第四届地理科学学院学生课外科研立项课题结题论文
（文本）格式要求
一、 《第四届地理科学学院学生课外科研立项课题结题论文（文本）格式要求》适用于参加第
四届地理科学学院学生课外科研立项的各类调查报告、科技发明报告和学术论文，发明制作类作品研发的系统报告书或数据库说明书不在此要求之列。
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三、 各类调查报告、科技发明报告和学术论文（以下统称论文）内容依次包括：标题、论文摘
要（约400字）和相应的关键词（3 至5个）、正文、注释、参考文献、附录（如调查问卷、统计方法等技术性附录）等。
四、 论文格式要求
1. 论文放在申报书之后，与申报书装订在一起，无须独立设置封面。
2. 论文一律用计算机打印，纸张大小为A4；上下边距为2.5cm；左边距为3.0cm，右边距为2.5cm。 3. 页脚需设置页码，页码采用五号黑体字，加粗，居中放置，格式如：1，2，3??。
4.论文标题用标准三号黑体字，居中；有副标题者，副标题另起，前面加破折号，字体为小三号黑体。论文标题由作者自定，标题须与申报书保持一致。
5.作者及指导教师姓名用标准小四号仿宋字，署于标题下方，居中。
6.作者所在单位和邮编用五号宋体字署于作者下方，居中，如：
“华南师范大学生命科学学院，广东广州 510631”。
7.正文格式
(1) 小标题一般单独占行，前空两个汉字字符，一级小标题用标准小四号黑体字，其余小标
题用五号加粗宋体字。
(2) 层次编码：文科文稿中的小标题请依次使用：一、二、三、……；（一）、（二）、（三）. ……；
1. 2. 3. ……；（1）（2）（3）……。理科文稿中的小标题请依次使用：1 2 3……；1.1 1.2
1.3……；1.1.1 1.1.2 1.1.3……。
(3) 正文用五号宋体字，1.25倍行距（设置方法：在段落设置中选多倍行距，设置值选1.25）。
(4) 表格和插图。
表格。每个表格应有自己的表序和表题。表内内容应对齐，表内数字、文字连续重复时不可使用“同上”等字样或符号代替。表内有整段文字时，起行处空一格，回行顶格，最后不用标点符号。
插图。每幅图应有自己的图序和图题。
一般要求采用计算机制图。文中图表需在表的上方、图的下方排印表号、表名、表注或图号、图名、图注，字体为宋体，字号为小五加粗。
(5) 外文字母。外文字母采用我国规定和国际通用的有关标准写法。要分清正斜体、大小写和上下脚码。
(6) 数字。文中的数字，除部分结构层次序数和词、词组、惯用语、缩略语、具有修辞色彩语句中作为词素的数字必须使用汉字外，应当使用阿拉伯数码，同一文中，数字表示方法应前后一致。
(7) 公式。公式一般居中放置；有编号的公式顶格放置，编号需加圆括号标在公式右边，公式与编号之间不加虚线。公式下有说明时，应在顶格处标明“注：”。较长公式的转行应在加、减、乘、除等符号处。
8. 注释
(1) 用脚注说明标题或对全篇文章的注释，并用―*‖标明，列在当页正文下；正文与脚注之间用一条横线分开。
(2) 稿件中的引文一律采用夹注的方式，在稿件正文中提供引用文献的作者姓名、文献出版年代。正文中提到的文献与参考书目中的文献必须一一对应。引用中文作者时夹注中文姓名；引用英文作者时夹注英文姓氏。作者与年代之间用逗号隔开，例如：“……当前教育中重认知、轻情感的现象仍十分普遍”（卢家楣，2001）。
9. 参考文献
(1) 总体要求
1) 参考文献统一于正文后编号，编号按照在正文中首次出现的先后次序连续排列，用方括
号标注（如 [1]、[2]…），并按引用的先后顺序排列于文末。
2) 同一作者的同一文献被多次引用时，在文后参考文献表中只出现一次，其中不注页码；
在正文中标注首次引用的文献序号，并在序号的角标外著录引文页码。
(2) 英文文献
英文书名以斜体书写，实词首字母大写；英文论文篇名以正体书写，仅篇名首字母大写。英文著作者列姓氏，名以首字母代替。多个编著者之间以逗号分隔，最后一个编著者之前用and连接。具体格式如下： 英文专著格式：
[序号]主要编著者姓氏，名首字母. 出版年. 专著名(斜体)[M]. 出版地：出版者. 英文期刊论文格式：
[序号]主要编著者姓氏，名首字母. 出版年. 文章名[J]. 期刊名(斜体) 出版期别：页码.
