分子生物学复习知识总结

一、名词解释

1．Gene and Genome 基因和基因组

基因：是遗传的物质基础，是DNA（脱氧核糖核酸）分子上具有遗传信息的特定核苷酸序列的总称，是具有遗传效应的DNA分子片段。能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列，是决定遗传性状的功能单位。

基因组：细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和。一般的定义是单倍体细胞中的全套染色体为一个基因组，或是单倍体细胞中的全部基因为一个基因组

2. Signal peptide 信号肽

分泌蛋白新生肽链N端的一段20～30氨基酸残基组成的肽段。将分泌蛋白引导进入内质网，同时这个肽段被切除。现这一概念已扩大到决定新生肽链在细胞中的定位或决定某些氨基酸残基修饰的一些肽段。

3. Opening Reading Frame 开放式阅读框

开放阅读框是DNA上的一段碱基序列，由于拥有特殊的起始密码子和直到可以从该段碱基序列产生合适大小蛋白才出现的终止密码子，该段碱基序列编码一个蛋白。

4. Sense strain 有意链：DNA双链中序列和方向与mRNA的序列完全相同的那条DNA链，又称编码链。

5. Expressed sequence tag(EST) 表达序列标准

从互补DNA(cDNA)分子所测得部分序列的短段DNA(通常300~500bp)。从cDNA文库所得到的许多表达序列标签集合组成表达序列标签数据库，代表在一定的发育时期或特定的环境条件下，特定的组织细胞基因表达的序列。可用于验证基因在特定组织中的表达，推导全长cDNA序列，或作为标签标志基因组中的特殊位点以确定基因的位置等。

6. Microarray 基因芯片

DNA芯片技术是指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接将大量的DNA探针以显微打印的方式有序地固化于支持物表面，然后与标记的样品杂交，通过对杂交信号的检测分析，即可获得样品的遗传信息。由于常用计算机硅芯片作为固相支持物，所以称为DNA芯片。

7. Genomics and RNomics

RNomics：RNA组学，既是核糖核酸组学，研究所有RNA的不同时空表达谱及其生物学意义。 研究RNA组的学科，主要是直接鉴定生物体中非信使小RNA(snmRNA)在特定条件和不同状态下的种类、功能、差异及其与蛋白质的相互作用，是基因组学和蛋白质组学研究的扩充、发展和延伸。

Genomics：基因组学，研究基因组的结构与功能的学科，主要包括DNA的核苷酸序列、遗传信息含量、基因组织和基因数目等，基因组的产物不仅是蛋白质，还有许多复杂功能的RNA。包括三个不同的亚领域，即结构基因组学、功能基因组学和比较基因组学。

8. RNAi RNA干扰

RNA干扰，利用双链小RNA分子高效、特异的降解细胞内同源RNA，从而阻断体内靶基因的表达，使细胞出现靶基因缺失的表型。

9. MicroRNA 微小分子RNA

是一种大小约21—23个碱基的单链小分子RNA，是由具有发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成，不同于siRNA（双链）但是和siRNA密切相关。据推测，这些非编码小分子RNA（miRNAs）参与调控基因表达，

10. intron and exon 内含子和外显子

内含子，在不连续基因中无编码功能的区段（在初始转录产物hnRNA加工产生成熟的mRNA

时，被切除的非编码序列是内含子）

真核生物细胞DNA中的间插序列。这些序列被转录在前体RNA中，经过剪接被去除，最终不存在于成熟RNA分子中。内含子和外显子的交替排列构成了割裂基因。在前体RNA中的内含子常被称作“间插序列”。

外显子，在不连续基因中有编码功能的区段（在初始转录产物hnRNA加工产生成熟的mRNA时，留下的编码序列是外显子）

真核生物基因的一部分，它在剪接(Splicing)后仍会被保存下来，并可在蛋白质生物合成过程中被表达为蛋白质。外显子是最后出现在成熟RNA中的基因序列,又称表达序列。既存在于最初的转录产物中，也存在于成熟的RNA分子中的核苷酸序列。术语外显子也指编码相应RNA外显子的DNA中的区域。所有的外显子一同组成了遗传信息，该信息会体现在蛋白质上。

