竹笋壳提取物对平菇菌丝生长的影响

一、实验目的

采用平板培养法，探究竹笋提取物对平菇菌丝生长的影响。

二、实验流程

制作培养基：制作PDA培养基，趁热将培养基分装到两只试管上为试管培养基，剩余培养基装入500ml三角瓶备用；高压灭菌：培养基及实验用到所有工具置于灭菌高压锅灭菌25min，灭菌后将试管培养基斜放培养24h；菌种活化：将保存的菌种接入到试管培养基斜面上置于25℃恒温箱中培养，使菌种活化;制备平板菌种：将已灭菌的培养基制成平板培养基，待冷却后，取已活化的菌种一小块接入到平板培养基中部，置于恒温箱中培养十天左右，待平面布满菌丝，获得平板菌种；制备供试培养基：根据配方，制备五组不同成分的供试培养基，待冷却后，用无菌打孔器在平板菌种上取相同菌种接到供试培养基中部，置于25℃恒温箱中培养。每三天观察一次，将菌丝生长情况记录到观察表上，得出实验结论。

注：所有接种工作都要在无菌环境（超净工作台）下操作，所有菌种都要在无光照环境下培养。

三、实验内容与方法

(一)  制备PDA培养基

1.   PDA培养基材料

            马铃薯100g、葡萄糖10g、琼脂粉8g、水500ml；

2.   实验仪器及用具

试管、三角瓶、烧杯、量杯、漏斗、纱布、棉塞、电炉、天平、高压蒸汽灭菌锅、漏斗架等。

3.   制备营养液  先将马铃薯洗净去皮，称取100g, 然后将马铃薯切成玉米粒大小的颗粒。用量杯量取500ml水于锅内煮马铃薯，待水沸后计时20min～30min，再用双层纱布过滤，取其滤液定容至500ml于烧杯中，加入葡萄糖和琼脂，加热融化。

4.   分装  制备好的培养基，热分装到2支试管中。将培养基加入漏斗中，左右手握住试管，右手持漏斗下面的的玻璃管入试管口内，然后放开止水夹，让培养基流入试管内，约10～20ml，注意避免将培养基沾到试管口内外，塞好棉塞，贴上标签。剩余培养基准入三角瓶，准备灭菌。

（二）培养基及用具的灭菌

1.   首先将高压灭菌锅的内层锅取出，加入适量的水，是水面与三角搁架相平为宜，放回内层锅。

2.   把本实验所有用具如培养皿、接种铲、镊子、打孔器用报纸包成2层（包完一层后再包一层），一同和培养基放入锅内。注意不要装得太挤，以免妨碍蒸汽的流通影响灭菌效果。

3.   加盖，并将盖上的排气软管插入内层锅的排气槽内，对称扭紧螺栓。打开加热开关，调节温度、时间，为121℃、25min。打开排气阀，待锅内冷空气排完再关上排气阀。

4.   时间到高压锅会发出警鸣声，关闭电源，待压力表降至零时，打开排气阀，打开盖子取出物品。趁热将试管培养基斜放，培养基以试管长度的2／3为宜。自然冷却置于恒温箱24h后，无污染便可接种。

（三）菌种活化（母种转管）

1.      材料与仪器用具

 保存的母种，试管培养基，酒精棉球，75%酒精，超净工作台，接种铲，酒精灯，打火机，记号笔等。

2.       转管方法 （共接种2支试管）

   清洗超净工作台里外，把需要的材料与工具放入超净工作台并用酒精灭菌。双手也酒精擦拭后，点燃酒精灯，灼烧接种工具。用左手托住两只试管，用右手小拇指和无名指夹住棉塞取下，置试管口与酒精灯焰附近，试管口过火焰灭菌。接种铲在火焰上灼烧片刻，再横过火焰2～3次，然后再放入母种内，在管壁上停留片刻待其冷却。切成绿豆粒大小的菌种，取出接入试管培养基上，试管口和棉塞再次火焰灭菌，塞好棉塞，写上菌种名称及日期。烧死接种工具上的残余菌。