[序号]析出文献主要编著者姓氏，名首字母. 出版年. 文章名[A]. In 原文献主要编著者名首字母.
姓氏 (Ed.)，论文集名（斜体）[C]. 出版地：出版者. 析出论文起止页码. 电子文献格式：
[序号]主要编著者姓氏，名首字母. 出版年. 电子文献题名. 电子文献的出处或可获得地址. 发
表或更新日期/引用日期.
(3) 中文文献
中文文献的条目内容排列如下：① 主要编著者，多个编著者之间以逗号分隔。②文献题名。③文献类型及载体类型标识。④出版地和出版者。⑤出版年。⑥ 文献出处或电子文献的可获得地址。⑦ 文献起止页码。
(4) 文献类型以单字母方式标识，标识情况如下：
文献类型 专著 论文集
［C］ 文集内文章 ［A］ 期刊文章 报纸文章 博士论文 ［J］ ［N］ ［D］ 硕士论文 ［MA］ 字母标识 ［M］
(5) 电子文献被引用为参考文献时，需标明参考文献类型及其载体类型，标识情况如下： 文献及载体类型
字母标识
联机网上数据库 ［DB/OL］ 光盘图书 ［M/CD］ 网上期刊 ［J/OL］ 网页文件 ［EB/OL］
(6) 以下针对各种文献类型，分类举例：
专著、论文集、学位论文、报告的格式：
[序号]主要编著者.文献题名[文献类型标识]. 出版地: 出版者, 出版年: 起止页码（整体引用时不
注）
[1]张韵斐.现代英语词汇学概论[M]. 北京: 北京师范大学出版社, 1986
期刊文章的格式：
[序号]主要编著者.文献题名[J]. 刊名, 年, 卷(期): 起止页码
[2]何龄修.读顾城《南明史》[J]. 中国史研究, 1998, (3): 167－173 论文集中的析出文献的格式：
[序号]析出文献主要编著者. 析出文献题名[A]. 原文献主要编著者. 原文献题名[C]. 出版地: 出
版者, 出版年, 析出文献起止页码
[3]徐烈炯. 反身代词的所指对象[A]. 徐烈炯. 共性与个性——汉语语言学中的争议[C]. 北京: 北京语言文化大学出版社, 1999 , 30-50 报纸文章的格式：
[序号]主要编著者. 文献题名 [N]. 报纸名, 出版日期 (版次)
[4]谢希德.创造学习的新思路[N]. 人民日报, 1998-12-25(10) 电子文献格式：
[序号]主要编著者. 电子文献题名[电子文献及载体类型标识]. 电子文献的出处或可获得地址, 出
版年, 发表或更新日期/引用日期
[5]王明亮.关于中国学术期刊标准化数据库系统工程的进展[EB/OL]. http://www. /
pub/wml.txt/980810-2.html, 1998, 1998-08-16/1998-10-04
五、论文文字要求
1. 力求做到语句通顺达意，句子结构完整，词语搭配正确，标点符号使用恰当。
2. 避免使用过于口语化的语言。
3. 正文中尽量减少中英文交替使用的现象。
4. 标题层次清楚。同一层次的标题要么统一使用名词短语，要么统一使用动词短语，一般不使用
完整的句子。各级标题单独占一行，不同级标题间段落格式可自行适当进行调整，标题末尾不加标点。
附：第三届地理科学学院学生课外科研立项课题结题论文格式范例
共青团华南师范大学地理科学学院委员会
二〇一〇年十一月二十三日
附：第三届地理科学学院学生课外科研立项课题结题论文格式
范例
细胞因子载体药物对HeLa细胞凋亡的长效诱导活性
关燕清 彭仕娟 陈文晓 杨鑫华 欧敏雅 张荷花 钟炼敏
（华南师范大学生命科学学院，广州 510631）
摘要：采用光化学固定化方法将干扰素（IFN-γ）、肿瘤坏死因子（TNF-α）共固定化在12孔聚