二、简答题

1病毒、原核生物基因组与真核生物基因组结构特点是什么？

① 种类单一；②单倍体基因组：每个基因组在病毒中只出现一次；③形式多样；④大小不一；⑤基因重叠；⑥动物/细菌病毒与真核/原核基因相似：内含子；⑦具有不规则的结构基因；⑧基因编码区无间隔：通过宿主及病毒本身酶切；⑨无帽状结构；⑩结构基因没有翻译起始序列。

2、原核基因组的特点：

①为一条环状双链DNA；②只有一个复制起点；③具有操纵子结构；④绝大部分为单拷贝；⑤可表达基因约50%，大于真核生物小于病毒；⑥基因一般是连续的，无内含子；⑦重复序列很少。

3、真核基因组的特点：

①真核生物基因组远大于原核生物基因组，结构复杂，基因数庞大，具有多个复制起点；②基因组DNA与蛋白质结合成染色体，储存于细胞核内；③真核基因为单顺反子，而细菌和病毒的结构基因多为多顺反子；④基因组中非编码区多于编码区；⑤真核基因多为不连续的断裂基因，由外显子和内含子镶嵌而成；⑥存在大量的重复序列；⑦功能相关的基因构成各种基因家族；⑧存在可移动的遗传因素；⑨体细胞为双倍体，而精子和卵子为单倍体。 2举例说明差示筛选组织特异cDNA的方法

制备两种细胞群体，目的基因在其中一种细胞中表达或高表达，在另一种细胞中不表达或低表达，然后通过杂交对比找到目的基因。

例如：在肿瘤发生和发展过程中，肿瘤细胞会呈现于正常细胞表达水平不同的mRNA，因此，可以通过差示杂交筛选出与肿瘤相关的基因。也可利用诱导的方法，筛选出诱导表达的基因。

3分别写出6种以上RNA的功能

m RNA

t RNA

r RNA

silencing RNAsiRNA主要参与（RNAi）现象，以带有专一性的方式调节基因的表达

miRNAmicroRNAs（miRNAs）是一种小的，类似于siRNA的分子，由高等真核生物基因组编码，miRNA通过和靶基因mRNA碱基配对引导沉默复合体（RISC）降解mRNA或阻碍其翻译。miRNAs在物种进化中相当保守，在植物、动物和真菌中发现的miRNAs只在特定的组织和发育阶段表达，miRNA组织特异性和时序性，决定组织和细胞的功能特异性，表明miRNA在细胞生长和发育过程的调节过程中起多种作用。

HnRNA:核内不均一RNA胞核中的一大类分子质量不一致的RNA分子。被视为信使核糖核酸(mRNA)的初级转录产物，经过一系列加工步骤才能产生成熟的、有功能的Mrna SnRNA;核内小RNA参与HnRNA的剪切和转运

SnoRNA:核仁小RNA: rRNA的加工与修饰 SCRNA/7SL RNA:

真核细胞有细胞核和细胞浆中都含有许多小RNA，它们约有100到300个碱基，每个细胞中可含有105-106个这种RNA分子。它们是由RNA聚合酶Ⅱ或Ⅲ所合成的. scRNA则参与蛋白质的合成和运输, 如SRP颗粒就是一种由一个7SRNA和蛋白质组成的核糖核蛋白体颗粒,主要功能是识别信号肽, 并将核糖体引导到内质网。

小胞浆RNA(scRNA,small cytosol RNA)又称为7SL?RNA，长约300个核苷酸，主要存在于细胞浆中，是蛋白质定位合成于粗面内质网上所需的信号识别体(signal recognization particle)的组成成分

:

4以你将要开展的分子生物学研究为例，如何撰写开题报告？

开题报告包括综述、关键技术、可行性分析和时间安排等四个方面 。由于开题报告是用文字体现的论文总构想,因而篇幅不必过大,但要把计划研究的课题、如何研究、理论适用等主要问题写清楚。开题报告的总述部分应首先提出选题，并简明扼要地说明该选题的目的、目前相关课题研究情况、理论适用、研究方法。