3.  菌丝培养

   将接种好的试管置于25℃恒温培养箱中无光照培养10d左右，当菌丝布满斜面，无污染即可用于接种平板培养基。

（四）制备平板菌种

1.  材料与仪器用具

   试管菌种，已高压灭菌的培养基、培养皿，酒精棉球，75%酒精，超净工作台，接种铲，酒精灯，打火机，记号笔等。

2. 接种方法

 （1）制备平板培养基  用酒精清洗工作台里外，把需要的材料与工具放入超净工作台并用酒精灭菌。双手也酒精擦拭后，点燃酒精灯，火焰灼烧接种铲、镊子，培养皿边缘接口处过火焰数次。置于与酒精灯焰附近，右手持三角瓶培养基，右手食指和中指夹住棉塞，瓶口过火焰灭菌。左手托住培养皿，食指和大拇指轻轻打开培养皿盖，三角瓶瓶口不要接触到培养皿，慢慢倒入培养基，约15ml。注意收尾时，培养基不要滴到培养皿边缘，以防污染。迅速盖上培养皿，培养皿边缘接口处再次过火焰数次，放置在超净工作台上，待其自然冷却，共倒三个平板培养基。倒完后，瓶口和棉塞再次火焰灭菌，塞好棉塞。

 （2）获取平板菌种  平板培养基冷却后，便可接种。先左手拿试管，右手小拇指和无名指夹住棉塞取下，置试管口于酒精灯焰附近，试管口过火焰灭菌。接种铲在火焰上灼烧片刻，再横过火焰2～3次。放入试管内，在管壁上停留片刻待其冷却，切出绿豆粒大小的菌种，迅速拿出接种铲，试管口和棉塞再次过火焰灭菌，塞好棉塞后放下试管。然后左手拿起平板培养基，食指和拇指打开培养皿盖，将菌种快速接到培养基中央并盖好，培养皿边缘接口处再次过火焰数次。写上菌种名称及日期，灼烧接种铲，杀死残余菌。

3. 菌丝培养

   将接种好的平板培养基置于25℃恒温培养箱中无光照培养10d左右，当菌丝布满平面，无污染即可用于接种供试平板培养基。

（五）制备供试平板菌种

            1. 制备供试培养基

             （1）供试培养基材料

               马铃薯、葡萄糖、琼脂粉、水、干竹笋壳；

（2）实验仪器及用具

三角瓶、烧杯、量杯、纱布、棉塞、电炉、天平、平板培养皿、高压蒸汽灭菌锅等。

（3）供试培养基配方

     供试配方为五种：其中配方A为CK，详见表一：

                        表一

按表一配方，共五组供试培养基，以配方B组为例：马铃薯去皮去芽切碎称取100g，竹笋壳剪碎称取10g用水浸湿，沥水备用。用量杯量取500ml水置于锅内煮马铃薯与竹笋壳，待水沸后煮25min，再用双层纱布进行过滤，取其滤液定容至500ml于烧杯中，趁热加入10g葡萄糖和8g琼脂，待其完全溶解，再分装到三角瓶中，注意避免将培养基沾到瓶口内外，盖上棉塞，用牛皮纸绑住瓶口并写上标签，准备灭菌。

2. 培养基及用具的灭菌

               将本实验用到得接种工具（镊子及打孔器）用报纸包装2层（先包装一层在包装第二层）后和培养皿（培养皿的反面用记号笔以培养皿的直径画上“十”字，交叉点为菌种的接入点）、培养基一同放入高压蒸汽锅灭菌25min。灭菌后将培养基置于25℃恒温培养箱培养24h，无污染即可用于接种。

