随着生物技术的发展，类似四环素蛋白质等大分子药物不断涌现，其功能越来越受
到人们的重视。四环素蛋白质的结晶是一个复杂的物理化学过程，比一般小分子化合物
的结晶要困难得多，这主要是由于其分子量大，分子空间构象复杂，静电特性，物理化
学性质的不稳定，本身带有辅基，配体等特殊因子，许多蛋白质在结晶过程中容易失去
活性，从而使蛋白质的晶体培养工作相当困难。常常得到的是以下几种实验结果：无定
形沉淀 众多的微晶 孪晶 多个晶体的融合体，或有缺陷的单晶体。因此，从总体上来
讲，目前蛋白质等生物大分子的晶体培养仍然是摸索性和经验性的，在某种程度上好要
靠机遇。晶体培养已成为当前障碍提高晶体结构分析速度的关键性问题。
蛋白质的结晶过程像其他小分子物质一样，是一个有序的过程，即在溶液中处于随
机状态的分子转变成有规则排列状态的固体。蛋白质分子的结晶过程一般分为三个阶
段：（1）形核过程，一般认为，该过程是以溶液的过饱和度为推动力使蛋白质分子有序
排列，形成特定大小的晶核，如果小于这一临界尺寸，就会发生自溶现象，最终无晶体
生成；（2）晶体成长，分子不断的结合到形成的晶核上继续生长的过程，对于这一过程
的生长机理描述主要有：扩散—表面反应而不过程理论，二维成核理论，螺旋断层和岛
屿生长理论等；（3）生长停止，引起晶体生长停止的原因各不相同，普遍被接受的理论
是由于晶体的析出导致溶液中蛋白质浓度的下降，使固液相间的扩散交换达到动态平
衡，晶体宏观上表现为停止生长。但是在某些情况下，由于杂质的引入和晶体本身的缺
陷，蛋白质大都以无定形沉淀的形式沉积，而不能得到微晶。总之，这三个阶段按顺序
贯穿整个结晶过程，缺一不可，而且各个阶段之间并没有明显的界限划分。
目前，对于蛋白质结晶的研究多数的结果都只具有一定的针对性，只适应于所研究
的实验对象，对于其他蛋白质，蛋白质的结晶过程都不具有普遍意义。这需要进一步探
讨结晶机理，优化结晶条件，创新结晶技术，以寻找结晶过程中存在的普遍规律，预测
结晶条件，使结晶过程处于可控状态，得到 蛋白质晶体。
目前四环素生产工艺中结晶母液全部排放，造成严重的环境污染。膜分离是截留蛋
白质常用的方法，只要采用合适的膜，就能达到分离的要求。该清洁生产工艺研究目前
属国内首创。
目前进行的研究是四环素清洁生产工艺的实验室阶段研究，如果能成功，进行四环
素生产的工艺进行技术改造，可以为生产企业节省大量的污水治理投资，提高产品的收
率和质量，还可以节省一些生产原料（利用母液可以回收产品和减少某些原料的加入），
创造巨大的环境效益和经济效益。
蛋白质结晶的影响因素众多，具体可分为物理因素、化学因素和生物化学因素。物
理因素包括：温度、达到平衡的方法和速率、重力、压力、时间、机械扰动／摆动、电
场／磁场、介质的电解质性质和粘度、均穗或菲均籀成核等；化学困素包括：p奠蕊、
沉淀裁类型和浓度、离子种类、离子强度、过饱和度、氧化／还原环境、蛋白质浓度、交联体和杂质的存在等；生物化学因素包括：蛋白质纯度、配合体、抑制剂、蛋白质的聚集状态、蛋白质来源、蛋白质水解、化学修饰、遗传修饰、蛋白质自身的对称性、蛋白质的稳定和等电点等。
膜分离是截留蛋白质常用的方法，只要采用合适的膜，就能达到分离的要求。目前的四环素生产工艺要产生大量的废水，其中最主要的是四环素的结晶母液。排放的四环素结晶母液化学耗氧量高，又含有抗生素，非常难处理。虽然有多个研究单位对四环素生产的废水治理技术进行了积极的探索，但并未在实际的废水梳理中得到成功的运用，目前国内尚无单独处理四环素废水的生产型装置成功运行，因此探索四环素废水处理新技术并应用到工程实践中去，解决困扰企业多年的环保难题是十分必要的。
清洁生产是指不断采取改进设计、使用清洁的能源和原料、采用先进的工艺技术与设备、改善管理、综合利用等措施，从源头削减污染，提高资源利用效率，减少或者避免生产、服务和产品使用过程中污染物的产生和排放，以减轻或者消除对人类健康和环境的危害。
膜是一种起分子级分离过滤作用的介质，当溶液或混和气体与膜接触时，在压力下，或电场作用下，或温差作用下，某些物质可以透过膜，而另些物质则被选择性的拦截，从而使溶液中不同组分，或混和气体的不同组分被分离，这种分离是分子级的分离。
利用多孔性介质(如滤布)截留固-液悬浮液中的固体粒子，进行固-液分离的方法称为过滤。其中多孔性介质称为过滤介质；所处理的悬浮液称为滤浆；滤浆中被过滤介质截留的固体颗粒称为滤饼或滤渣；通过过滤介质后的液体称为滤液。驱使液体通过过滤介质的推动力可以是重力、压力或离心力
蛋白质结晶对外部环境是非常敏感的，外部环境的微小变化可能会严重影响蛋白质晶体的质量。因此，要深刻认识和了解蛋白质结晶过程中各影响因素的作用，分析其结晶影响机理。对于不同的蛋自质续晶，选择最佳的结晶方法，进行结晶条件的预测和优化，以得到适合于衍射分析的蛋白质大分子晶体。质量较好的蛋白质晶体的获得是蛋白质结构对蛋白质结构与知识将大大推进生物工程、制药行业及食品等领域的快速发展。