开题报告的内容大致如下：课题名称、承担单位、课题负责人、起止年限、报名提纲。开题报告以及怎么写

1、课题来源及研究的目的和意义；

2、国内外在该方向的研究现状及分析；

3、主要研究内容及创新点；

4、研究方案及进度安排，预期达到的目标；

5、为完成课题已具备和所需的条件和经费；

6、预计研究过程中可能遇到的困难和问题及解决的措施；

7、主要参考文献；

5举出分子生物学研究中常用的工具酶及良好载体的条件

工具酶

连接酶：①DNA连接酶：T4DNA连接酶、大肠杆菌DNA连接酶②RNA连接酶

聚合酶：①DNA聚合酶：

1、 依赖于DNA的DNA聚合酶：大肠杆菌DNA聚合酶 Ⅰ、Klenovo酶、T4 DNA聚合酶、天

然的T7 DNA聚合酶、经修饰的T7 DNA聚合酶、Taq DNA聚合酶

2、 不依赖于DNA的DNA聚合酶（末端转移酶）

3、 依赖于RNA的DNA聚合酶（反转录酶）

②RNA聚合酶：依赖于DNA的RNA聚合酶、不依赖于DNA的RNA聚合酶（Poly（A）聚合酶） 激酶、磷酸酶：碱性磷酸酶、T4多核苷酸激酶

核酸酶：①核酸外切酶：

1、 单链5ˊ→3ˊ和3ˊ→5ˊ核酸外切酶（exoⅦ）

2、 双链5ˊ→3ˊ末端外切酶：λ噬菌体核酸外切酶、T7基因6核酸外切酶

3、 双链3ˊ→5ˊ核酸外切酶（exoⅢ）

②核酸内切酶：Bal 31核酸酶、核酸酶S1、绿豆核酸酶、微球菌核酸酶

③脱氧核糖核酸酶（DNase I）

④核糖核酸酶（RNase）：核糖核酸酶A（RNaseA）、核糖核酸酶H（RNaseH）、核糖核酸T1（RNaseT1）

其他常用酶：①DNa甲基化酶②DNA结合蛋白：单链DNA结合蛋白（SSB）、RecA蛋白③拓扑异构酶I

良好载体的条件：

1能在宿主细胞中大量复制，得到大量的重组DNA分子

2载体上的内切酶微点对于一种酶来说只能有一个（置换型载体上被置换片段的两侧各有一个内切酶位点

3克隆载体要有复制起点，表达载体要有启动子

4载体上有报告基因或选择标记基因

5在不影响载体复制和表达的DNA序列上有内切酶酶切位点

6具有较高的外源DNA装载能力

第二篇：分子生物学复习总结

分子生物学

一．绪论

1．分子生物学研究的主要内容包括：1）DNA重组技术；2）基因表达调控的研究；3）生物大分子的结构功能研究；4）基因组、功能基因组与生物信息学研究。P11

2. 分子生物学研究的三大理论和两大技术保证 ：1）xx年代确定了遗传信息的携带者，即基因的分子载体是DNA而不是蛋白质，解决了遗传的物质基础问题；2）xx年代提出了DNA分子的双螺旋结构模型和半保留复制机制，解决了基因的自我复制和世代交替问题；3）xx年代末至xx年代，相继提出了“中心法则”和操纵子学说，成功地破译了遗传密码，充分认识了遗传信息的流动和表达。两大技术保证：1）DNA的体外切割和连接；2）DNA的核苷酸序列分析技术。

二．染色体与DNA

3. 核小体是由H2A、H2B、H3、H4各两个分子生成的八聚体和由大约200bpDNA组成的。八聚体在中间，DNA分子盘绕在外，而H1则是在核小体的外面。每个核小体只有一个H1。核小体的形成是染色体中DNA压缩的第一个阶段。

4. 原核生物DNA的主要特征：1）原核生物中一般只有一条染色体，且大都带有单拷贝基因，只有少数基因（如rRNA基因）是以多拷贝形式存在的；2）整个染色体DNA几乎全部由功能基因与调控序列所组成；3）几乎每个基因序列都与它所编码的蛋白质序列成线性对应状态。