3. 制备供试培养基及接种

  （1）材料与仪器用具

   培养好的平板菌种，已灭菌的镊子、打孔器、培养皿、供试培养基，酒精灯，超净工作台、75%酒精及棉球，记号笔，电炉等

（2）制备供试培养基

先将培养基加热溶解备用。用酒精清洗工作台里外，把所有需要的材料与工具放入超净工作台并用酒精灭菌。双手也酒精擦拭后，点燃酒精灯，培养皿边缘接口处过火焰数次。置于与酒精灯焰附近，右手持三角瓶培养基，取下棉塞，右手中指和食指夹下棉塞，瓶口过火焰灭菌。左手托住培养皿，用食指和大拇指轻轻打开培养皿盖，三角瓶瓶口不要接触到培养皿，慢慢倒入培养基，约15ml。注意收尾时，培养基不要滴到培养皿边缘，以防污染。迅速盖上培养皿，瓶口和棉塞再次火焰灭菌，塞好棉塞。培养皿边缘接口处再次过火焰数次，放置在超净工作台上，做好标记。共五组，每组共倒5个平板培养基，待其自然冷却后，便可接种。

             （3）接种方法

                  将之前培养好的平板菌种表面消毒后放入超净工作台，灼烧镊子及打孔器，待打孔器冷却后，在平板菌种上打孔，共打25个。再用镊子小心将打好的菌种连同培养基迅速夹入供试培养基的正中央（划线交叉点上）。注意做好标记，待接种完毕再用记号笔写上标签。

            4. 菌丝培养及结果观察

             （1）接种好的平板培养基置于25℃恒温培养箱中无光照培养。

             （2）菌丝布满平面供试培养基中的任何一个培养基时，便观察各个培养基菌丝生长情况，并将观察结果记录到观察表（表二）。

                 

                                          表二

             （3） 观察指标

                  菌丝体色泽  用“+”表示菌丝体洁白程度：灰白+、白++、洁白+++;

                  菌丝体密度  用“+”表示菌丝体生长密度：悉疏+、较密++、浓密+++;

                  菌落边缘整齐度  用“+”表示菌丝体菌落边缘整齐度的程度：不规则+、较整齐++、整齐+++；

                  菌落圆整  圆整、较圆整、不生长;

    （六）得出实验结果

           根据观察表，得出实验结论。

第二篇：想象作文方案设计

想象作文方案设计

坎山镇小 冯春华

一、设计依据

《课程标准》对学生提出要求：能写简单的记叙文和想象作文；写想象中的事物；运用想象和联想，丰富表达内容；激发学生展开想象和幻想，鼓励写想象中的事物。

而20xx年级儿童正是最赋予幻想的天性，写想象作文最大程度地减少了对他们的约束，为儿童创造性思维的发展提供了广阔的空间，鼓励学生写想象中的事物，教师应解放思想，大胆放手，首先让学生的思维能放得开，能够纵横驰骋，然后再进行一些合理想象、科学想象等方面的训练。同时，想象不是凭空编造，不是无中生有，它是以学生的知识积累、生活积累为基础；为此我从二年级开始便利用早自修和午自修的时间引导学生大量、广泛阅读赋有想象色彩的文学作品，以开阔视野；平时注重引导学生留心观察生活、观察自然、增加体验，为写好想象作文打下基础。