苯乙烯培养板(PSt)上。无血清培养子宫颈癌（HeLa）细胞，通过动态细胞计数跟踪、倒置显微镜观察，研究细胞因子药物对HeLa细胞凋亡诱导作用的长效活性。结果表明，共固定化干扰素和肿瘤坏死因子能显著诱导HeLa细胞的细胞凋亡，在18天内，细胞发生了典型的细胞凋亡，最高抑制活性可达94.12%,未见细胞有重新生长的现象。
关键字：光固定化 人重组肿瘤坏死因子-α 重组人干扰素-γ 子宫颈癌细胞
子宫颈癌（HeLa）是常见的妇科恶性肿瘤之一，全世界每年约有50万新发子宫颈癌，在中国约有13万，居妇科恶性肿瘤第一位。在临床上常见的宫颈癌治疗方法有手术治疗，药物治疗和物理治疗。但化学药物和放射药物的选择性不高，它们既能抑制和杀伤肿瘤细胞，也可损伤体内正常组织和细胞，在治疗中出现明显的毒副作用；而物理疗法，如激光、冷冻、电灼等治疗较多出现活动性渗血，造成下腹隐痛不适，出现阴道流液甚至感染等副作用，给病人带来极大的生理上和心理上的痛苦。 目前，寻求降低治疗毒副作用、减轻病人痛苦、提高疗效的抗癌药物和治疗方法是肿瘤研究工作者的主要目标。
干扰素(IFN)是诱导细胞产生的具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节功能的一类蛋白质。经过30多年的临床研究和应用,已证明它是一种重要的广谱抗病毒、抗肿瘤治疗药物。肿瘤坏死因子（TNF）是迄今发现的抗癌作用最强的细胞因子。IFN与TNF协同抗肿瘤，可在一定程度上减轻TNF的毒副反应，我们的前期研究也证明了两者的协同作用抑制率明显高于单独使用任何一种细胞因子的抑制率，同时降低了单一细胞因子的剂量。
高分子载体药物具有缓释、长效等优势，已成为新型药物的发展方向之一。利用光化学固定法可以将各种多肽、酶、生长因子、蛋白质等接枝到生物医用高分子材料表面，制备出具有各种活性、各种用途的生物材料。Ito 已经利用光固定法成功地将生长因子、硫酸盐处理的透明质酸[2]、肝磷脂[3]、热敏聚合物 [4] 、促红细胞生成素[5]、β-半乳糖衍生物[6]、pullulan[7]固定在各种材料表面上，并进行体外活性研究。研究表明，固定化生长因子比游离状态的生长因子的传递信 [1]
号作用时间长，光固定后的促红细胞生成素仍然具有刺激细胞活性，且其活性比游离状态的高
[5][1] 。
我们曾经做过共固定化(TNF-α+ IFN-γ)药物诱导HeLa细胞凋亡六天的研究，结果表明，固定药物诱导第五天即达到92％的癌细胞抑制率，而游离药物第三天出现抑制高峰后，到第五天，癌细胞抑制率已经下降到41％。在前期研究的基础上，本研究将两种细胞因子共同偶联12孔组织培养聚苯乙烯基板，通过18天的体外诱导培养，对固定药物的长效性及失效期做进一步研究。
1材料与方法
1.1 材料来源
重组人干扰素-γ购自珠海丽珠生物工程制药厂，重组人肿瘤坏死因子-α购自上海赛达生物药业有限公司，二甲基甲酰胺（DMF）、N-（4-叠氮苯甲酸基）琥珀亚酰胺购自sigma公司。12孔组织培养板为BIOFIL公司产品。 RPMI medium 1640、胰酶为GIBCOBRI公司产品。新小牛血清购自杭州四季春生物工程材料研究所。人子宫颈癌细胞(HeLa细胞系)由中山医科大学动物中心提供，经本实验室传代培养。
1.2 方法
1.2.1 子宫颈癌细胞HeLa细胞株继代培养
细胞培养于RPMI 1640培养液（含10％的新小牛血清、青霉素0.03mg/ml，链霉素0.05mg/ml，pH7.2~7.4），370C，5%CO2培养箱中。传代培养至对数生长后进行实验。
1.2.2 光固定化生物材料制备