5．真核细胞染色体具有如下特征：1）分子结构相对稳定；2）能够自我复制，使亲、子代之间保持连续性；3）能够指导蛋白质的合成，从而控制整个生命过程；4）能够产生可遗传的变异。

6. 染色体上的蛋白质包括组蛋白和非组蛋白。组蛋白是染色体的结构蛋白，它与DNA形成核小体。

7．组蛋白具有如下特性：1）进化上的极端保守性；2）无组织特异性；3）肽链上氨基酸分布的不对称性，碱性氨基酸集中分布在N端的半条链上；4）组蛋白的修饰作用，包括甲基化、乙酰化、磷酸化及ADP核糖基化等；5）富含赖氨酸的组蛋白H5，H5的磷酸化在蛋白质的失活过程中起重要作用。

8. 非组蛋白有：HMG蛋白、DNA结合蛋白、H24非组蛋白。

9. C值反常现象：真核细胞基因组的最大特点是它含有大量的重复序列，而且功能DNA序列大多被不编码的蛋白质的非功能DNA所隔开。所谓C值，通常是指一种是生物体单倍体基因组DNA的总量。

10. DNA的二级结构：是指两条多核苷酸反向平行盘绕所生成的双螺旋结构。二级结构的分类，右手螺旋：A-DNA和B-DNA;右手螺旋：Z-DNA。

11. DNA的半保留复制机制：DNA在复制过程中碱基间的氢键首先断裂，双螺旋被分开，每条链分别作为模板合成新链，产生互补的两条链。这样新形成的两个DNA分子与原来DNA分子的碱基顺序完全一样。因此，每个子代分子的一条链来自亲代DNA,另一条链则是新合成的，所以这种复制方式被称为DNA半保留复制。

12. 真核生物DNA的复制与原核生物DNA复制的区别：1）真核生物每条染色体上可以有多处复制起点，而原核生物只有一个复制起点；2）真核生物的染色体在全部完成复制之前，各个起始点上DNA的复制不能再开始，而在快速生长的原核生物中，复制起始点上可以连续开始新的DNA复制，表现为虽只有一个复制单元，但可以有多个复制叉。

13. 原核细胞染色体DNA复制的功能单位是复制子，由起始物位点和复制起点两个部分组成。起始物位点编码复制调节蛋白质，复制起点与蛋白质相互作用并启动复制。

14. 错配修复系统修复的原则是“保存母链，修复子链”，找出错误碱基所在的DNA链，进行修复。

15. 转座子是存在于染色体DNA上可自主复制和移位的基本单位。可分为：IS序列、复合式转座子、Tna家族。

三、生物信息的传递（上）从DNA到RNA

16. DNA是储藏遗传信息的最重要的生物大分子，DNA双链可以分为：编码链和模板链。

17. 转录的基本过程：模板识别、转录起始、通过启动子及转录的延伸和终止。

18. ?因子的作用：使RNA聚合酶全酶识别启动子序列的特异性总共提高了107倍。

19. 转录起始复合物：当新生RNA链达到6-9个核苷酸使才能形成稳定的RNA聚合酶-DNA-RNA三元复合物，释放?因子，表示转录起始的终止，转录进入延伸期。

，20. 启动子是一段位于结构基因5端上游区的DNA序列，能活化RNA聚合酶，使之与模板

DNA准确地相结合并具有转录起始的特异性。启动子结构：1）转录起始点；2）-10区(TATA区)；3）-35区(TTGACA区)。

21. 原核生物DNA的-10区与-35区的距离为16-19bp时，能够维持启动子的活性。另外，增强子也具有强化转录起始的作用。

22. 真核生物启动子区包括:TATA区、CAAT区、GC区、增强子，习惯上将TATA区上游的保守序列称为上游启动子元件或上游激活序列。

23. 原核生物mRNA与真核生物mRNA的特征比较：

原核生物mRNA的特征：1）原核生物mRNA的半衰期短；2）许多原核生物mRNA以多顺

，，反子的形式存在；3）原核生物mRNA的5端无帽子结构，3端没有或只有较短的poly(A)