二、设计目标

1、根据桌上提供的实物，让学生能结合自己的生活实际展开合理想象和幻想。鼓励学生在课堂上大胆创造，说出自己最想说的话，敢于自由表达，进一步达到有创意的表达

2、结合自己想象的内容，能自己给作文想个恰倒好处的题目；并能写一段通顺的话。

三、基本内容

1、教师在讲台上放一个苹果和一把水果刀，作为本次想象作文的材料。

2、学生第一次想象：见到桌上的苹果想到什么。

3、学生进一步想象，并结合自己的生活，苹果给我们带来什么作用；围绕苹果发生过什么感人的故事。

4、 据自己的想象自拟合适的题目，进行创作

四、时间安排：1课时

五、教学过程

1、谈话引入

1）每天早自修都看见小朋友们在看书，都看些什么书了？（了解学生平时看的多数是

一些童话故事和科普科幻知识）

你从书中看到了什么？（主要让学生能交谈书中的内容留在自己脑子中是怎样的事件、画面，可细到某个心理、表情、动作等。这是让学生看书后的记忆想象发挥）

2）书中的作者能写出这么好的文章，让小朋友们印象深刻。你也想大胆地试试吗？对，我就相信咱们小朋友也能行。

3）这节课咱们就来个新思维作文大比拼，小朋友们可充分发挥自己聪明灵活的想象。

2、出示实物，学生想象说话

教师在讲台上放一个又大又红的苹果和一把水果刀。

1）学生进行第一次想象

A．教师故作神秘，一言不发，扫视学生一、两分钟。（此时学生莫名其妙地看着老师，有几个已经窃窃私语）

B．师（请一生）：你瞪大聪明的眼睛看着我干什么？有什么想说的，想问的吗？（教师先请三、四个学生说说）

C．是啊，看到了老师桌上的大苹果和水果刀你想到了什么？（学生们都很兴奋） 生：我想，老师想干什么？苹果给谁吃呢？

生：我想这苹果又大又红，味道一定很甜，能咬上几口就好了。

生：这节课老师拿个苹果干什么？还有水果刀，难道呆会作为奖励。

生：为了得到这个大苹果，我一定要好好表现

??

2）学生联系生活进行两次想象

@、这个普通的苹果在你的生活中起过或者可以起到什么意想不到的作用吗？（让学生总结生活经验并发挥创造想象）

生：解渴，当我踢球累的时候

生：当我肚子饿的时候可以当饭吃

生：可以让我看着它画画。

生：可以用来雕刻，做模型，比如蜡苹果

生：去哄一个小妹妹，叫她不要打扰我作业

生：可以用来招待小朋友

??

@小朋友讲得真好。围绕这个苹果还可能发生什么动人的故事吗？（重在让学生观察生活、体验生活，培养想象、思维能力）

生：一次，奶奶病了，我用储蓄罐里的钱买了苹果和橘子，挑了最大的一个苹果帮奶奶削好，送到她嘴边，奶奶感动极了。

生：吃过晚饭，我削了苹果，切成一块一块的，小心翼翼地插上牙签，端到桌上，对大家说：“饭后请吃点水果。”大家都夸我懂事

生：我今天被留下来，老师批评我上课不认真。气得妈妈不准我吃苹果，我只好偷了一个，悄悄地来到房间??

生：今天妈妈跟爸爸不知道为什么吵架了，妈妈没做饭，我肚子饿了，又不敢做声，只好拿个苹果充饥，以前甜甜的苹果今天觉得特别难吃，真委屈

生：我的同桌生日到了，我又不想向妈妈要钱买礼物，就用苹果做了一个蜡水果，尽管做得不是很好，但我相信他一定会喜欢的

??

（在学生的这一些回答中，教师要努力成为一位顾问，一位交换交换意见的参加者，一位在适当时机帮助学生挖掘思想内涵的朋友）

3）在想象的基础上，鼓励学生拟个恰如其分的题目

刚才小朋友们讲了那么多，你们的思想可真奇妙，咱们本次想象作文的内容也都有了，可细心的小朋友们还发现，咱们的文章还缺了——题目 结合你自己想象的内容，给这次作文想个恰如其分的题目，好吗？

学生的回答很多：《我为奶奶削苹果》、《水果拼盘》、《有趣的作文课》、《我想得到讲台上的苹果》、《想心事》、《偷苹果》、《吵架了》等等

3、学生练笔

这次文章小朋友们自己定题目，结合苹果自己写你想写的，希望你也能写出一篇让咱们印象深刻的文章，这样你将得到老师奖给你们的大苹果。祝你们成功！