第二篇：参考文献化工系毕业设计(论文)四环素清洁生产工艺研究
参考文献
1. 侯文顺，张柏钦.化学工艺设计概论.北京：化学工业出版社，1995
2. 赵国方，张柏钦.化学工艺设计概论.北京：原子能出版社，1990
3. 国家医药管理局上海医药设计院.化学工艺设计手册.北京：化学工业出版
社，1996
4. 丁洁，化工工艺设计.上海：科学技术出版社，1980
5. 侯文顺，高聚物生产技术.背景：化学工业出版社，20xx
6. 赵国方，化工工艺设计概论.北京：原子能出版社，1990
7. 中央广播电视大学类毕业设计指导书编写组.化工类毕业设计指导书.北京：
中央广播电大出版社，1986
8. 吴绑灿，费龙编著 . 现在环境监测技术 . 北京：中国环境科学出版社，1999
9. 何燧源主编 . 环境污染分析检测 . 北京：化学工业出版社，20xx
10. 李肇星，丁玉兴，化工原理.北京：科学出版社，20xx
11. 欧阳平凯等，生物分离原理与技术.北京：化学工业出版社，1999
12. 任建新，膜分离技术及其应用. 北京：化学工业出版社，20xx
13. 毛忠贵，生物工业下游技术.北京：轻工业出版社，1999
14. 马玉秀编 . 环境监测 . 武汉：武汉工业大学出版社，1999
15. 王英健，杨永红主编 . 环境监测 . 北京 ：化学工业出版社，20xx
16.马玉秀编 . 环境监测 . 武汉：武汉工业大学出版社，1999
17.韩文光主编 . 化工装置实用操作技术指南 . 北京 ：化学工业出版社，20xx
18.姜信真主编 . 化学反应工程学简明教程 . 西安 ：西北大学出版社，1989
19.袁乃驹，丁富新编著 . 化学反应工程基础 . 北京 ：清华大学出版社，1988 20. 华南工学院，发酵工程与设备.北京：轻工业出版社，1987
1 Purnendu K; Dasgupta and Kaj petersen [M];Anal. Chem; 19xx年2 Stefan R; Weijers, Wat [M];Sci. Tech; 19xx年3 Korenaga T; Flow Injection Analysis using Potassium Permanganate: An
approach for Measuring Chemical Oxygen Demand in Organic Wastes and Waters
[M];Anal Lett; 19xx年4 Soo Park, Gyung Yun Park, Soung; Long-term Trends and Temporal
Heterogeneity of Water Quality in Tidally Mixed Estuarine Waters
[M];Marine Pollution Bulletin; 20xx年5 DunCan J; Barker, David C.Stuckey [M];Wat. Res; 19xx年6 Novic M, Pihlar B, Duler, M; [M];Fresenius' Z Anal Chem; 19xx年7 Balconi M L, Borgarello M, Ferraroli R, Realini F; Chemical Oxy gen
Demand determination inwell and liver waters by flow-injection analysis
using a microwave oven during the oxidation step [M];Anal Chim Acta; 1992
年8 Demas J. N. B. A; DeGraff [M];Anal. Chem; 19xx年9 Bruening W, Concha F J M; Selective Detector for Gas Chromatography
Based on the Chemiluminescence of Ozone Reactions [M];J Chromatography;
19xx年10 Jones B M, Sakaji R H, Daughton C G; Comparison of Microcolorimetric
and Macratitrimetric methods for Chemical Oxygen Demand of Oil Shale
Wastewaters [M];Anal Chem; 19xx年