结构。

，真核生物mRNA的特征：1）真核生物mRNA的5端存在帽子结构；2）绝大多数真核生物

mRNA具有poly(A)尾巴。

四、生物信息的传递（下）mRNA-蛋白质

24. 三联子密码：mRNA上每3个核苷酸翻译成蛋白质多肽链上的一个氨基酸，这三个核苷酸就称为密码，也叫三联子密码。

25. 移码突变：在开放阅读框内插入非3的倍数的密码子引起的突变叫做移码突变。

26. 密码子的简并性：由一种以上密码子编码同一种氨基酸的现象称为密码子的简并性，对应于同一种氨基酸的密码子称为同义密码子。

27. rRNA的三叶草型二级结构，由受体臂、TΨC臂、多余臂、反密码子臂、D臂组成，其中最重要的两条臂是受体臂和反密码子臂。

28. 核糖体由大、小两个亚基组成，小亚基组要负责对模板mRNA进行特异性识别，mRNA的结合位点也在小亚基上；大亚基负责携带氨基酸及tRNA的功能，肽键的形成，AA-tRNA、肽基-tRNA的结合等，A位、P位、转肽酶中心等主要在大亚基上。

29. 蛋白质合成的生物学机制。大致步骤：氨基酸的活化，肽链的起始，肽链的延伸，肽链的终止及释放，肽链的折叠和加工。

A. 氨基酸的活化：氨基酸在氨酰-tRNA合成酶的作用下生成活化氨基酸：AA-tRNA。（原核

fMetMet生物首先被活化的是fMet-tRNA,真核生物则是Met-tRNA）

B. 翻译的起始：（IF因子的参与）核糖体上三个与氨酰-tRNA结合的位点：A位、P位、E位。在原核细胞核糖体翻译起始时，只有fMet-tRNAfMet能与第一个P位点结合，其他所有tRNA都必须通过A位到达P位，再由E位离开核糖体。

C. 肽链的延伸：包括后续AA-rRNA与核糖体结合、肽键的生长、移位三个步骤。

D. 肽链的终止：RF与终止密码子相结合后，诱导肽基转移酶把一个水分子而不是氨基酸加到延伸中的肽链上，水解P位上与多肽链与tRNA之间的二脂键。

E. 蛋白质的前体加工：包括N端fMet或Met切除，二硫键的形成，特定氨基酸的修饰，切除新生肽链中非功能片段。

30. 信号肽的结构特点：1）一般带有10-15个疏水氨基酸；2）在靠近该序列N端常常有1个或数个带正电荷的氨基酸；3）在其C-末端靠近蛋白酶切割位点处常常带有数个极性氨基酸，离切割位点最近的那个氨基酸往往带有很短的侧链（丙氨酸或甘氨酸）。

31. 信号肽假说:1）完整的信号肽是保证蛋白质运转的必要条件；2）仅有信号肽还不足以保证蛋白质运转的发生；3）信号序列的切除并不是运转所必需的；4）并非所有的转运蛋白质都有可降解的信号肽。

32. 信号肽的定义：能启动蛋白质转运的任何一段多肽。

33. 前导肽对线粒体蛋白质的识别和跨膜有关键作用。

34. 前导肽的结构和功能：1）前导肽通常是疏水的；2）带正电荷的碱性氨基酸（特别是精氨酸）含量较为丰富，它们分散于不带电荷的氨基酸序列之间；3）羟基氨基酸（特别是丝氨酸）含量较高；4）有形成两亲α-螺旋结构的能力；5）带正电荷的碱性氨基酸在前导肽中有重要作用，如果它们被不带电荷的氨基酸所取代，就不能发挥牵引蛋白质的过膜的作用。

五、分子生物学研究方法：

35. 电泳：指带电粒子在电场中向与自身电荷相反的电荷的电极移动的现象。

36. 迁移率：电泳分子在电场作用下迁移的速度，它与电场强度和电泳分子本身携带的净电荷成正比，与分子的摩擦系数成反比。

37. 分子杂交：标记的探针DNA变性后与变性后的靶DNA/RNA通过碱基互补配对结合，形成杂种分子的过程。

38. 核酸探针：是指能与特定核苷酸序列发生特异性互补的已知核苷酸片段，因而可检测样品中特定的基因序列。

39. 聚合酶链式反映(PCR)技术

原理：将双链DNA分子在临近沸点的温度下加热分离成两条单链DNA分子，DNA聚合酶以单链DNA作为模板并利用反应混合物中的四种脱氧核苷三磷酸合成新生的DNA互补链。 PCR三步曲:DNA解链（变性，90-95℃）；引物与模板DNA相结合（退火，45-55℃）；DNA合成（延伸，72℃左右）。