参照文献[9]制备光活性IFN-γ与TNF-α。将光活性IFN-γ和TNF-α加入12孔聚苯乙烯（PSt）培养孔内，并置于冰箱里4℃干燥后，在紫外灯(4w) 2cm下处照射15min。利用二甲基甲酰胺叠氮基十分活泼的特点，将细胞因子固定在PSt材料薄膜上。光固定化后用PBS(-) (pH7.4)溶液反复洗涤基板，直至PBS(-)溶液蛋白紫外吸收为零。
1.2.3 HeLa细胞生长抑制的长效性研究
用含有胰蛋白酶0.25%（w/v）和EDTA 0.02%（w/v）的PBS（-）消化HeLa细胞，用血清培养基及无血清培养基洗涤细胞数次，制备成1×106cell/ml的细胞悬液。各取1.5ml细胞液于已共固有药物的培养板和没有药物的培养板（做空白对照），培养细胞。为提供营养，每6天补充0. 5ml无血清培养基模拟体内环境，供给细胞必要的营养。
每48h显微观察、记录和拍摄细胞的生长状况。并用血球计数板计算活细胞数量。重复实验三次。
2 结果与分析
（正文内容省略，不再列举）
3 讨论
TNF-α与IFN-γ是细胞因子网络中的重要组成部分，具有强大的抗肿瘤作用。并且IFN-γ对TNF-α具有显著的协同效应，主要表现在如下几个方面：①促进肿瘤坏死因子的诱生；②增加靶细胞表面肿瘤坏死因子受体的数目，提高靶细胞对肿瘤坏死因子的敏感性[10，11]。
两种细胞因子在临床上已用于治疗各种恶性肿瘤，但大剂量全身用药会产生毒副作用，降低剂量又难以在局部达到有效的抗癌效果，因而，寻求不同细胞因子之间协同抗肿瘤作用成为目前研究的焦点。
在本研究中，我们采用光化学固定法将两种细胞因子共同接枝到聚苯乙烯材料上，制备出具有抗肿瘤活性的固定化TNF-α与IFN-γ。其中图1的结果表明，细胞因子的各种剂量（20~100ng/well）对于HeLa细胞都有不同程度的抑制效应，而在低剂量20ng/well时抑制作用极其显著，抑制率为82％。因而，我们选用20ng/well做为共固定剂量，并对共固定药物进行18天的长效性研究。
由图2，我们可以直接观察到药物诱导6天到18天HeLa细胞的形态学变化情况。结果表明，HeLa细胞出现了典型的细胞凋亡现象，并且随着时间的延长，展现出早期凋亡到晚期凋亡的变化过程，这从形态学的角度证实了固定化药物的长效活性。
固定化药物的长效活性也可从图3中得到印证。由图3可知，共固定化药物（20ng/well）对HeLa细胞生长有抑制效应，并且抑制效果持续18天，在第18天达到抑制顶点，抑制率为94.12％。实验中发现，第6～11天出现细胞数目的小波动，我们认为是由于新的培养基补充，在一定程度上改变细胞生长环境而使细胞数目有微回升。
Ito等认为固定的活性因子可避免被细胞内吞、消耗，保证与细胞表面受体长时间相互作用，从而起到提高活性因子的活性，延长活性因子的作用时间的作用[8]。我们认为共固定化两种细胞因子亦可通过避免细胞的内吞、消耗作用而保持持续的抑制癌细胞增殖的效果。
综上所述，我们认为是TNF-α与IFN-γ经光共固定化制成高分子药物后，两种细胞因子表现出显著的抑制宫颈癌HeLa细胞体外生长的作用，诱导HeLa细胞凋亡，使细胞数量显著下降，抑制作用长达18天并未见细胞成长。经固定有TNF和IFN的生物材料，可以进一步研制一种具有抗肿瘤活性的宫颈药帽，戴在人类子宫颈上，直接与宫颈癌细胞表面接触发挥药效。这种载体药物经临床应用后，可望成为一种理想的治疗宫颈癌的靶向药物，将为子宫颈癌的临床提供了一种新的治疗手段。
参考文献
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tion [J].Biomaterials , 2004, 25:5101-5106
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