溶液：称取220克乙酸锌[Zn(CH2C00)2·2H20]，加30毫升冰乙酸溶于水，并稀释至1000毫升。

3、饱和硼砂溶液：称取5克硼酸钠(Na2B07·10H20)，溶于100毫升热水中，冷却后备用。 4、0.4％对氨基苯磺酸溶液：称取0.4克对氨基苯磺酸，溶于100毫升20％的盐酸中，避光保存。

5、0.2％盐酸萘乙二胺溶液：称取0.2克盐酸萘乙二胺，溶于100毫升水中，避光保存。

6、亚硝酸钠标准溶液：精密称取0.1000克于硅胶干燥器中干燥24小时的亚硝酸钠，加水溶解移入500毫升容量瓶中，并稀释至刻度。此溶液每毫升相当于200微克亚硝酸钠。

7、亚硝酸钠标准使用液：临用前，吸取亚硝酸钠标准溶液5.00毫升，置于200毫升容量瓶中，加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于5微克亚硝酸钠。

五、仪器 小型绞肉机、分光光度计、25ml闭塞管

六、操作方法

1、样品处理：

称取2.5克经绞碎混匀的样品，置于50毫升烧杯中，加入6.3毫升硼砂饱和溶液，搅拌均匀，以70℃左右的水约150毫升将样品全部洗入250毫升容量瓶中，置沸水浴中加热15分钟，取出后冷至室温，然后一面转动一面加入2.5毫升亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入2.5毫升乙酸锌溶液以沉淀蛋白质，加水至刻度，混匀，放置0.5小时，除去上层脂肪，清液用滤纸过滤弃去初滤液20毫升，滤液备用。

2、亚硝酸钠含量的测定：

（1）亚硝酸钠钠标准曲线的制备：吸取0.00、0.20、0．40、0．60、0.80毫升亚硝酸钠标准使用液(相当于0、1、2、3、4微克亚硝酸钠)，分别置于25毫升比色管中，于标准与样品管中分别加入1毫升0.4％对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3-5分钟后各加入0.5毫升0.2％盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置15分钟，用2厘米比色杯，以零管调节零点，于波长538nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。 （2）样品测定：吸取20毫升上述滤液于25毫升比色管中，按标准曲线绘制同样操作，于波长538nm处测吸光度，从标准曲线上查出样品液含亚硝酸盐含量。

七、结果处理

1、数据记录：

比色管号 硝酸钠标准液量/ml 亚硝酸钠的含量 吸光度

0 0 0 0

1 0.2 1 0.042

2 0.4 2 0.083

3 0.6 3 0.103

4 0.8 4 0.129

样品 20ml样品处理液 0.036

2、绘制标准曲线 根据上面的数据画出一条线段，由线段可以得出一元性直线方程y=a+bx 由数据求出a=0.0076,b=0.0319.所以y=0.0076+0.0319x

根据分光光度计测出20ml样品处理液吸光度为0.036，代入上式得亚硝酸钠含量为0.89ug。

3、结果计算

亚硝酸盐X=(A×1000)/(m×20/250×1000)

X：样品中亚硝酸盐的含量，mg／kg；m：样品质量，g;

A:测定用样液中亚硝酸盐的含量，ug．

20:测定用用液体积；250：样品处理液总体积

解：A=0.89,m=2.5 代入上式得X=4.45mg/kg

八、结果分析

，午餐肉中的亚硝酸盐含量应符合QB1353--91的规定，即亚硝酸钠含量≦50mg/kg.本次试验

测得的午餐肉样品中亚硝酸盐的含量为4.45mg/kg<50mg/kg,因此本次检测的午餐肉样品所含的亚硝酸盐含量完全符合国家标准。

第二篇：肉中亚硝酸盐含量的测定