2+PCR反应应加入：模板DNA、PCR引物、四种核苷酸及适当浓度的Mg。

40.琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳的区别：

1）前者是水平电泳，后者是垂直电泳；2）前者为DNA本身的电荷，后者为SDS复合后的电荷；3）前者为EB染色，后者为考马斯亮蓝染色。

41.DNA序列分析：Sanger双脱氧终止法。

六、基因的表达调控（上）

42.组成型合成蛋白质：合成速率不受环境变化或代谢状态影响的蛋白质。与之对应的是适应型或调解型蛋白质。

43.顺式作用元件（DNA上）与反式作用因子（蛋白质上）

顺式作用元件:是指对基因表达有调节活性的DNA序列，其活性只影响其自身处在同一个DNA

分子上的基因，同时，DNA序列通常不编码蛋白质，多位于基因旁侧内含子

中，如增强子。

反式作用因子：是能调节与它们接触的基因表达的扩散分子（通常是蛋白质），如转录子；

其编码基因与其识别或结合的靶核苷酸序列不在同一个DNA分子上。

44.原核基因调控机制的类型：负控诱导和负控阻遏，其调节产物是阻遏蛋白；正控诱导和

正控阻遏，其调节产物是激活蛋白。

45.通过代谢物调节的基因活性主要有可诱导和可阻遏两大类。

可诱导调节：是指一些基因在特殊的诱导物或化合物的作用下，由原来关闭的状态转变为工

作状态即在某些物质的诱导下使基因活化，如大肠杆菌的乳糖操纵子。

可阻遏调节：这类基因平时都是开启的，处在生产蛋白质或酶的工作过程中，由于一些特殊

代谢物或化合物的积累而将其关闭，阻遏了基因的表达。

46.弱化子：当操纵子被阻遏，RNA合成被终止时，起终止转录信号作用的那一段核苷酸被

称为弱化子。

47.葡萄糖效应（降解物的抑制作用）：指当葡萄糖和其他糖类一起作为细菌的碳源时葡萄糖总是优先被利用，葡萄糖的存在阻止了其他糖类的利用的现象。

48.转录因子：是转录起始过程中，RNA聚合酶所需要的辅因子，它是能参与正调控的反式

作用因子。

49．乳糖操纵子包括三个结构基因：Z、Y和A，以及启动子、控制子和阻遏子等。

50．Lac操纵子的控制模型：

1）Z、Y、A基因的产物由一条多顺反子的mRNA分子所编码；

2）该mRNA分子的启动区（P）位于阻遏基因（I）与操纵区（O）之间，不能单独起始半乳糖苷酶和透过酶基因的高效表达；

3）操纵区是DNA上的一小段序列（仅为26bp），是阻遏物的结合位点；

4）当阻遏物与操纵区相结合时，lac mRNA的转录起始受到抑制；

5）诱导物通过与阻遏物结合，改变它的三维构象，使之不能与操纵区相结合，从而激发lac mRNA的合成。

51．Lac操纵子的诱导物：异乳糖，异丙基巯基半乳糖苷（IPTG），巯甲基半乳糖苷（TMG）。

52．Trp操纵子的负控阻遏系统：trpR基因突变常常引起trp mRNA的组成型合成，该基因产物因此被称为辅阻遏蛋白。当培养基中的色氨酸含量较高时，它与游离的辅阻遏蛋白相结合，并使之与操纵区DNA紧密结合；当培养基中色氨酸供应不足时，辅阻遏物失去色氨酸并从操纵区上解离，trp操纵子去阻遏。

53．trp操纵子的弱化作用：前导肽基因中有两个相邻的色氨酸密码子，所以这个前导肽的翻译必定对tRNATrp十分敏感。 1）当培养基中色氨酸的浓度很低时，负载有色氨酸的tRNATrp也就少，这样翻译通过两个相邻的色氨酸密码子的速度就会很慢，当4区被转录完成时，核糖体才进行到1区（或停留在两个相邻的Trp密码子处），这时的前导区结构是2-3配对，不形成3-4配对的终止结构，所以转录可以继续进行，直到将trp操纵子中的结构基因全部转录。 2）而当培养基中色氨酸的浓度高时，核糖体可顺利通过两个色氨酸密码子，在4区被转录之前，核糖体就到达2区，这样使2-3不能配对，3-4区可以著有配对形成茎-环状终止结构，转录停止，trp操纵子中的结构基因被关闭而不再合成色氨酸。所以，弱化子对RNA聚合酶的影响依赖于前导肽翻译中核糖体所处的位置。

54．半乳糖操纵子 包括3个结构基因：异构酶（galE），半乳糖-磷酸尿嘧啶核苷转移酶（galT），半乳糖激酶（galK）。这三个酶的作用是使半乳糖变成葡萄糖-1-磷酸。

55．Gal操纵子与lac操纵子所不同的是galR与galE、T、K及操纵区O等的距离都很远，而galR产物对galO的作用与lacI-lacO的作用相同。

56．基因表达的转录调控是生物最经济的调控方式。转录生成mRNA以后，再翻译生成或翻译后水平进行“微调”，是对转录调控的补充，它使基因表达的调控更加适应生物本身的需求和外界条件的变化。

57．mRNA 3’端poly(A)的长短对翻译效率有很大影响。细胞中蛋白质合成旺盛时，mRNA链上核糖体数量就多，mRNA链上的poly(A)也较长。当某些mRNA链不再被翻译时，核糖体就被释放出来，其poly(A)也相应缩短。

七、基因的表达与调控（下）

58．基因扩增：指某些基因的拷贝数专一性大量增加的现象，它使细胞在短时期内产生大量的基因产物以满足生长发育的需要，是基因活性调控的一种方式。

59．基因重排：将一个基因从远离启动子的地方移到距离它很近的位点从而启动转录，这种方式被称为基因重排。

60．DNA的甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变，从而控制基因表达。

61．真核生物的转录调控大多数是通过顺式作用元件和反式作用因子复杂的相互作用来实现的。

顺式作用元件：是指存在于基因DNA中的特异性调控序列。真核基因的顺式作用元件按照功能可以分为启动子和增强子。

反式作用因子：是能直接或间接地识别或结合在各种顺式作用元件8-12bp核心序列上，参与调控靶基因转录效率的一组蛋白质。顺式作用元件必须与反式作用因子结合才能对转录起到调控作用。

62．蛋白激酶根据底物蛋白质被磷酸化的氨基酸残基种类可以分为三大类：1）丝氨酸/苏氨酸型；2）酪氨酸型；3）组氨酸型。

63．依赖于cAMP的蛋白激酶称为A激酶（PKA）。 依赖于Ca2+的蛋白激酶称为C激酶（PKC）。

64．酪氨酸激酶（PTK）包含跨膜受体家族与胞质非受体家族两大类。跨膜受体家族由胞外结合配体结构域、跨膜结构域和细胞质激酶结构域组成。

65．应答元件：能与某个（类）专一蛋白因子结合，从而控制基因特异性表达的DNA上游序列。

66．热激蛋白调控基因表达的机制：1）在没有受热或其他环境胁迫时，HSF主要以单体形式存在于细胞质和核内。2）受到热激活其他环境胁迫时，细胞内变形蛋白增多，它们都与HSF竞争结合Hsp70，从而释放HSF，使之形成三体并输入核内，HSF被迅速磷酸化。3）HSF与HSE的特异性结合，引起包括Hsp70在内的许多热激应答基因表达，大量产生Hsp70蛋白。4）随着热激温度的消失，细胞出现大量游离的Hsp70蛋白，它们与HSF结合，形成没有DNA结合能力的单体并脱离DNA。

八、疾病与人类健康

67．癌基因可分为两大类：病毒癌基因和细胞转化基因。